3，4苯并芘对内皮祖细胞生物学功能的影响

目的研究3,4苯并芘（BaP）对人脐血来源的内皮祖细胞（EPC）生物学功能的影响。方法密度梯度离心法分离获取人脐血单个核细胞,采用贴壁培养法培养MNC中的EPC,通过Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil-ac-LDL）摄取实验和FITC标记的植物凝集素（FITC-UEA-I lectin）结合实验鉴定细胞。消化收集第3代细胞,分别采用细胞计数试剂盒（CCK-8）、黏附能力测定实验、Transwell小室法及Matrigel体外成血管试验观察BaP对EPC增殖能力、粘附能力、迁移能力及成血管能力的影响,并检测各组细胞培养上清液SOD含量。采用单因素方差分析及LSD-t检验进行统计学分析。结果采用贴壁培养法能成功培养出EPC;与正常对照组相比,BaP呈浓度依赖性降低EPC的增殖能力{正常对照组OD（1.02±0.04）显著高于BaP各组[BaP①组OD（0.66±0.04）,BaP②组OD（0.55±0.04）,BaP③组OD（0.35±0.05）,均P〈0.01],BaP染毒组间增殖能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.01）};与正常对照组比较,BaP呈浓度依赖性降低EPC的黏附能力{正常对照组[（117.50±17.16）个/200倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组（80.00±14.46）个/200倍镜,BaP②组（66.00±9.06）个/200倍镜,BaP③组（49.80±10.72）个/200倍镜,均P〈0.01],BaP染毒组间黏附能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.05）};与正常对照组相比,EPC的迁移能力亦呈BaP浓度依赖性降低{正常对照组[（46.10±4.51）个/400倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组（35.50±4.95）个/400倍镜,BaP②组（26.80±4.08）个/400倍镜,BaP③组（19.50±2.84）个/400倍镜,均P〈0.01],BaP染毒组间迁移能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.01）};与正常对照组比较,EPC的成血管能力亦呈BaP浓度依赖性降低{正常对照组[（33.20±3.70）个/100倍镜]显著高于BaP各组[BaP①组（22.00±3.39）个/100倍镜,BaP②组（16.20±2.59）个/100倍镜,BaP③组（10.80±2.39）个/100倍镜,均P〈0.01],BaP染毒组间成血管能力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.05）}。同时细胞培养上清液中SOD的活力也呈BaP浓度依赖性地降低{正常对照组[（22.6±2.19）U/ml]高于BaP各组[BaP①组（15.94±1.68）U/ml,BaP②组（12.5±1.58）U/ml,BaP③组（6.9±1.55）U/ml,均P〈0.01],BaP染毒组间SOD活力差异亦有统计学意义（两两比较,均P〈0.01）}。结论 BaP体外诱导显著影响EPC的多种生物学功能,其机制可能与氧化损伤有关。     

急性重症胰腺炎早期手术时机及术式探讨

目的：探讨急性重症胰腺炎手术治疗的时机和手术。方法：对24例急性重症胰腺炎（SAP）患者采用手术治疗的时机和术式及疗效进行回顾性分析。结果：24例SAP于入院后一周内行手术治疗,手术时清除坏死组织并充分低位引流;早期手术治愈率71%(17/24),疗效满意。结论：SAP经保守治疗无效后,可在一周内手术,手术方式以充分低位引流为目的。     

大洲岛珊瑚礁海域水质状况分析与评价

通过2013 年3 月、6 月、9 月、12 月对大洲岛近岸海域的水温、盐度、透明度、pH、溶解氧(DO)、化学需氧量(COD)、DIP、无机氮(DIN)进行了测定, 应用单因子污染指数, 富营养化指数, 有机污染指数和单因素方差分析进行了该海域分析和评价。结果表明, 大洲岛海域前港、湾内、后港均有利于珊瑚的生长、繁殖。风向季节性转移引起的人为活动规律的变化和研究区珊瑚覆盖率的高低对大洲岛各研究区水质相互之间均不存在显著差异性影响, 春季为大洲岛珊瑚礁海域污染最为严重的季节, 夏季次之, 秋冬两季水质较好, DIN 为主要污染物,过多的DIN 不应被视为可以导致海水的富营养化条件。珊瑚月平均增长覆盖率与COD、DIP、DIN 存在显著负相关性, 适宜珊瑚生长和繁殖的水质应为国家二类水质以上。     

