大鼠肝癌和正常肝染色质非组蛋白(HAP_2)的双向凝胶电泳比较~*

利用等电点聚焦(IEF)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的双向电泳以及高度灵敏的银染色相结合的方法,对大鼠肝癌和正常肝染色质非组蛋白进行了对比分析。结果指出,在两个样品中均可看到五百个左右的蛋白点。关于这些蛋白点的分布,正常肝在较大分子量和较高等电点区域有较高的相对百分率,而肝癌在较低分子量和较低等电点区域有较高的相对百分率。与正常肝制品比较,肝癌制品中出现了一些独有的蛋白质点子,而在正常肝中原有的一些点子却消失了。     

鸡胚视网膜发育中花生凝集素结合糖蛋白的图谱

我们应用微量(1—3微克蛋白)等电点聚焦和SDS双向电泳对鸡胚视网膜发育的第4天(E_4)到第16天(E_(16))总蛋白图谱进行分析,并结合印迹的PNA免疫酶标反应,分析了总蛋白中与PNA结合的糖蛋白图谱的变化。E_4时没有看到PNA结合糖蛋白的任何阳性反应的斑点,E_6时这种糖蛋白的种数突然增加,约占总蛋白数的20%。新的糖蛋白增加的速率在E_6时最快,存其后的发育阶段(E_8—E_(16))慢于总蛋白增加的速率。这种糖蛋白大都是等电点在中性pH范围内,中等大小分子量的糖肽。视神经的总蛋白中含PNA结合糖蛋白数的比例高于同一发育年龄视网膜中的比例,这说明糖蛋白可能主要存在于质膜上。视网膜的总蛋白图谱相似于前脑的,但与视顶盖的更相近。本文对这种能与PNA结合,即含有D-半乳糖残基的糖蛋白在视网膜发育中的意义进行了讨论。     

果蝇卵子发生中独特表达的蛋白

运用单抗技术我们制备了六个单抗,其中四个分别识别在果蝇卵子发 生不同时间和空间表达的抗原。Ｂ２抗原最早出现,主要由包囊细胞和营养细胞合成。该抗原通过运输进入并定人闰在卵后区。Ｆ９抗原随后出现在卵细胞的后区。继而Ｅ８抗原表达并定位在卵细胞膜上。     

巨噬细胞免疫调变信号——Raf-1,MAPK,cPLA2的激活和IL-12分泌的研究

LPS介导的小鼠腹腔巨噬细胞免疫调变的信号和机理是不清楚的.应用LPS和PMA处理抑制性巨噬细胞后,发现Ras下游信号分子Raf-1,MAPK和cPLA₂均被活化,包括Raf-1的磷酸化,MAPK p44和p42磷酸化以及cPLA_2的活化,使花生四烯酸的释放显著增加,结合新近发现的LPS、PMA能诱导抑制性巨噬细胞PKC-α和PKC-ε同工酶的激活与转位,认为在LPS介导的免疫调变中,PKC信号通路的活化及其与Raf-1/MAPK通路的“连接”是主要信号传导通路.同时调变巨噬细胞也能分泌IL-12.     

F9-1胚胎癌细胞与大鼠胸腺细胞杂交产生分化细胞

利用抗8氮鸟嘌呤的F9-1 aza突变株细胞与大鼠胸腺细胞融合,在HAT培养基中成功地筛选到FRT杂交细胞。该种细胞与亲本细胞F9-1 aza的细胞形态完全不同,呈成纤维样、上皮样、圆形或多突起样的分化细胞形态。在扩大繁殖后主要为成纤维样或上皮样细胞。对其中一个集落FRT-1核型检查表明杂种细胞染色体众数为80(范围62—88),C分带显示??包含F9和大鼠胸腺细胞二个亲本的染色体。FRT-1细胞的乳酸脱氢酶图谱中出现由大鼠LDH-A亚基与小鼠LDH-A亚基组成的杂种酶带。该细胞接种到经x光照射的129/Sv-ter小鼠皮下不能长瘤,亦不能在软琼脂上生长,表明F9-1 aza细胞的恶性表型已受到大鼠胸腺细胞基因组的抑制。     

TGF_β相关mRNAs在爪蟾早期胚胎中的表达

用TGF_β-1 cDNA片段作为探针,在爪蟾早期胚胎中检测到了能同此探针杂交的转录产物,分子量分别为4.2 kb,3.2 kb和2.3 kb,其中4.2 kb和3.2 kb的mRNA 在囊胚期(分期7—8)中的含量最高,而在卵裂期胚胎,原肠胚以及神经胚中含量极微。但2.3 kb的mRNA以卵裂期胚胎到神经胚中含最比较稳定。我们称这些能同TGF_β-1cDNA 探针杂之的mRNAs为TGF_β相关的mRNAs (TGFB_β-relatedmRNAs),它们在囊胚中主要分布在植物性半球,但背方和腹方的含量无明显差别。根据TGF_β相关mRNAs 在囊胚国的含量最高和主要分布在植物性半球,我们推测它们可能与中胚层诱导有关。     

果蝇卵子发生中独特表达的蛋白

运用单抗技术我们制备了六个单抗,其中四个分别识别在果蝇卵子发生不同时间和空间表达的抗原。B2抗原最早出现,主要由包囊细胞和营养细胞合成。该抗原通过运输进入并定位在卵母细胞后区。F9抗原随后出现在卵细胞的后区。继而E8抗原表达并定位在卵细胞膜上。C3抗原表达最晚。主要分布在成熟卵的前后两端外侧的卵黄膜间隙中。这些抗原所具有的独特表达和分布图式提示它们在卵子发生中可能具有一定的独特功能。     

介绍一种在蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳及双向电泳中应用的氨银染色法

1979年Switzer、Merril等人相继发表了硝酸银染色蛋白质比较马斯蓝染色或放射自显影的效果更佳之后,入江伸吉、上林。Oakley等人又进一步证实并加以改良或简化。硝酸银染色蛋白质的作用机理目前尚未搞     

强壮果蝇(D.virilis)多线染色体的DNA·RNA内源杂交分子原位免疫酶标观察

应用兔抗polydT·polyrA的特异性抗体,在果蝇D.virilis多线染色体上用免疫酶标的方法检测到DNA·RNA内源杂交分子。多线染色体制片必须先进行变性复性处理(即内源分子杂交技术)才能得到明显的酶标显色带。大致可分辨到363条带,遍及染色体的各个区域。用DNA·RNA杂交分子为特异性底物的RNA酶H处理后再经变性复性处理后的多线染色体,免疫酶标的阳性带几乎全部消失,因此证明经内源分子杂交技术处理后用免疫化学方法检测到的阳性带确是由DNA·RNA内源杂交分子所构成的。     

人体肝癌细胞BEL-7402细胞株表面抗原的研究

木瓜酶能将体外培养的人体肝癌细胞株BEL—7402细胞表面的抗原性物质消化下来。7402细胞表面抗原中除了有正常人肝细胞膜的抗原外,还减失了正常人肝细胞膜的一些抗原和增得了另一些抗原。增得的抗原引起的兔抗血清有补体依赖的、对7402细胞相对专一的细胞毒性作用。