链霉菌11371原生质体的制备与再生

为选育链霉菌11371的高产Tetramycin菌株,摸索该菌株的原生质体的制备与再生。结果表明,链霉菌11371原生质体制备和再生的最佳条件为菌丝生长培养液中甘氨酸浓度为0．7％,培养温度为28℃,培养时间为42h,溶菌酶浓度为3mg／mL,酶解温度为37℃,酶解时间为90min。最佳再生培养基为R2YE培养基。     

链霉菌11371基因工程宿主菌的确定

为消除链霉菌11371内源性质粒对pIJ702的限制,以提高pIJ702转化率,确定11371基因工程宿主菌。采用种内接合转移的方法对链霉菌11371衍生菌U3和P2、P5、P7进行内源性质粒的消除。获得接合转移子U3-P7-6,具有转化外源质粒的能力,转化率为17～20个/100个菌,为链霉菌11371转化体系构建、克隆基因结构、功能鉴定和基因定位等研究提供生物材料。     

不吸水链霉菌梧州新亚种基因组文库的构建

以不吸水链霉菌梧州新亚种为材料,提取的总基因组DNA经Sau3 AI不完全酶切。回收20-30kbDNA酶切片段,与经Hpal和BamHI酶切的粘粒载体pKC505进行连接,将连接产物用噬菌体包装蛋白包装。侵染大肠埃希菌DH5α。在舍有安普霉素的LB平板上培养,所得转化子数为12000个,构建成不吸水链霉菌梧州新亚种的基因组文库。以不吸水链霉菌染色体基因组大小为7Mb计算,概括了不吸水链霉菌梧州新亚种约99％的基因组,达到了建库要求的理论值。未扩增文库的滴度为1．2×10^8pfu／L,扩增文库的滴度为4．8×10^11pfu／L,包装效率为每微克DNA1．2×10^5个转化子。随机挑取菌落,提取重组质粒进行酶切电泳分析,均有外源片段插入。基因文库的构建为进一步深入研究梧宁霉素生物合成基因结构及功能奠定基础。     

乳酸菌肽分离纯化研究

采用凝胶层析对乳酸菌粗提液进行分离、纯化,得到乳酸菌肽纯化样品,对其含量、纯度及抑菌效果等指标进行了测定,得到纯化时间在14~18 h所收集的样品含量最高、纯度最高、抑菌效果最好。从而获得了重要的乳酸菌肽研究资料,为今后更进一步的研究打下基础。     

食用菌产业链下游推移关键节点技术研究进展

随着社会经济的发展和人民生活水平的提高，食用菌作为具有较高营养价值的农产品备受关注。我国作为食用菌生产和消费大国，年产量和总产值迅速提高，但仍存在食用菌产业链发展不均衡问题。在产业链下游推移的过程中，菌种选育技术落后、生产技术标准化程度低、加工技术落后等一些关键节点技术短板，影响着产品品质和附加值，阻碍产业链高效运转。本文通过现场调研、问卷调查及文献查询等方式，通过数据统计分析，明确阻碍食用菌产业链下游推移关键节点，解析关键节点技术问题，提出解决技术短板的方法措施和产业发展建议，为推动食用菌产业高质量发展提供有效支撑。     

一种高效可直接用于PCR扩增的不吸水链霉菌基因组DNA的提取方法

通过对提取不吸水链霉茵基因组DNA的冻融法、微波法和溶茵酶破壁法等几种方法进行对比、分析,得出结论:溶茵酶破壁法所提取的不吸水链霉茵基因组DNA可直接用于PCR扩增.这为今后不吸水链霉菌相关基因的实验研究提供了可靠的理论依据.     

大肠埃希菌DH5α感受态细胞转化率变化的研究

针对本实验室保藏的E.coli DH5α,对该菌株在不同生长时期的转化效率变化情况进行测定,确立了一个能制备高转化率感受态细胞的实验方案。结果表明:在细菌的生长繁殖过程中,其转化率有很大变化;得到了E.coil DH5α菌株制备感受态细胞的最佳条件。     

新型冠状病毒肺炎疫情对辽宁省食用菌产业的影响及应对措施

概述了新型冠状病毒肺炎疫情期间辽宁省食用菌产业生产和管理现状,分析了疫情对辽宁省食用菌产业产前、产中、产后的影响,指出了原辅料准备、菌种(棒)生产、养菌管理、产品销售以及人员用工、交通物流等存在的诸多问题,明确了疫情对食用菌产业结构、销售市场结构、投资市场结构主要的影响因素,提出了应对交通不畅、劳动力匮乏、资金短缺、技术缺乏的具体措施,并对辽宁省食用菌产业健康持续高质量发展提出建议。     

破壁灵芝孢子粉的质量探讨

研究和探讨破壁灵芝孢子粉的质量标准,利用性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别和主要成分含量测定的方法,初步掌握破壁孢子粉质量特性。薄层色谱鉴别可见清晰荧光斑点,其醇溶液加入硫酸后可见棕色环。总灰分测定显示:采自岫岩灵芝孢子粉和山东一等孢子粉灰分较低,山东三等孢子粉灰分含量较高。不同来源的样品总三萜类含量各不相同,高者达2.24%,低者1.26%。综合各项检测结果,初步确定了破壁灵芝孢子粉质量评价指标,方法稳定,可操作性强。     

死谷芽胞杆菌B10发酵条件的研究与抗菌谱的测定

死谷芽胞杆菌B10可抑制多种食用菌病原木霉菌的生长,同时对其他多种食用菌病原真菌有拮抗作用,因此是1株很有潜力的生防菌,具有开发成生防产品的潜能。实验通过摇瓶培养,对死谷芽胞杆菌B10产生抑菌活性物质的发酵培养基和培养条件进行优化,并对其抑菌谱进行了测试。结果表明,实验产生抑菌活性物质的最佳培养基为NB液体培养基,最佳发酵条件为:菌株种龄18 h,发酵周期36 h,初始培养基pH为7.0,培养温度为30℃,摇瓶装液量为100 mL/250 mL,接种量为4%,摇床转速为170 r/min。B10发酵无菌滤液对多种食用菌病原真菌有明显抑制作用,其中对哈茨木霉T22抑制作用最强,抑菌率达90.56%。