一种改良的醋酸纤维素膜血清蛋白等电聚焦电泳方法

目前在等电聚焦电泳技术中,应用最多的是聚丙烯酰胺凝胶平板薄层等电聚焦。该法具有分辨率高的优点,但需采用高纯度试剂,价格昂贵,而且超薄层制板(≤0.5mm)技术要求也较高,这些条件限制了它的推广应用。利用醋酸纤维素膜进行等电聚焦,则可弥补上述缺点。但众所周知,醋酸纤维素膜存在较强     

植物酪氨酸酶分离纯化过程中色素的去除

采用新鲜马铃薯,经匀浆、过滤加入亚硫酸氢钠,制成无色素匀浆。经离心分离,硫酸铵沉淀,Sephadex G-25,DEAE-52,PAGE制备电泳,获得无色素酶提取液。实验结果表明,用亚硫酸氢钠作为抗氧化剂有效地防止了酪氨酸酶分离纯化过程中色素的产生。     

一种构建 cDNA 文库时 Sepharose CL-4B 筛分 cDNA 的简化方法

构建 cDNA 文库时,为了提高获得全长 cDNA 的可能性,在进行连接和包装反应之前,应当采用Sepharose CL-4B 柱层析对 cDNA 首先进行筛分。一般的方法是在提取 mRNA 之后,利用逆转录酶合成cDNA 第一链,然后直接在第一链反应混合液中加入同位素、RNase H 和 E.coli DNA 聚合酶 I 示踪合成cDNA 第二链,再进行甲基化、连接接头并以限制性内切酶消化,上 Sepharose CL-4B 柱层析进行分离。显然这一程序由于多次使用同位素,增加了放射污染材料扩散的可能,也给整个实验过程带来不便。     

表面等离子体激元共振与生物分子相互作用分析

对表面等离子体激元共振（surface plasmon resonance, SPR）的原理和在生物学研究方面的应用进行了综述.这种技术可以直接原位、实时地跟踪生物学实验研究系统,而不需要附加参数如进行标记等手段,具有高敏感性,也可以连续监测吸附或解吸附过程,目前有关的应用涉及到生物学结合分析、动力学及亲和力测定、免疫识别研究、结构与活性研究和核酸研究等多个领域.     

牛心线粒体ATP酶与其抑制蛋白结合特性的研究

利用荧光偏振光谱和生物分子相互作用分析技术（ＢＩＡ）对线粒体ＡＴＰ酶（Ｆ１）与其抑制蛋白（ＩＦ１）的结合特性进行了研究。结果表明,在弱酸性条件下Ｍｇ－ＡＴＰ能够大大促进ＩＦ１与Ｆ１的结合,结合的ＩＦ１对Ｆ１－ＡＴＰ酶表现出最大的抑制活性。在弱酸性没有Ｍｇ－ＡＴＰ存在的条件下,ＩＦ１也可与Ｆ１发生一定量的结合（２０～３０％）,Ｆ１的水解活性也受到同等程度的抑制,ＩＦ１的抑制活性与ＩＦ１、Ｆ１的结合其间显示了密切的量效关系,提示在ＩＦ１与Ｆ１的作用过程中不存在无抑制活性的结合过渡态。Ｚｎ２＋能够抑制ＩＦ１组氨酸残基的质子化,从而阻断ＩＦ１与Ｆ１之间的结合反应