铅污染现状及其修复机理研究进展

介绍了铅污染的现状、修复机理及存在的问题。其中重点阐述了国内在寻找铅的超累积植物的研究进展,国外研究者对铅在植物体内吸收、运输和储存机理方面的研究现状,同时对已发现的与铅污染有关的基因以及转基因技术的应用情况进行了简单介绍,并探讨了提高铅污染修复效率的一些方法。     

对SDS稳定的V8(V125T)蛋白酶突变体的高效表达及性质研究

谷氨酰内切酶能特异性切割谷氨酸、天冬氨酸残基羧基端结合的肽键。将含有V8蛋白酶突变体(V125T)基因的表达质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3),在50L发酵罐中发酵,融合蛋白为可溶性表达,可得菌湿重50g/L,相对蛋白表达量为33%。融合蛋白采用GST亲和纯化、肠激酶激活、DEAE-FF阴离子交换层析,得到纯的V8(V125T)突变体,经纯化后可获得0.998mg蛋白/g菌(湿重),比活为13.47 U/mg pro.纯化过程的酶活回收率达到了97.9%。对纯酶进行酶学性质分析,以Z-Phe-Leu-Glu-p NA作为底物测得V8(V125T)蛋白酶的Km为0.339mmol/L,Vmax为16.642μmol/min。其最适pH为8.0,在pH4.0~10.0之间较稳定;最适反应温度在45℃,12h内在4~35℃有很好的温度稳定性;25℃条件下1mmol/L的金属离子对酶具有不同程度的影响,其中Fe~(3+)的抑制作用最强;2mol/L尿素及1mmol/L EDTA对酶活性无影响,在0.1%SDS中保存12h、在0.5%SDS中4h和在1%SDS中1h,活性均能维持90%以上,在0.5%,0.1%SDS保存12h,仍能保持80%和64%的活性,与未突变的重组V8蛋白酶相比,该突变体对SDS的耐受性得到极大提高。     

神农架湿地泥炭测评及其生态保护开发

对神农架大九湖湿地泥炭资源进行了调查、采样、检测与评价。结果表明,神农架泥炭中,有机质含量>70%,腐殖酸含量>30%,胡敏酸与富里酸的含量比C(胡敏酸)/C(富里酸)>5.0,水解氨基酸含量为7%。可用于医药、保健、增效、添加等系列生物制品的开发。     

重组黄杆菌肝素酶III的纯化、表征及培养条件对酶生产的影响

肝素酶III是一种特异性地裂解乙酰肝素的酶,在大肠杆菌中表达时容易形成包涵体。为实现肝素酶III的可溶性表达,利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)与肝素酶III融合性能,通过构建相应的表达质粒pGEX-heparinaseIII,在大肠杆菌中实现了肝素酶Ⅲ的可溶性表达。粗酶通过一步亲和纯化其纯度可达95%以上。通过对LB培养基摇瓶培养Escherichia coli BL21的诱导时机、诱导剂用量、诱导时间等培养条件的优化,确定了该可溶性肝素酶III融合蛋白的最适生产条件。通过对纯酶的最适反应温度、pH、Ca2+浓度等一系列性质研究,确定了该酶的最适反应条件。     

重组黄杆菌肝素酶Ⅲ的纯化、表征及培养条件对酶生产的影响

肝素酶Ⅲ是一种特异性地裂解乙酰肝素的酶,在大肠杆菌中表达时容易形成包涵体.为实现肝素酶Ⅲ的可溶性表达,利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)与肝素酶Ⅲ融合性能,通过构建相应的表达质粒pGEX-heparinaseⅢ,在大肠杆菌中实现了肝素酶Ⅲ的可溶性表达.粗酶通过一步亲和纯化其纯度可达95%以上.通过对LB培养基摇瓶培养Escherichia coli BL21的诱导时机,诱导剂用量、诱导时间等培养条件的优化,确定了该可溶性肝素酶Ⅲ融合蛋白的最适生产条件.通过对纯酶的最适反应温度、pH、Ca~(2+)浓度等一系列性质研究,确定了该酶的最适反应条件.     

