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| 拟南芥转录因子NF-YC的原核表达及多克隆抗体制备 | |
| 引用本文： | 卫静,李长江,刘亚静,黄桂雪,张凌云.拟南芥转录因子NF-YC的原核表达及多克隆抗体制备[J].生物技术通报,2012,0(3):57-62. |
| 作者姓名： | 卫静 李长江 刘亚静 黄桂雪 张凌云 |
| 作者单位： | 北京林业大学森林培育与保护教育部重点实验室,北京,100083 |
| 基金项目： | 国家转基因生物新品种培育科技重大专项 |
| 摘 要： | 采用PCR方法扩增NF-YC基因得到其全长cDNA序列,并将其克隆至原核表达载体pET-48b中,在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导出分子量约为45 kD的融合蛋白,SDS-PAGE和Western blotting检测鉴定表达产物。利用亲和层析技术对融合蛋白进行纯化,纯化后的目的蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体。间接ELISA检测抗体效价大于1 62 500,Western blotting结果显示,该抗体可特异性识别NF-YC蛋白。 |
| 关 键 词： | 拟南芥 转录因子 NF-YC融合蛋白 原核表达 多克隆抗体 |
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