秸秆降解菌剂对秸秆还田土壤中细菌种群数量的影响

要研究秸秆降解菌剂施用后1个生长季秸秆中细菌的数量和纤维素酶活力,了解其动态变化,为进一步研究分析土壤中微生物结构变化规律提供可靠的理论依据.利用分子生物学方法,对秸秆降解菌剂施用后不同生长阶段耕层中细菌基因组DNA纯化后PCR扩增其16S rDNA V3可变区,对扩增产物进行DGGE电泳,并对结果进行分析.初步分析表明,菌落数量呈现前期上升、中期最高、后期逐渐降低的趋势.     

链霉菌11371原生质体的制备与再生

为选育链霉菌11371的高产Tetramycin菌株,摸索该菌株的原生质体的制备与再生。结果表明,链霉菌11371原生质体制备和再生的最佳条件为菌丝生长培养液中甘氨酸浓度为0．7％,培养温度为28℃,培养时间为42h,溶菌酶浓度为3mg／mL,酶解温度为37℃,酶解时间为90min。最佳再生培养基为R2YE培养基。     

链霉菌11371基因工程宿主菌的确定

为消除链霉菌11371内源性质粒对pIJ702的限制,以提高pIJ702转化率,确定11371基因工程宿主菌。采用种内接合转移的方法对链霉菌11371衍生菌U3和P2、P5、P7进行内源性质粒的消除。获得接合转移子U3-P7-6,具有转化外源质粒的能力,转化率为17～20个/100个菌,为链霉菌11371转化体系构建、克隆基因结构、功能鉴定和基因定位等研究提供生物材料。     

野生口蘑菌种分离及人工驯化

为了给口蘑人工驯化栽培提供依据,开展了口蘑的碳、氮源营养研究。结果表明,蔗糖和牛肉膏分别为最佳碳源和最佳氮源。经转管纯化及在不同培养基驯化培养,该菌株在PSA培养基上,生长速度快、菌丝变得较浓密。但和双孢菇的菌丝相比,无论在麦粒上还是熟料上,菌丝不够粗壮,距离出菇仍然有一定的差距。口蘑的驯化栽培难度较大,欲获得实质性的突破还在于掌握其生长规律及生态习性。温度因子是影响蒙古口蘑菌丝及子实体正常生长发育的关键因子,作为长期适应低温生态环境的结果,适当温度的摸索将是驯化栽培的关键技术。口蘑具有严格的营养要求,因而培养基的筛选至关重要。     

不同北虫草菌种的收集与分离

北虫草高产菌株的筛选非常重要,优质的北虫草菌株在PDA培养基培养初期菌丝为白色,粗壮浓密,边缘整齐,匍匐状紧贴培养基生长,培养后期或者见光后,分泌黄色色素,菌落呈浅黄色到橘黄色。     

有机物料腐熟剂中纤维素酶活力测定方法的验证

验证有机物料腐熟剂中纤维素酶活力测定方法,为本品活力测定方法的确定提供科学依据。通过DNS显色,对测定方法进行线性关系、准确度（加样回收率）、精密度、重复性等进行验证。此方法线性关系良好,R=0.999 0,平均加样回收率为98.29%,RSD%=0.513 3%（n=9）小于2%。精密度和重复性均符合要求。本测定方法稳定、可靠,可以作为有机物料腐熟剂中纤维素酶活力的测定方法。     

卫星灵芝液体发酵富集硒锌的研究

研究不同浓度的硒、锌对卫星灵芝菌丝体生长的影响,初步探讨卫星灵芝菌丝体生物富集硒、锌的效应。采用平板培养法及液体发酵法研究锌、硒对卫星灵芝菌丝体生长的影响及富集效应。培养基中不同浓度的亚硒酸钠对菌丝体生长均具有不同程度的抑制作用,但灵芝菌丝体的富硒量随着硒浓度的增加而提高,当亚硒酸钠浓度为40 mg/L时,菌丝体中的生物量、富硒量及富硒转化率最高,分别为1.54%、2 131.55 mg/kg、32.91%;培养基中硫酸锌浓度低于150 mg/L的范围内对卫星灵芝菌丝体生长有明显的促进作用,硫酸锌浓度为60 mg/L时菌丝体中的锌含量和富锌转化率最高,分别为1 142.91 mg/kg、1.76%。培养基中同时添加40 mg/L的亚硒酸钠和60 mg/L硫酸锌,菌丝体生长量1.60%,富硒量301.85 mg/kg,富硒率4.84%;富锌量为540.41 mg/kg,富锌率为5.72%。     

工程菌表达时间对重组蚯蚓纤溶酶活性等的影响

确定工程菌诱导表达时间对重组蚯蚓纤溶酶活性、含量、纯度的影响。采用摇瓶发酵 ,通过工程菌诱导表达时间 ,对重组蚯蚓纤溶酶发酵工艺进行了优化。结果可见 ,诱导表达 8h时活性最好 ,含量最高 ,纯度仍然为 1条蛋白带