N- 乙酰转移酶NAT10 在软组织肿瘤中的表达及意义

目的：观察N-乙酰转移酶NAT10蛋白在软组织肉瘤中的表达及与类型、分级的关系。方法：通过原核表达NAT10蛋白免疫制备特异性多克隆抗体,并经免疫印迹鉴定;以组织芯片一免疫组化检测166例软组织肉瘤和28例良性肿瘤及瘤样病变中NAT10蛋白的表达。结果：制备多克隆抗体经Western印迹鉴定与NAT10具有特异结合性。免疫组化显示166例软组织肉瘤中NAT10蛋白阳性95例,阳性率为57％（95／166）,28例良性肿瘤及瘤样病变中4例阳性14％（4／28）。两者间有显著性差异（P〈0．05）。NAT10表达的主要分布为：滑膜肉瘤76％（13／17）、恶性纤维组织细胞瘤75％（15／20）、原始神经外胚叶瘤（PNET）70％（16／23）、横纹肌肉瘤70％（7／10）、恶性外周神经鞘膜瘤50％（11,／22）、隆突性皮肤纤维肉瘤50％（7／14）、平滑肌肉瘤43％（6／14）、脂肪肉瘤42％（8／19）、黏液性纤维肉瘤38％（6／16）。统计比较显示：滑膜肉瘤与黏液性纤维肉瘤和脂肪肉瘤,以及恶性纤维组织细胞瘤与黏液性纤维肉瘤之间NAT10表达具有显著性差异（P〈0．05）;而其它各组间无明显差异（P〉0．05）。同时,NAT10蛋白强阳性表达（≥＋＋）多存在于滑膜肉瘤（53％,9／17）、横纹肌肉瘤（40％,4／10）及恶性纤维组织细胞瘤（40％,8／20）。在FNCLGC分级中,19例I级肉瘤中NAT10阳性表达率为42％（8／19）,44例Ⅱ级肉瘤为43％（19／44）,70例Ⅲ级肉瘤为73％（51／70）。Ⅲ级NAT10阳性率显著高于Ⅱ级组和Ⅰ级组（均为P〈0．05）。结论：研究表明N-乙酰转移酶NAT10表达于多种人软组织肉瘤,尤其在高度恶性肉瘤,因此有可能为软组织肉瘤的分级及预后因子。     

纯化自体外周血CD34^＋细胞移植治疗肢体重度缺血的中期疗效

目的探讨纯化CD34^＋细胞移植治疗肢体重度缺血的中期疗效。方法自2009年5月至2011年12月录入30例肢体重度缺血患者,男性29例,女性1例,平均年龄43 ± 12岁（23 - 75岁）,均不具备外科血管重建条件,共治疗31条下肢和4条上肢。G-CSF（5-10μg/kg）动员,第5天采集外周血单个核细胞,分选获得纯化CD34^＋细胞,肢体肌肉局部注射。根据移植细胞数分为3组：低剂量组（105/kg）、中剂量组（5 × 105/kg）和高剂量组（106/kg）。结果随访16 - 48个月,1个月和2个月时Wong-Baker FACES疼痛评分由术前7 ± 2降到3 ± 3（P〈 0.001）和1 ± 2（P〈 0.001）。术后3个月和6个月：最长无痛步行时间由术前的（5 ± 3）min分别延长至（12 ± 6）min（P〈 0.001）和（19 ± 5）min（P〈 0.001）;踝肱指数由术前的0.44 ± 0.20提高至0.62 ± 0.18（P= 0.04）和0.66 ± 0.14（P〈 0.001）;经皮氧分压由术前（26 ± 11）mmHg分别上升至（42 ± 11）mmHg（P 〈 0.001）和（56 ± 12）mmHg（P〈 0.001）。16例溃疡患者愈合11例。Kaplan Meier生存分析法计算16个月保肢率为84﹪（95﹪可信区间为0.63 - 0.94）。3个不同剂量组之间的比较,治疗效果差异无统计学意义,除了1个月时WFPRSC检测结果显示：高剂量组明显优于低、中剂量组。结论纯化自体外周血CD34^＋细胞移植治疗肢体重度缺血性疾病安全、可行,能够较为持久地缓解缺血,挽救肢体,改善患者生活质量。     

RNA干扰技术及其应用前景

细胞固有的对抗外源基因及其侵害的一种自我保护现象称RNA干扰,即在mRNA水平双链RNA分子关闭相关序列及基因表达使其沉默的过程。具有高效性、特异性等特点。本文综述了RNA干扰技术及其作用机制,包括它的作用特点,并在此基础上展望了它在基因组学研究和医学领域上的重大价值。     

