青杆PwUSP1基因的克隆及表达模式分析

广泛逆境胁迫蛋白（universalstressprotein,USP）在非生物胁迫响应中起重要作用,但在植物中其功能还大部分未知。本研究通过BLAST分析青杆EST文库,得到职zP基因的EST序列,通过RACEPCR方法获取USP基因的末端序列,经过与EST序列拼接得到USP基因的cDNA全长序列,命名为PwUSP1。分析发现PwUSP1全长cDNA为1167bp,编码区为519bp,编码172个氨基酸残基。生物信息学分析显示,PwUSP1编码的蛋白相对分子质量为19．07kDa,理论等电点为6．38,为非跨膜的亲水性蛋白。PwUSP1具有USP家族典型的UspA结构域和ATP结合位点G-（2x）-G-（9x）-G（S／T）。半定量RT-PCR与RT-qPCR分析表明,PwUSP1在青杆的根、茎、针叶、花粉、种子中均有表达,在根和花粉中表达量较高。同时,PwUSP1受干旱和盐胁迫的诱导表达上调,均在处理6h后表达量较高,推测该基因可能在青杆逆境胁迫响应中发挥作用。     

酵母出芽细胞电镜观察、颜色反应与尿素酶活性的比较研究

观察了6个属的1 2株酵母菌出芽时的胞壁结构、重氮基蓝色B盐颜色反应和尿素酶活性,认为出芽型和颜色反应二者有相关性,可以说明这些属种之间的亲缘关系。     

斯氏蚤属在中国的首次纪录及一新种记述（蚤目：角叶蚤科）

本文记述斯氏蚤属Smitipsylla Lewis,1971一新种,方突斯氏蚤S. quadrata sp. nov.。本新种的发现,是斯氏蚤属在中国的首次纪录。本文对其属征作了概述。     

拟南芥转录因子NF-YC的原核表达及多克隆抗体制备

采用PCR方法扩增NF-YC基因得到其全长cDNA序列,并将其克隆至原核表达载体pET-48b中,在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导出分子量约为45 kD的融合蛋白,SDS-PAGE和Western blotting检测鉴定表达产物。利用亲和层析技术对融合蛋白进行纯化,纯化后的目的蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体。间接ELISA检测抗体效价大于1 62 500,Western blotting结果显示,该抗体可特异性识别NF-YC蛋白。     

青杄PsbO基因cDNA序列克隆及生物信息学分析

利用RACE技术从已有的青杄均一化cDNA文库中克隆得到青杄(Picea wilsonii)PsbO基因cDNA的全长,并用生物信息学的方法对该cDNA的核苷酸序列、氨基酸序列的相似性,及编码蛋白PwPsbO的理化性质、亲水性/疏水性、二级和三级结构,PwPsbO基因进化树等进行了预测和分析.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术,测定了青杄不同组织中的PsbO基因的相对表达水平.结果发现:青杄PsbO基因编码346个氨基酸,预测相对分子质量为36.6 kD,理论pI值为5.29,属于可溶性蛋白.二级和三级结构预测表明其含有较多的α螺旋、β折叠和随机卷曲结构.RT-qPCR发现该基因在青杄针叶和茎中表达量最高.这些结果为青杄中PsbO基因的初步功能研究奠定了基础.     

竹材剩余物竹粉的选择性酚化产物研究

以苯酚为液化试剂,在低温和低酸催化剂浓度等温和条件下对竹粉进行选择性酚化,分离得到液化液和竹纤维素微粉。采用红外光谱、X射线衍射、SEM和热重分析了竹粉液化前后组成形貌和结构性能变化。结果表明竹粉在热化学酚化条件下发生了降解反应,并产生了具有新的取代基苯环结构等其它酚化产物;竹粉中的纤维素无定型组分和木质素组分完全被酚化,而未被酚化的残渣为具有高度结晶结构的纤维素粉;竹粉通过热化学酚化,得到了具有很好流动性的高活性酚化液,而分离得到的竹纤维粉具有比竹粉更高的疏水性和更好的热稳定性。在此基础上阐明了竹粉热化学选择性酚化的机理。     

我国的新足螨属及两新种的记述(蜱螨目:巨螯螨科)

新足螨属Neopodocinum Oudemans,1902的种类最早发现于荷兰阿姆斯特丹,其模式种为Neopodocinum jaspesi(Oudemans,1900)。Krantz(1965)对该属做过整理,至今,全世界共报道了23个种和亚种,多分布于亚洲、非洲等地。我国过去曾记录4种,即:拟埃本新足螨Neopodocinum emodioides Krantz,1965(西藏)、哈门新足螨N.vanderhammeni Krantz,1965(福建)、德宏新足螨N.dehongenseLi et Chang,1979和贾氏新足螨N.jaspesi (Oudemans,1900)(云南)。     

两种绿藻辅助饲喂对克氏原螯虾生理活性的影响

以克氏原螯虾为研究对象, 测定了在正常投喂人工颗粒饲料的基础上辅助添加小球藻、刚毛藻饲喂克氏原螯虾的生理活性。结果表明: 试验期间添加小球藻(1.0×106-1.0×107 cells·L-1)、刚毛藻(0.06-0.08 g·L-1)对克氏原螯虾的生长与存活率均无显著影响(P >0.05), 但肌肉超氧化物歧化酶(SOD)和肝胰脏酸性磷酸酶(ACP)的活性显著降低(P <0.05); 机体的血细胞密度显著增加(P <0.05), 外骨骼和肌肉中虾青素的含量极显著增加(P <0.01); 单独添加刚毛藻肌肉虾青素含量也显著提高(P <0.05), 血清、肝胰脏和肌肉碱性磷酸酶(AKP)的活性极显著提高(P <0.01), 肝胰脏酸性磷酸酶的活性极显著降低(P <0.01)。摄食小球藻和刚毛藻对于克氏原螯虾的抗逆活性和免疫能力具有促进作用, 养殖水体中适度添加小球藻和刚毛藻有助于克氏原螯虾的健康与活力。     

雄性花蜱Amblyomma cyprium Neumann在云南河口之发现

根据以往文献,花蜱属种类在我国已记载过的共有7种,即Amblyonima formosanum;A.pscudolacve;A.javanense;A.testudinarium;A.vajimai;A.helvolum和A.cyprium。其中绝大部分发现于沿海一带,而由云南采获者只有A.javanense(Nuttall氏等,1926)一种。 1960年10月夏代光同志赠与作者蜱类标本雌雄各2个。这些标本都是同年采自云南河口的水牛Bubalus bubalis(Linné)身上。由于当时手     

青杄PSAK的克隆及生物信息学分析

目的:获取青杄的PSAK全长cDNA序列,对其进行生物信息学分析,并鉴定其在青杄各组织中相对表达量。方法:以多年生青杄(Picea wilsonii)的cDNA文库为模板,通过RACE PCR的方法获取PSAK的末端序列,经过与EST序列拼接得到PSAK基因的cDNA全长序列。通过特异引物将其克隆在pEASY-T1载体上,基于其氨基酸序列,利用DNAMAN、ExPASy、SWISS-MODEL等工具对其进行生物信息学分析,进行了半定量RT-PCR与RT-qPCR实验来检测其在mRNA水平的组织表达情况。结果:青杄PSAK基因编码140个氨基酸,蛋白分子量为14.23kDa,理论等电点为10.29。蛋白的C端有较为保守的结构域,与拟南芥、烟草等物种具有较高的相似性。PwPSAK主要在青杄的针叶与茎中进行表达。结论:成功获取了PwPSAK的单克隆并进行了生物信息学分析,为青杄中PSAK后续的功能研究提供理论依据。