分子疫苗防治老年性痴呆小鼠模型的研究进展

老年斑是老年性痴呆(Alzheimer's disease, AD)的特征性病理改变,β-淀粉样(β-amyloid,Aβ)是其主要成分.将Aβ作为疫苗对动物进行免疫,有明显抑制转基因小鼠脑内Aβ的沉积,清除原有斑块的作用,从而减少异常Aβ沉积对认知功能的损害.疫苗没有引起针对动物自身抗原的免疫反应,对中枢神经系统的正常功能也没有明显损害.     

乙醛对人类神经tau磷酸化的影响

用乙醛对人类神经tau进行醛胺化,通过NCLK(neuronal cdc2-like protein kinase)和［γ-³²P］ATP对其磷酸化.磷酸化的产物经胃蛋白酶降解及HPLC(C-18)分析降解片段,发现醛胺化tau的降解物中有两个新的磷酸化肽段(A4和A6).     

山东地区盐碱土花生种子际土壤微生物群落结构的研究

【目的】以不同含盐量的滨海盐土、内陆盐碱土和中等肥力非盐碱土壤为实验对象,探讨花生种子在吸水膨胀与萌发过程中,不同类型盐碱土对种子际土壤微生物多样性变化的影响。【方法】采集不同含盐量的滨海盐土、内陆盐碱土和中等肥力非盐碱土壤,通过对各样品中细菌的16S r RNA基因的V3-V4区进行PCR扩增,利用Illumina Hiseq高通量测序技术对12份V3-V4高变区PCR产物进行测序,并对测序数据进行生物信息学分析。【结果】(1)盐碱土壤的种子际细菌群落多样性高于非盐碱土壤,且以东营青坨滨海盐土种子际土壤细菌群落多样性较高。(2)不同类型土壤样本微生物群落结构在纲水平存在明显差异。4种土壤类型种子际土壤细菌共分属于6个菌纲,分别为Proteobacteria、Actinobacteria、Actinobacteria、Bacteroidetes、Acidobacteria和Firmicutes菌纲,并均以Proteobacteria和Actinobacteria菌纲为主要菌纲。全样本菌落结构分析结果表明,4种类型土壤中不同吸胀时间内种子际微生物菌落在门、属水平上的类型和丰度差异最为显著(P0.05)。(3)beta多样性分析和各样本遗传距离(phylogenetic distances)聚类树图分析表明,4个土壤类型的12个土壤样本种子际土壤中微生物群落均可聚为2大类。【结论】土壤含盐量越高其种子际土壤细菌群落多样性较高。不同类型土壤样本微生物群落结构在纲水平存在明显差异,以Proteobacteria和Actinobacteria菌纲为主要菌纲。种子吸胀萌发时间影响种子际微生物菌落在门、属水平上的类型和丰度,但对相同土壤类型样本间遗传距离无影响。     

复方沙棘籽油栓改善阴道微生态环境的临床试验研究

目的研究中成药复方沙棘籽油栓调节微生态环境对治疗外阴阴道假丝酵母菌病合并菌群紊乱的临床意义。方法采用多中心、前瞻性、随机、剂量组平行对照临床试验,分为氟康唑组和联合应用氟康唑及复方沙棘籽油栓组,在停药的第(7±3)天和4周±5天分别随访患者一次,观察症状及实验室检查等方面的变化,采用Nugent评分进行微生态改善及疗效评价。结果有64名妇女进入研究,其中氟康唑组31例,联合组33例。两组患者入组时各项指标无显著性差异。两组患者之间入组、第一次随访的pH值均无显著性差异,但是在第二次随访中显示氟康唑组的pH值(4.42±0.48)显著高于联合组(4.09±0.39),P0.05。入组氟康唑组的Nugent评分(6.26±1.29)与联合组(6.18±1.21)无显著差异,第一次随访两组Nugent评分有显著差异,氟康唑组(4.55±1.84)、联合组(3.39±1.44),P0.05。在第二次随访时,氟康唑组的Nugent评分(4.84±1.85)显著高于联合组(3.06±1.63),P0.05。第二次随访,单用氟康唑组真菌复发率高于联合组(13/31,41.9%vs 5/33,15.2%,P=0.017)。结论复方沙棘籽油栓可以改善阴道微生态环境,联合氟康唑治疗外阴阴道假丝酵母菌病合并菌群紊乱较单用氟康唑组比较,阴道微生态环境恢复好,真菌复发率低。     

