脂肪酶合成聚乙二醇400油酸单酯和双酯的影响因素

研究了固定化假丝酵母(Candida sp.)-1619脂肪酶合成聚乙二醇400油酸单酯与双酯的影响因素。不同摩尔比的底物反应6h都有单酯和双酯生成。酸与醇的摩尔比为O.25：1到2：1时,生成单酯与双酯的比例在3.5：1到4:1的范围内;当酸与醇的摩尔比达到3：1至8:1时,单、双酯的生成量相仿。反应达平衡时(24h),不同摩尔比底物的反应产物都是双酯。在含己烷的反应体系中,反应平衡时有单酯存在,摩尔比为2：1时,反应物中单、双酯比达到l：3.2。     

水不溶酶的研究II．对氨基苯磺酰乙基纤维素-葡萄糖淀粉酶的制备

1．用甘蔗渣纤维素及对-β-硫酸酯乙砜基苯胺为原料,研究了ABSE-纤维素的制备条件,探讨了黑曲霉(Asp. Niger)粗制糖化酶共价键台到重氮化的ABsE一纤维素上的影响因子。获得ABSE-纤维素糖化酶合适的制备方法。 2．ABSE-纤维素糖化酶含3.7-6.4％蛋白量,酶活力约为10000单位／克,以淀粉为底物,与自然酶比较,相对活力为20—30％,满联时加入适量的硫酸铵能提高相对活力至43．9％。该水不溶酶最高活力是在pH4.5和65～70℃(对淀粉)。在55℃淀粉化液液中稳定性良好。 3．将ABSE-纤维素糖化酶(33912单位)装柱,在55℃,以25．4毫升／小时的流速通过pH 4．5的3l～34％的淀粉液化液进行连续糖化,218小时内得到DE值为93．9的葡萄糖液,326小时后不溶酶柱仍保持原活力的74．9％。而搅拌糖化在140小时后只保持64.8％原活力．     

明胶-戊二醛固定化细胞的改进

采用明胶-戊二醛在有机溶液中成球的方法制备固定化细胞,方法简便,固定化细胞酶活力为6.25—6.75单位/g(湿重)。用该固定化细胞裂解3.0—8.0%的青霉素溶液,裂解率达95.3%以上。裂解液经过浓缩后提取6-APA,产率为86.3%,不经浓缩直接提取6-APA,产品收率为72.4%,产品质量合格。     

在无溶剂系统中固定化脂肪酶合成聚乙二醇400月桂酸酯

在无溶荆反应系统中,研究了固定化假丝酵母(Candida sp)-1619脂肪酶催化合成聚乙二醇400(PEG400)月桂酸酯的酯化条件。在反应过程中不断脱水和使月桂酸的量高于化学计量值的方法,使酯化率明显提高。分批补加PEG₄₀₀使产量进一步增加。在5．0mmol月桂酸．2．5mmolPEG400,20mg同定化脂肪酶(200u),O．2ml水组成的反应体系中,40℃,锥形瓶敞口振荡反应48h。醑化率达91％;在负压条件下反应．酯化率达98．9％;反应体系中月桂酸的董增加到6．0mmol时,PEG₄₀₀完全被酯化。用己烷提取产物的收率为95％．通过薄层色谱鉴定酯化产物为双酯。     

固定化脂肪酶催化聚乙二醇脂肪酸酯的合成

固定化假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｓｐ．）－１６１９脂肪酶催化脂肪酸和不同聚合度的乙二醇形成酯。其中以聚乙二醇４００（ＰＥＧ４００）的酯化率较高,Ｃ_１０－Ｃ_１８的饱和脂肪酸与ＰＥＧ４００反应的酯化率相仿。反应体系中,月桂酸与ＰＥＧ４００的摩尔比大于２∶１时有利于酯化反应,作用的最适温度为４０℃,最适Ｐｈ为６.０。在比较的３０种添加有机溶剂中,饱和烷烃,芳香烃能促进反应,使酯化率提高２０％左右。反应开始添加５μｌ水有利于酶的作用,外加水量超过适量时,随外加水量的增加酯化率下降。在由２.５ｍｍｏｌ月桂酸,１.２５ｍｍｏｌＰＥＧ４００,１０ｍｇ固定化脂肪酶（１００ｕ）,５ｍｌ己烷,５μｌ水组成的反应体系中,４０℃振荡反应２２ｈ,酯化率达４９.８％。经薄层色谱,气相色谱鉴定,产物为聚乙二醇４００月桂酸酯。     

酶促反应速度的回归分析

在酶学研究中,酶促反应速度是一个重要参数。在探讨酶的结构与功能的关系和研究酶作用机理中,以及寻找酶促反应的最适条件等方面,都需要酶促反应速度提供实验证据。通过对大量的实验数据的分析和处理,可真实地反映出事物的客观规律。     

产胞外邻苯二酚1，2-双加氧酶的菌种筛选和发酵条件的研究

从112株细菌中筛选出两株产胞外邻苯二酚1,2一双加氧酶的假单胞菌(Pseubomonassp.)。 进行了该菌产酶的发酵条件试验。产酶的最适温度为30℃,最适起始pH为6．8—7-0。葡萄糖、麦芽糖和甘油对产酶有明显的抑制作用,苯甲酸钠对产酶有促进作用。氨态氮对菌体生长和产酶是必需的。琥珀酸钠是酶形成的有教诱导物。采用0.15％苯甲酸钠培养基(pH6.8—7.0),于30℃振荡培养72h,每毫升发酵液酶活力可达10单位。     

铜绿假单胞菌完整细胞a-氨基酸酯水解酶的性质

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) AS 1.204完整细胞a-氨基酸酯水解酶能催化a-氨基酸酯的水解和转移a-氨基酸酯的酰基到胺亲核试剂上。在水解和转移反应中酶的一般性质相同,最适pH为5．2,最适温度都是40℃。7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(7一ADCA)抑制苯甘氮酸甲酣(PG-Ome)的水解。因此,该酶催化7一ADCA和PG-Ome转化成相应的半合成头孢菌素。