诱导小鼠红白血病细胞分化过程中钙调素水平变化

本文主要以病毒感染的小鼠红白血病细胞为模型,使用显微分光光度术,利用荧光染料ＦＩＴＣ以及ＰＩ,同时测量了在５ｍｍｏｌ／Ｌ ＨＭＢＡ诱导ＭＥＬＣ分化过程中不同周期时相单细胞内钙调素水平及ＤＮＡ含量,结果表明,在ＭＥＬＣ分化过程中细胞内钙调素水平在各周期时相均下降,这可能与ＭＥＬＣ分化和细胞增殖受到抑制。Ｇ１期延延长有关。     

三尖用酯碱诱导HL—60细胞程序性死亡过程中的细胞南和细胞核出…

本文利用视频显微影像反差增强技术对三尖杉酯碱诱导的单个ＨＬ－６０活细胞程序死 全过程进行了观察,结果表明每个Ａｐｏ细胞在染色南凝集前都要发生细胞核的出泡,而每一个核出泡又都是由相应的质出泡所诱导的,但并不是每个质出泡都能诱导核出泡,质出泡的次数远远高于核出泡,指示核、质出泡可能染色质凝集有关,并且核、质出泡是程序死亡细胞形成Ａｐｏ小体所必需的。进一步研究则说明核、质出泡与微丝解聚和重组有关。     

活细胞的分子探针——绿色荧光蛋白

来自水母的绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）,在不加外源物质的情况下,紫外光激发后,能在原核和玩具核活细胞中发绿色荧光,荧光性质稳定,突变蛋白发光效率提高,激发和发射光谱明显改变。ＧＦＰ是一种十分有用的活细胞分子探针,在基因表达调控,转基因动物研究,蛋白在细胞中功能定位,迁移变化,病原菌侵入活细胞的分子过程等诸多方面均有广泛的用途。     

人体肝癌细胞(BEL-7402系)体外生长行为的显微缩时电影观察

恶性肿瘤有丝分裂行为之异常,早在本世纪初就已被注意到(Lambert,1913;Boveri,1914)。自那时以来,许多肿瘤病理学及生物学工作者曾围绕着这一课题开展了大量的工作,并已在临床手术标本以及动物的原发灶与移植性肿瘤的种种材料中观察到异常有丝分裂的各类图形。然而,这些资料大多来自固定、染色的标本,而对其演变过程的动态分析则付缺如。直至五十年代前后起,随着细胞培养术的进展并借助显微缩时电影术,才陆续见有一些     

三种蛋白磷酸酶抑制剂对A23187诱导的HL—60细胞程…

钙离子载体Ａ２３１８７可以引起细胞内Ｃａ＾２＋浓度升高,并可诱导某些细胞程序死亡。本文发现１μｇ／ｍｌ Ａ２３１８７作用于ＨＬ－６０细胞４小时即可诱导程序死 ,以无毒性浓度的蛋白磷酸酶２Ｂ（ＰＰ２Ｂ）的抑制剂环孢菌素Ａ预处理可以抑制Ａ２３１８７诱导的ＨＬ－６０细胞程序死亡,磷酸酶１,２Ａ,２Ｃ的抑制剂ｏｋａｄａｉｃ ａｃｉｄ和酷氨酸磷酸的抑制剂钒酸钠则无此效应。     

环孢菌素A逆转HL—60／Har细胞对抗肿瘤药物的抗性

0.5μmol/L CSA与阿霉素联合用药,可显著增强阿霉素对HL-60/Har细胞的毒性。克隆抑制实验证实联合用药时,克隆形成由阿霉素单独用药的155±19降至19±7个,分别是对照的64％和9％,差异显著(P<0.01)。CSA能增加柔红霉素在HL-60/Har细胞内的积累。0.1μ/ml阿霉素对细胞周期没影响。与CSA合用后;阻断于G_2M期的细胞由11％增至50％。结果显示:1.CSA能逆转HL-60/Har细胞的多药抗性;2.逆转作用是通过增加抗肿瘤药物在细胞内的积累来实现的。     

肿瘤细胞多药抗性基因的表达调控

肿瘤细胞多药抗性的一个重要特征是Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）的过度表达,从人、鼠中分离到编码Ｐｇｐ的ｍｄｒｌ基因,ｍｄｒｌ基因启动子含有ＡＰ１、ＳＰ１、热应激等多种反应元件,有三种核蛋白能与ｍｄｒｌ启动子结合。抗肿瘤药物、致癌剂、紫外线、热应激使ｍｄｒｌ基因活化,ｒａｓ,ｒａｆ,ｐ５３,ｍｙｃ等癌基因参与ｍｄｒｌ基因的表达调控。     

细胞转化过程中胞内钙离子浓度的变化

使用钙离子荧光探针Ｆｌｕｏ－３ＡＭ和ＤＮＡ荧光染料Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２联染细胞的方法,利用显微分光光度计ＭＰＶⅡ测量了两种温度敏感细胞—６Ｍ２和ｔｓＲＳＶＮＩＨ３Ｔ３－ＬＡ９０细胞及Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２和转化Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２细胞在不同细胞周期时相内钙的浓度,发现从Ｇ１期到Ｓ期到Ｇ２期,６ｍ２细胞当在３３℃培养时（转化状态）胞内钙的浓度〔Ｃａ＾２＋〕ｉ分别为８５．０,１３８．４２３９．０ｎｍｏｌ     

活细胞的离心淘洗分离

离心淘洗的原理是当外向的离心力和内向的流力与浮力之间达到平衡时,由于不同大小的细胞具有不同的沉降系数,它们分别停留在一定的位置,从而可通过淘洗将不同大小的细胞分离开。它的突出优点是速度快(1—1.5小时),可分离大量活细胞(10~7-10~9细胞),可以得到各种不同周期时相的细胞,以便进行细胞增殖及其调控的研究。目前使用该法已经可以分离血细胞、骨髓细胞、自然杀伤细胞、培养细胞、实体肿瘤细胞及其宿主细胞等等。本文主要介绍我室开展此项工作的初步结果。