APP N端片段的神经营养作用

APP是β－淀粉样肽的前体蛋白,由695－770个氨基酸经,春N端水解产物可分沁至细胞外环境。AP具有促进神经细胞生长作用,其中319－335肽段即APP17肽能提高动物的学习记忆能力。其他APP片段是否具有神经营养功能未见报道。本研究通过观察APP N端片段对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响以及对实验性糖尿病动物行为的影响,希望APP促进神经细胞生长的其他肽段。用化学合肥APP N端多肽片段,以SY5Y细胞MTT代谢率、细胞计数、LDH漏出率和实验性糖尿病小鼠水迷宫试验结果为观察指标。结果APP64肽、29肽、11肽均有促进SY5Y细胞生长的作用,APP11肽可提高糖尿病动物水迷宫测试成绩,说明可溶性APP的N端可能具有神经营养作用,我们认为保持此作用的最短片段为APP11肽,此肽段的发现为进一步研究APP的构效关系奠定了基础。     

胃癌与癌旁组织miRNA差异表达谱的研究

目的研究胃癌中表达失调的miRNA及其生物学功能,从而进一步阐明miRNA在胃癌发生中的分子机制。方法将总RNA加ploy（A）尾后进行反转录PCR扩增特异miRNA,使用QuantityOne软件进行定量分析,计算每对样本胃癌与癌旁组织比值（T／NRatio）,使用SAM软件进行统计分析。MTT法检测miR-21和miR-17-5p对胃癌细胞系生长的影响。结果在8对胃癌及癌旁组织样本中对237个miRNA进行了表达谱分析。对于检测到表达的161个miRNA,使用SAM软件进行统计分析,确认22个在胃癌中表达上调,2个在胃癌中表达下调（FDR=0．0963）。进一步通过生长抑制试验证实在胃癌组织中表达异常增高的miR-21和miR-17-5p对胃癌细胞的生长有明显的促进作用。结论这些在胃癌中异常表达的miRNAs具有成为新一代胃癌标记物的潜力,能够为胃癌的精确诊断分型提供依据,同时针对这些靶点可以开发新的核酸治疗技术,通过抑制或增强其功能来达到治疗胃癌的目的。     

蛋白激酶C亚型在人胃癌组织中的表达及其意义

目的研究PKC亚型α、β1、β2及ε在人胃癌组织的表达,并探讨PKC亚型表达与胃癌组织分化程度、临床分期以及与淋巴结转移的关系。方法采用免疫组化方法观察胃癌组织及其癌旁组织中PKC亚型α、β1、β2及ε的表达。结果PKCα在46例胃癌组织中,80.3%呈阳性表达,其中21.74%呈强阳性表达,与癌旁组织相比,二者差异显著(χ2=4.813,P<0.05);PKCβ1、β2则呈阴性;20例癌旁组织中,PKCε70%呈阳性表达,均为( ),46例胃癌组织中84.8%呈阳性表达,其中26.1%呈强阳性,两者阳性率无显著差异(χ2=1.93,P>0.05),但染色强度差异显著(χ2=5.07,P<0.05)。结论1.胃癌组织和癌旁组织均表达PKCα和,εPKCβ1、β2则呈阴性。2.胃癌组织PKC亚型α、ε的表达较癌旁组织显著增强。3.PKCα、ε的表达与胃癌组织的分化程度、临床分期及有无淋巴结转移均无明显相关性。     