大气CO2浓度缓增对稻田硝酸盐型甲烷厌氧氧化过程的影响

硝酸盐型甲烷厌氧氧化(AOM)是控制稻田甲烷排放的一种新途径,大气CO₂浓度升高会对稻田甲烷排放产生重要影响,但有关其对硝酸盐型AOM过程的影响知之甚少。本研究依托开顶式气室组成的CO₂浓度自动调控平台,采用¹³CH₄稳定性同位素示踪技术,从甲烷氧化活性、相关功能微生物Candidatus Methanoperedens nitroreducens (M. nitroreducens)-like古菌丰度与群落组成等方面,系统研究了稻田土壤中硝酸盐型AOM过程对大气CO₂浓度缓增的响应。试验设置背景CO₂浓度和CO₂浓度缓增处理(背景CO₂浓度基础上每年增加40 μL·L^-1,直至增幅达160 μL·L^-1)。结果表明: 稻田土壤硝酸盐型AOM速率为0.7～11.3 nmol CO₂·g^-1·d^-1;定量PCR结果显示,M. nitroreducens-like古菌mcrA基因丰度为2.2×10⁶～8.5×10⁶ copies·g^-1。与对照相比,CO₂浓度缓增处理使土壤中硝酸盐型AOM速率和M. nitroreducens-like古菌mcrA基因丰度均有一定幅度提高,特别是在5～10 cm深度下两者均显著提高。CO₂浓度缓增处理未显著改变M. nitroreducens-like古菌群落结构,但使其多样性显著降低。相关性分析表明,土壤有机碳含量可能是影响硝酸盐型AOM过程的重要因子。综上,大气CO₂浓度缓增在一定程度上促进了硝酸盐型AOM反应,暗示在未来气候变化背景下其在控制稻田甲烷排放中具有积极作用。     

苦参素联合富硒酵母干预大鼠肝癌变进程中TERT表达的变化

目的：探讨大鼠肝脏端粒酶逆转录酶（TERT）在肝癌演进及药物干预中表达的变化。方法：在建立大鼠肝癌变模型的基础上,用苦参素联合富硒酵母（OMT＋Se）对其进行干预。分别在诱癌2．4、6、8、10、12、14、16和18周处死大鼠。病理分级后用免疫组化和Westernblot法,分别显示大鼠肝端粒酶逆转录酶（TERT）表达的变化。结果：诱癌组’IERT表达在诱癌各时期均显著高于对照组（P〈0．05,P〈O．01）。干预组TERT在腺瘤样增生期（AH）和非典型性腺瘤样增生期（AAH）的表达均显著低于诱癌组（P〈0．05）。结论：OMT＋Se的联合干预抑制了癌变进程中TERT的表达,可在一定程度上延缓和推迟肝癌的发生发展。     

AFP、血流变、超敏C反应蛋白检测在早期肝癌诊断价值分析

目的:探讨甲胎蛋白(alphafetoprotein,AFP)、血流变、超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)等指标检测对早期肝癌患者的诊断价值。方法:将我院自2016年5月至2019年5月间收治的经手术和病理学检查确诊肝癌患者115例作为A组,109例其他肝脏良性病变患者作为B组,同期体检健康者98例作为对照组C组,观察三组对象的AFP、血流变和超敏C反应蛋白等各项指标的水平。结果:A组患者的AFP水平和hs-CRP水平均明显高于B组肝脏良性病变组和C组健康对照组,B组患者AFP高于C组,组间差异具有统计学意义(P<0.05),B组和C组患者hs-CRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05);A组患者全血高、中、低切粘度、全血粘度、红细胞压积、血细胞比容、血沉方程K值、纤维蛋白原、红细胞聚集指数和红细胞刚性指数等指标水平均明显高于B组和C组对象,B组患者血沉和血沉方程K值明显高于C组,组间差异具有统计学意义(P<0.05);A组肝癌患者TNM分期较高的患者血沉方程K值、血细胞比容、血浆粘度和全血低切粘度均明显高于TNM低分期的患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:患者的AFP、hs-CRP联合血流变血指标的异常改变可作为鉴别肝脏良性疾病和恶性肿瘤的依据,同时能提高诊断的准确性,可在临床范围内推广使用。     

岱衢洋渔业动物多样性分析

根据2007年4—11月对岱衢洋进行的4个航次的底拖网、定置刺网与蟹笼调查数据,分析了该海域渔业动物物种的多样性及其资源动态。结果表明:(1)3种作业方式共发现渔业动物98种,其中,鱼类57种、虾蟹类32种、头足类3种、其他类6种,隶属于4门7纲20目53科。(2)底拖网调查共发现渔业动物68种,分别为鱼类38种、虾蟹类23种、头足类2种、其他类5种,隶属于4门7纲18目42科;4月份的物种丰富度指数(D)与8月份、11月份之间存在显著差异(P<0.05);总生物量与总尾数密度的最大值都出现在8月份,且与5月份、11月份均存在显著性差异(P<0.05);龙头鱼在4个调查月份中均为优势种,其中8月份的平均体重与其他3个月份之间差异显著(P<0.05)。根据底拖网调查结果,岱衢洋渔业动物群落以暖温性鱼类与广温广盐性甲壳类(虾蟹类与其他类中的口虾蛄)为主,种类数较少,多样性(H′)较低(P<0.01)。