工科院校中生物化学教学模式探讨

总结了在华东理工大学进行生物化学教学模式探索,包括结合培养目标,明确课程定位;构建知识框架,优化教学内容;采用多样化的教学手段;理论联系实际,突出应用生物化学的特点。在教学实践中,结合工科院校生物化学教学中"夯实基础、面向应用"的特色,形成了"基础与前沿相结合、理论教学与实验教学并重"的教学体系,以及"基础与前沿相结合、理论与应用相结合"的教学模式。     

武汉市蔬菜重金属污染现状的调查与评价

通过对武汉市6种蔬菜的供食部位及所对应的土壤中重金属Hg(汞)、Cu(铜)、Pb(铅)、Cd(镉)、Cr(铬)、Zn(锌)、As(砷)含量及分布特征进行了检测,结果表明:Pb、Cr是武汉市蔬菜中主要的污染元素;Hg、Cd只在个别叶菜类上超标;Zn、Cu、As无超标样。在所时应的土样中,普遍存在污染的是Cd,其它6种重金属元素均未超标。     

胰岛素原C肽多聚体基因在大肠杆菌中的表达及重组C肽在水溶液中的稳定性

合成了胰岛素原C肽三聚体的基因,并在大肠杆菌中得到高效表达。表达的融合蛋白质通过设计的特异性位点的酶切得到重组的人胰岛素原C肽单体。融合蛋白质以可溶性蛋白质的形式表达,表达量约为80mg／L。Ni—NTA亲和柱可有效地从细胞裂解的上清液中分离纯化融合蛋白质,得到纯度大于70％的融合蛋白质37．5mg／L。融合蛋白质可经胰蛋白酶/羧肽酶B双酶切有效释放天然的C肽。释放的C肽经氨基酸组成分析、与标准对照的RP—HPLC分析和免疫发光法定量证实与天然人C肽完全相同。C肽经RP-HPLC纯化后可得,总的收率为1．5mg/L,纯度大于95％。考察了C肽在冻干过程中及在水溶液中的稳定性。结果表明C肽在冻干过程中稳定,在水溶液中其稳定性受pH和温度的影响。在pH3和pH7．4缓冲液中,37℃或70℃下,C肽的降解符合一级动力学。C肽冻干品直接溶解于pH9的缓冲液中,立即降解,降解产物在37℃和70℃下基本稳定。C肽冻干品直接溶解于pH3的缓冲液中,立即发生降解反应,随后可观察到随温度升高和时间延长,降解反应的进行,37℃、10h,可观察到约80．3％的C肽保持,而在70℃、10h,只有43％C肽保持。C肽在pH7．4最稳定,37℃、6h或10g／L BSA存在下,70℃、3h,未观察到降解产物。PH7．4、37℃、10h,在有和没有10g／L BSA存在的情况下,C肽的保持率分别为99％和96％,从而显示了BSA的保护作用。     

氮镉交互作用对苋菜土壤酶活性的影响

通过盆栽试验,研究了氮镉交互作用对苋菜(Amaranthus mangostanus L)土壤酶活性的影响,结果表明:氮镉交互作用有促进土壤蔗糖酶活性、脲酶活性的趋势和抑制蛋白酶活性、酸性磷酸酶活性的趋势。     

工科院校中生物化学教学模式探讨

总结了在华东理工大学进行生物化学教学模式探索,包括结合培养目标,明确课程定位;构建知识框架,优化教学内容;采用多样化的教学手段;理论联系实际,突出应用生物化学的特点。在教学实践中,结合工科院校生物化学教学中“夯实基础、面向应用”的特色,形成了“基础与前沿相结合、理论教学与实验教学并重”的教学体系,以及“基础与前沿相结合、理论与应用相结合”的教学模式。