睡眠剥夺中感觉运动皮层和视觉皮层神经活动及警觉水平的改变

在睡眠剥夺(sleep deprivation, SD)过程中,人类大脑的神经活动和警觉水平如何受到影响,尤其是感觉运动和视觉系统,目前仍是研究的热点。静息状态功能磁共振成像(resting state functional magnetic resonance imaging,rfMRI)作为一种反映人脑自发活动的非侵入式成像技术,在睡眠剥夺的研究中得到了广泛应用。本研究采用9次重复rfMRI和心理运动警觉任务(psychomotor vigilance task,PVT),以探索23名志愿者在整个36小时的睡眠剥夺过程中神经活动和警觉水平的变化。我们采用基于PVT的平均反应时间(mean reaction time, MRT)和失效率(lapses ratio, LR)评估警觉水平的变化。我们采用基于rfMRI的区域同质性(region homogeneity,ReHo)和低频波动幅度(amplitude of low frequency fluctuation,ALFF)评估大脑神经活动变化。结果表明,感觉运动网络(sensorimotor network, SMN)和视觉区域(visual network, VN)是受到睡眠剥夺影响最严重的区域。我们采用组独立成分分析(Group Independent component analysis, GICA)将视觉相关区域划分为视觉I区、视觉II区、视觉关联区,并从解剖自动标记(Anatomical automatic labeling,AAL)模板中提取运动感觉相关区域,包括中央前/中央后回、中央旁小叶和辅助运动区。我们发现,睡眠剥夺后16 - 30小时脑神经活动及警惕性下降。我们采用2×3重复测量方差分析,探讨睡眠压力、昼夜节律及其交互作用对感觉运动相关和视觉相关脑区神经活动的影响。我们观察到睡眠压力与交互作用对感觉运动相关区域和视觉相关区域有显著影响。我们采用皮尔逊相关系数评估警觉水平变化与感觉运动相关和视觉相关脑区神经活动变化的关系。睡眠剥夺期间所有感觉运动相关区域的神经活动变化与警觉变化均存在显著的相关关系。我们的研究结果证实,睡眠剥夺从第一天24：00开始改变SMN和VN的警戒水平和神经活动,睡眠压力和昼夜节律在睡眠剥夺期间调节SMN和VN的神经活动。此外,昼夜节律的效应受到睡眠压力的显著调节。感觉运动相关区域和视觉相关区域的增强导致他们远程连接的减弱,这可能是睡眠剥夺期间响应时间变慢的原因。     

不同方案阴道乳杆菌活菌胶囊结合抗菌药物治疗混合性阴道炎的临床研究

目的 研究两种阴道乳杆菌活菌胶囊结合抗菌药物对混合性阴道炎的疗效。方法 选取2015年4月至2020年12月北京大学第一医院收治的混合性阴道炎患者50例。同时符合以下两项即确诊为混合性阴道炎：（1）阴道分泌物真菌检测阳性;（2）阴道分泌物革兰染色积分法评分（Nugent评分）≥7分;（3）阴道分泌物滴虫镜检阳性。入选患者根据乳杆菌胶囊使用方法分为联合组（25例）及序贯组（25例）,联合组在使用抗菌药物的同时使用阴道乳杆菌活菌胶囊,序贯组在使用抗菌药物结束后序贯使用阴道乳杆菌活菌胶囊。评估两组患者病原体转阴率、症状改善及乳杆菌恢复情况。结果 序贯组患者综合治愈率高于联合组（56.0%vs 28.0%,P<0.05）。经过治疗后,联合组有12.0%的患者阴道菌群恢复为形态类似乳杆菌的革兰阳性大杆菌,序贯组有32.0%恢复为形态类似乳杆菌的革兰阳性大杆菌,两组差异无统计学意义（P>0.05）,但序贯组在趋势上高于联合组。结论 对于混合性阴道炎的治疗来说,抗菌药物治疗后序贯使用阴道乳杆菌活菌胶囊优于抗菌药物治疗同时联合使用阴道乳杆菌活菌胶囊。     

G418抗性筛选标记在酵母体系中的应用

 <正> G118是一种氨基苷类抗菌素衍生物,对原核和真核细胞均有毒性作用,能阻断细胞内蛋白质合成。将G418抗性neo基因引入细胞后,neo基因即能编码产生氨基糖苷类3’-磷酸转移酶Ⅰ,它能失活几种不同的2-脱氧链霉氨基糖苷类抗菌素,使其在3’羟基部位磷酸化,