N- 乙酰转移酶NAT10 在软组织肿瘤中的表达及意义

目的：观察N-乙酰转移酶NAT10蛋白在软组织肉瘤中的表达及与类型、分级的关系。方法：通过原核表达NAT10蛋白免疫制备特异性多克隆抗体,并经免疫印迹鉴定;以组织芯片一免疫组化检测166例软组织肉瘤和28例良性肿瘤及瘤样病变中NAT10蛋白的表达。结果：制备多克隆抗体经Western印迹鉴定与NAT10具有特异结合性。免疫组化显示166例软组织肉瘤中NAT10蛋白阳性95例,阳性率为57％（95／166）,28例良性肿瘤及瘤样病变中4例阳性14％（4／28）。两者间有显著性差异（P〈0．05）。NAT10表达的主要分布为：滑膜肉瘤76％（13／17）、恶性纤维组织细胞瘤75％（15／20）、原始神经外胚叶瘤（PNET）70％（16／23）、横纹肌肉瘤70％（7／10）、恶性外周神经鞘膜瘤50％（11,／22）、隆突性皮肤纤维肉瘤50％（7／14）、平滑肌肉瘤43％（6／14）、脂肪肉瘤42％（8／19）、黏液性纤维肉瘤38％（6／16）。统计比较显示：滑膜肉瘤与黏液性纤维肉瘤和脂肪肉瘤,以及恶性纤维组织细胞瘤与黏液性纤维肉瘤之间NAT10表达具有显著性差异（P〈0．05）;而其它各组间无明显差异（P〉0．05）。同时,NAT10蛋白强阳性表达（≥＋＋）多存在于滑膜肉瘤（53％,9／17）、横纹肌肉瘤（40％,4／10）及恶性纤维组织细胞瘤（40％,8／20）。在FNCLGC分级中,19例I级肉瘤中NAT10阳性表达率为42％（8／19）,44例Ⅱ级肉瘤为43％（19／44）,70例Ⅲ级肉瘤为73％（51／70）。Ⅲ级NAT10阳性率显著高于Ⅱ级组和Ⅰ级组（均为P〈0．05）。结论：研究表明N-乙酰转移酶NAT10表达于多种人软组织肉瘤,尤其在高度恶性肉瘤,因此有可能为软组织肉瘤的分级及预后因子。     

毛白杨两个Phi类GST基因的克隆及生化特性

谷胱甘肽转移酶(glutathione S-transferase,GST)在植物的抗逆反应、细胞信号转导和抗病等方面发挥着重要作用.从毛白杨(Populus tomentosa)中克隆到2个Phi类GS7因(PtoGSTF1和PtoGSTF2),它们分别编码215和218个氨基酸残基的蛋白质.DNA序列分析显示这2个基因均含有2个内含子.组织表达模式分析表明,这2个基因在毛白杨的根、茎、叶、韧皮部和顶芽组织中均表达,是组成型表达基因.在大肠杆菌中表达这2个基因并纯化重组蛋白.酶活性分析显示PtoGSTF1和PtoGSTF2蛋白对底物CDNB、NBD-CI、NBC和Cum-OOH都具有酶学活性,但活性差异较大.动力学分析显示,PtoGSTF2对NBD-CI的亲和力是PtoGSTF1的2.5倍,但PtoGSTF1的催化效率是PtoGSTF2的56.8倍.热力学稳定性分析显示,PtoGSTF1比PtoGSTF2具有更高的热力学稳定性.因此,酶学性质的差异预示着这2个Phi类GS7基因可能存在功能上的分化.