构建基于CRISPR/Cas9技术敲除ALOX5的质粒

旨在利用CRISPR/Cas9技术构建敲除花生四烯5-脂氧合酶基因(Arachidonate 5-lipoxygenase gene,ALOX5)的重组质粒。设计合成3对靶向敲除ALOX5第六外显子的sgRNA,将其分别插入到CRISPR/Cas9质粒骨架pX458载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α后挑取克隆,通过测序评估重组质粒是否构建成功。将构建好的重组质粒转染293T细胞,在荧光显微镜下观察转染效果,挑取转染成功的细胞,用试剂盒提取转染细胞基因组DNA,PCR扩增含敲除位点的DNA片段,用测序技术获得核苷酸序列,用DNAStar软件分析转染细胞中ALOX5基因敲除情况。测序结果表明2对双链sgRNA寡核苷酸已插入质粒,且序列正确,靶向ALOX5基因的重组质粒pX458-sgRNAs-ALOX5构建成功。其在293T细胞中的转染效率约为50%,用一代测序法未检测到sgRNAs的切割效果。初步表明利用CRISPR/Cas9技术成功构建靶向ALOX5基因的重组质粒pX458-sgRNAs-ALOX5。     

CXCL8在肿瘤耐药中的作用

肿瘤耐药是影响疾病进程和患者预后的主要因素。CXC趋化因子配体8(CXC chemokine ligand8,CXCL8)又称为白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8),是具有趋化作用的细胞因子,是肿瘤微环境的重要成员。CXCL8在多种肿瘤患者的循环和组织中表达升高,与药物疗效和预后有相关性。CXCL8主要通过招募细胞浸润、诱导肿瘤细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)获得干性特征,还能通过促进血管生成等多途径降低药物的应答效力。本文概述了CXCL8在肿瘤耐药形成中的作用,为建立疗效监测指标、制订联合治疗方案提供重要的理论基础和实验依据。     

老鼠胃肠内水份的调节及其对进食和消化的影响

老鼠食量是受到饮水影响的。有水,它就可多吃些粮食。无水,它就吃少些。不论是否饮过水,老鼠胃中水分的含量总是近于49％。这种情况说明老鼠胃内存在着调节水分的机制。因为当老鼠吃食时,若无饮水的供应,它所吃到的分量只是限于它自身所能调节到的程度为止:它所能调节的程度就是它能从其身体组织中提出水分的供应,使胃中水分与粮食达到经常的比例(译者注:49%)。这水分是从皮肤脂肪或其他组织方面供应的。这种情况如何反射到控制吃食的机制尚不知悉。在肠内水分是     

3种不同香型玫瑰精油特性的研究

依照ISO9842和保加利亚玫瑰精油标准(БДС653),对来自陕西渭南玫瑰产区栽培的3种不同类型玫瑰精油进行了分析研究。渭玫1号精油来自保加利亚的大马士革玫瑰品科“kazanlik”,渭玫2号、3号分别是来自摩洛哥的百叶玫瑰和中国苦水玫瑰。就得油率而言,1996～2000年连续5年的平均得油率以渭玫l号最高达0．42‰,不低于在保加利亚栽培的得油率。3种精油在外观、色泽上无差异,而香气差别明显。三者分别为纯甜型、清甜型和浓甜型。GC-MS对3种精油分析表明,前二种均分析出115种成分,渭玫3号精油仅得到105种组分,三者主成分类型一致。主成分香茅醇均符合ISO9842和БДС653标准。中国传统玫瑰油渭玫3号蜡质含量相对极低,仅为渭玫1号的8％。     

基于机器学习技术的非染色细胞凋亡检测分类新方法

细胞凋亡检测和分类在生物医学研究中具有重要意义。该研究目的是在我们多年研究的基础上建立了一种基于偏振衍射成像流式细胞检测系统和机器学习技术的凋亡检测新方法,具有更高的时间效率和更好的应用前景。化学诱导K562和HL60细胞凋亡。通过荧光激活细胞分选仪结合荧光双染技术将细胞分为三个亚群:健康细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡/坏死细胞。应用偏振衍射成像流式细胞检测技术采集每个亚群细胞的衍射图像。基于局部二值模式算法提取图像纹理特征生成训练和测试数据集,研究了不同的分类算法,建立凋亡分类模型。对模型性能和时间效率做出对比分析,筛选出具有更高时间效率的模型。新方法可实现90%的分类准确度,并在时间效率上具有优势。该研究成功开发了一种快速的无染色细胞凋亡检测新方法,使检测后的细胞可直接用于后续实验。     

