绿色荧光蛋白基因作为报告基因在水稻基因转化中的应用研究

本研究中 ,构建了含有编码绿色荧光蛋白的改进型基因质粒pJPM5。用基因枪法分别把pJPM5和另一带有绿色荧光蛋白基因的质粒pSBG70 0转入水稻TNG6 7愈伤组织。用South ern杂交法证实了转基因的存在 ,而且表明多数转基因植株含有 1到 8个拷贝的转基因。取 2个月的转基因植株上的叶片用于分析绿色荧光蛋白基因表达。用SLM - 80 0 0荧光分析仪定量测定绿色荧光蛋白。多数转基因植株具有很高的绿色荧光蛋白信号。虽然水稻植株有少量自发荧光 ,但是绿色荧光蛋白基因表达出的绿色荧光蛋白信号比植株的自发荧光强得多 ,其测定不会受自发荧光的太大影响。在荧光显微镜下观察到了绿色荧光蛋白基因的表达。借助观察分析绿色荧光蛋白基因的瞬时表达 ,本研究还发现基因枪法转化中 ,如果两枪的气压为90 0psi& 135 0psi,比两枪的气压都为 90 0psi或者 135 0psi更好 ,因其能使质粒进入更多的细胞。研究结果表明 ,绿色荧光蛋白基因可以作为水稻 (甚至小麦、玉米 )转基因研究中的报告基因。研究还显示 ,MAR序列能明显增强绿色荧光蛋白基因的表达能力 (这一结果在另文讨论 ) .     

用PDS—1000／He型基因枪将外源基因质粒pZFX2导入小麦细胞的研究

小麦是世界上分布广、种植面积大的粮食作物,选育高产、优质、抗病等优良性状的小麦新品种具有重要的意义。近年来,随着植物遗传转化技术的不断完善,小麦的遗传转化也取得较大突破,先后采用基因枪法、花粉介导法、ＰＥＧ法和激光穿刺法等,将ＮＰＴⅡ、Ｂａｒ、ＧＵＳ...     

Δ12-脂肪酸去饱和酶基因(fad2)突变对油菜叶片表面结构和透性的影响

首次报告了利用简单的叶片氧化实验可区别油菜正常株系及具有高油酸(低亚油酸)性状的fad2基因(Δ12-fatty acid desaturase gene)突变体。突变体叶片内的有色或具还原性的物质能被次氯酸钠及硝酸银溶液在5-10min漂白或氧化,正常株系及突变体的fad2基因功能补偿转化体的叶片被漂白的时间需要24-48h。通过扫描电镜观察揭示了突变体与正常株系之间叶片表面蜡颗粒沉积均匀性上的差异。实验结果表明：fad2基因的突变改变了叶片表面蜡的沉积结构并增大了叶片表层的溶液渗透性,其原因可能与木质(cutan)的合成受抑制相关。     

台湾金线莲的组织培养与快速繁殖

1植物名称台湾金线莲(Anoectochilus formosanus Hayata). 2材料类别幼嫩的茎段. 3培养条件以MS为基本培养基.(1)芽诱导培养基:MS 6-BA 3 mg·L-1(单位下同) NAA 0.2 CH(水解酪蛋白)300;(2)增殖培养基:MS 6-BA4 NAA 0.1 CH 300;(3)生根培养基:1/4MS NAA 0.5 CH 300.培养基中均加入3%的蔗糖、6.5 g·L-1琼脂,pH 5.2～5.6.光照时间12 h·d-1,光照度1 500 lx,培养温度(22±1)℃.