嗜热脂肪芽孢杆菌β—半乳糖苷酶的性质

利用硫酸铵分级沉淀、离子交换层析(DEAE-22)、SephadexG-75凝胶过滤从嗜热脂肪芽孢杆菌胞内提纯得B半乳糖甘酶。研究表明,该酶最适表观反应曙度和最适PH分别为60OCT6.4D50OC该酶具有良好的热稳定性.碱金属和碱土金属盐对酶有激活作用,重金属Zn     

啤酒废酵母的综合利用

概述了啤酒酵母的结构和组成,主要论述了啤酒废酵母在饲料工业、食品工业和医药工业中的广泛用途,并介绍了世界各国啤酒废酵母的研究和利用现状.     

Mn-SOD与抗癌胚抗原单链抗体基因的融合及高效表达

将Ｍｎ－ＳＯＤ与抗癌胚抗原（ＣＥＡ）单链抗体基因（Ｓｃ－Ｆｖ ｇｅｎｅ）融合,重组到含Ｔ７启动子的表达载体ｐＥＴ－２２ｂ（＋）中,构建表达质粒ｐＥＴＭｎ－ＳＯＤ－ＳｃＦｖ,并转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）,进行高效表达,表达物占菌体可溶性总蛋白的２４％。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和蛋白质和迹图谱显示表达物分子量为４５ｋＤ与融合基因编码蛋白质的理论值相符。该蛋白质在大肠杆菌中为泌型表达有利于纯化。ＲＩＡ测定表     

分子伴侣TCP1的结构预测及分析

利用必良的Ｃｏｕ ａｎｄ Ｆａｓｍａｎ方法和Ｐｒｏｓｉｓ软件包中的Ｒｏｂｓｏｎ方法,对四个Ｔ－复合物多肽１（ＴＣＰ１）及五个同源蛋白南进行结构预测。预测结果显示,ＴＣＰ１中可能存在两个结构域及结构域中间的一个“铰链区”。推测这两个结构域可能是α／β筒状结构,一段公认的ＡＴＰ结合区、中心为８７－９１位的ＧＤＧＴＴ,在二级结构预测中显示无规卷曲。     

用固定化方法研究超氧化物歧化酶的活性与结构的关系

 采用吸附、包埋、共价交联等方法固定化超氧化物歧化酶(SOD)所得固定化酶活力回收都不高,表明酶的催化反应速率受超氧阴离子自由基(O_2~-)扩散速率的控制。用海藻酸钠包埋SOD,固定化酶不表现活力,破固定化后所得的糊状物却有很高的活力。用戊二醛交联所得的固定化酶活力回收率也很低,表明ε-NH_3~+的正电荷是酶活力所必需。     

混合溶剂系统对脂肪酶酯化活性和选择性的影响

目前非水介质中的酶促反应主要局限于单一有机溶剂系统。为使非水相酶反应顺利进行,所用反应介质一般必须满足２个条件：（１）具有较高的疏水性（ＬｏｇＰ值）［１］;（２）易于溶解底物。然而对于一些２芳基丙酸（如酮基布洛芬,以下简称酮洛芬）的酶促酯化反应［２...     

重组羧肽酶原B的复性方法研究

构建的羧肽酶原B表达质粒在大肠杆菌中获得高表达。但目的蛋白是以包涵体的形式存在。为了获得活性羧肽酶B,必须对其包涵体进行变复性。首先利用稀释复性确定了羧肽酶原B复性的最佳缓冲液;在凝胶过滤复性中,研究了柱长和洗脱流速对羧肽酶原B复性效率的影响;另外对比了稀释复性、透析复性、凝胶层析复性和Ni2 亲合层析法等四种方法对羧肽酶原B的复性效果。结果发现,这4种方法的复性效果有以下顺序:凝胶过滤复性>稀释复性>Ni2 亲合层析>透析复性。     

超氧化物歧化酶活性中心中铜离子的氧化还原研究

用电子顺磁共振EPR技术研究铜锌超氧化物歧化酶(Cu·Zn-SOD)与底物(O_2~(·-)反应达到平衡态时铜离子的EPR波谱表明,在平衡态时的铜离子处于还原态。用还原剂H_2O_2、NaBH_4处理Cu·Zn-SOD后,酶活力变化不同,电泳行为也不同。用NaBH_4处理SOD其活性及电泳行为接近天然酶,但经H_2O_2还原后的酶活性损失严重,电泳后出现多条色带。