荒漠草原人工柠条林对冠下草本植物群落的保育作用

以宁夏盐池县荒漠草原人工柠条（Caragana intermedia）林为研究对象,分别选取柠条林冠下东侧（SE）,冠下西侧（SW）及带间（Gap）为研究样地,从群落水平探讨柠条对冠下草本植物群落结构、物种多样性及功能群分布的影响。结果表明：（1）在3种微生境中均鉴定出12种植物,SW以蒙古冰草为优势种,SE以蒙古冰草和中亚白草为优势种,Gap则以蒙古冰草和牛枝子为优势种。（2）与Gap相比,SW和SE植物群落的平均高度分别增加了41.06%和81.75%,地上生物量分别增加了40.88%和38.73%。SW和SE中,禾本科植物地上生物量分别占地上总生物量的67.10%和58.40%,显著高于Gap （P<0.05）。（3）柠条冠层效应使得草本植物的物种丰富度指数增加,但Shannon-Winner指数、Simpson指数和Pielou指数显著差异（P>0.05）,变化范围分别为1.620-1.756、0.701-0.730和0.775-0.878。（4）冗余分析表明：土壤温度、空气相对湿度及土壤有机碳是影响草本植物物种多样性及生物量的主要因子,解释量分别为42.70%,11.70%和8.80%。研究表明,柠条对冠下草本植物群落尤其是禾本科植物具有一定的保育作用,该效应的产生主要是由于柠条冠下微气候及土壤环境因子的改善为草本植物的生长发育提供了有利条件。柠条对草本植物的保育作用对荒漠草原生态环境的保护与恢复具有重要意义。     

不同施肥处理对‘赤霞珠’葡萄根际土壤养分和真菌群落的影响

【背景】宁夏贺兰山东麓葡萄产区忽视有机肥的施用,果树枝条焚烧污染环境,造成土壤养分缺失,土壤质量下降。【目的】为解决长期施用化肥对土壤造成的一系列问题,通过大田试验研究施肥及喷施不同浓度菌剂对土壤理化性质、真菌群落组成及多样性的影响,为酿酒葡萄可持续健康发展提供科学依据。【方法】以‘赤霞珠’葡萄根际土壤为试验对象,采用Illumina MiSeq高通量测序技术,测定并分析根际土壤理化性质、真菌群落组成和多样性在7个处理[常规施肥(CK)、蚯蚓粪+腐熟枝条+100倍菌剂(T1)、蚯蚓粪+腐熟枝条+200倍菌剂(T2)、蚯蚓粪+腐熟枝条+300倍菌剂(T3)、蚯蚓粪+未腐熟枝条+100倍菌剂(A1)、蚯蚓粪+未腐熟枝条+200倍菌剂(A2)和蚯蚓粪+未腐熟枝条+300倍菌剂(A3)]的变化。【结果】相较于CK,葡萄根际土壤理化性质差异明显,施肥处理增加了土壤有机质含量,土壤pH含量无明显变化,改良了土壤结构,活化了土壤有效养分。相较于CK,各处理真菌分类操作单元(operational taxonomic unit, OTU)数均降低,A2处理根际土壤丰富度及多样性均显著增加。真菌群落组成...     

叶绿素结合蛋白CP24介导光照响应基因StRSM 1调控叶绿素积累

单MYB转录因子成员RSM(RADIALIS-like SANT/MYB)突变,倒置黑暗诱导的叶绿素减少,原因有待确定;为了揭示RSM如何调控叶绿素积累,本研究运用基因工程途径,获得了普通烟草和马铃薯体内抑制和过量表达StRSM 1阳性转化株系,测定了阳性转化株系的叶绿素积累等生理表型;结果显示,普通烟草和马铃薯体内抑制RSM 1表达,显著增加了叶绿素积累,叶色随之加深;RSM 1过量表达,显著减少叶绿素积累,叶色变浅。叶绿素代谢相关基因表达测定结果显示,StRSM 1过量表达增加了黑暗下叶绿素结合蛋白CP24基因的表达,改变了其表达模式。以上结果表明,转录因子StRSM 1响应光照反向调控叶绿素积累,叶绿素结合蛋白CP24参与了StRSM 1对叶绿素积累的调控。结果有助于进一步明确RSM 1如何响应光照和深刻理解RSM 1参与的光照响应。     

秦渭玫瑰精油研究

采用ISO9842和GB11538-89对在陕西渭南栽培的大马士革玫瑰“卡赞勒克”精油(工业化蒸馏法提取产品)进行了分析,结果表明,精油产品各项指标均符合ISO 9842和保加利亚БДС653标准要求。证明引种国际香型(纯甜型)玫瑰品种在陕西渭南栽培是成功的,所用精油提取工艺是合理的。     

商州产大马士革玫瑰精油研究

采用ISO9842:2003玫瑰油标准,对陕西商州引种的保加利亚主栽玫瑰品种“Kazanluk”(RosadamascenaMiller)精油进行分析。结果表明,该玫瑰精油香气具有天然玫瑰花香,香气细腻、柔和、飘逸。油为液体,淡黄色,相对密度(20/20℃)0.8599,折光指数(20℃)1.4592,旋光度(20℃)-4.3°,冻点20.6℃,酯值11.9,这些物理指标达到了标准要求。大量主香成分相对含量:乙醇0.5%,香茅醇45.5%,橙花醇4.5%,香叶醇7.6%,苯乙醇2.9%,十七烷烃1.13%,十九烷烃15.5%,二十一烷烃5.0%。这些成分含量与原产地保加利亚玫瑰油成分范围有一定差异,但与摩洛哥同类玫瑰油标准相符,可以作为商品油在国际市场销售。