盐碱戈壁药用植物骆驼刺内生菌的分离、培养与鉴定

骆驼刺(Alhagi sparsifolia Shap.)是新疆民间常用药用植物。为了解骆驼刺内生菌的多样性,获得骆驼刺的内生菌资源,本实验在新疆维吾尔克拉玛依盐碱戈壁(北纬45°16’,东经85°2’)采集骆驼刺。利用常规平板分离方法进行植物内生菌菌株的分离、培养,测定菌株16S r DNA基因序列,并结合系统发育分析进行鉴定。从骆驼刺中共分离到可培养内生菌50株,分属于葡萄球菌属(Staphylococcus)、芽胞杆菌属(Bacillus)、芽胞八叠球菌属(Sporosarcina)、微杆菌属(Exiguobacterium)、气球菌属(Aerococcus)、巨型球菌属(Macrococcus)、多米杆菌(Domibacillus)、巴尔加瓦菌属(Bhargavaea)、微球菌属(Micrococcus)、棒杆菌属(Corynebacterium)、考克菌属(Kocuria)、细杆菌属(Microbacterium)、副球菌属(Paracoccus)、马西利亚菌属(Massilia)和耐辐射球菌属(Deinococcus)15个菌属。其中葡萄球菌属占绝对优势,其次为芽胞杆菌属,为环境和植物当中广泛存在的菌属,分离获得的其他细菌与骆驼刺生长环境(盐渍化严重,高辐射)有关,内生菌多样性与骆驼刺在新疆干旱、寒冷、盐碱土壤环境中的适应性机制具有密切的联系。     

新疆特色药食两用植物恰玛古内生放线菌的分离与鉴定

恰玛古（Qamgur, Brassica rapa L.）内生菌的研究主要集中在内生真菌,内生放线菌的研究报道较少。通过研究新疆药食两用植物恰玛古内生放线菌多样性,以期发现产新活性物质的放线菌或新种放线菌,为研究微生物药物奠定基础。从恰玛古根、茎和叶三个部位分离培养获得内生放线菌,对其菌落与个体形态进行观察,并利用序列测定方法进行鉴定,以获取其分类地位。从恰玛古三个部位共分离得到17株内生放线菌,其中12株为革兰氏阳性杆菌,3株为革兰氏阳性球菌,2株为革兰氏阳性丝状菌;17株内生放线菌分属于红球菌属（Rhodococcus）、拟诺卡氏菌属（Nocardiopsis）、链霉菌属（Streptomyces）、短杆菌属（Brevibacterium）、小短杆菌属（Brachybacterium）、两面神菌属（Janibacter）和微杆菌属（Microbacterium）。从新疆药食两用植物恰玛古中分离获得17株内生放线菌以稀有放线菌为主。     

骆驼刺内生真菌的分离、鉴定与抑菌活性初筛

本研究采集干旱沙漠植物骆驼刺(Alhagi sparsifolia Shap.)标本,采用匀浆涂布法分离培养骆驼刺内生真菌,共分离获得9株内生真菌,通过ITS序列测定的方法进行鉴定,其中7株(LTCZ2、LTCY1a、LTCY1b、P9、P10、P11、3P1)为外担菌纲(Exobasidiomycetes),2株(LTCY2、LTCY3)为不整囊菌纲(Eurotiomycetes)曲霉科(Eurotiaceae)曲霉菌属(Aspergillus)。采用菌饼法检测其抑菌活性,P9、P10、P11、LTCY1a、LTCY1b、LTCZ2、LTCY3对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有潜在抑菌活性,LTCY3、P10和LTCY2对粪肠球菌(Enterococcus faecalis)有潜在抑菌活性,其中分离获得的一株曲霉属内生真菌LTCY3对临床常见的致病菌金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌(Escherichia coli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、粪肠球菌均具有潜在抑菌活性。本研究以期为今后开发利用新的微生物资源提供科学依据。     

新疆三个不同盐碱地区土壤沉积物中细菌多样性分析

运用高通量测序技术对新疆巴里坤湖、阿勒泰福海阿尔达乡盐湖、吐鲁番亚尔乃孜沟三个盐碱地区土壤沉积物的细菌进行序列测定和分析,发现三个不同盐碱土壤沉积物中菌落构成在门水平和属水平均存在差异,阿勒泰福海阿尔达乡盐湖土壤沉积物中物种总数最多且具有丰富的多样性,其次是巴里坤湖地区土壤沉积物,而吐鲁番地区土壤沉积物中物种总数和多样性最少,三个不同盐碱土壤沉积物中细菌的丰度、多样性差异有统计学意义(Z_(chao)=9.373,F_(shannon)=1 497.94,F_(Simpson)=159.46,P0.05)。门水平看三个不同盐碱地区土壤沉积物中共有的优势菌门为变形菌门(Proteobacteria),其次是拟杆菌门(Bacteroides),门水平上差异存在统计学意义(P0.05)。三个不同盐碱地区土壤沉积物共获得827个不同的菌属,巴里坤地区土壤沉积物气单胞菌属(Aeromonas)、热带小单胞菌属(Tropicimonas)丰度较高;阿勒泰地区是气单胞菌属丰度较高;吐鲁番地区优势菌群则是鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)和柄杆菌属(Caulobacter),属水平上差异存在统计学意义(P0.05)。本研究得出三个不同盐碱地区土壤沉积物中细菌多样性在门水平和属水平细菌组成和丰度存均在差异,且具有不同的优势菌,为微生物资源开发利用及医药研发提供了前期研究基础。     

一株人肠源性高效尿酸降解菌的分离、鉴定及降尿酸条件优化

摘要 目的：肠道作为人体的重要消化器官，其内定植的微生物在尿酸合成和代谢过程中发挥着重要作用，本研究利用含尿酸靶向培养基筛选正常人群肠道内具有降尿酸功能的细菌并鉴定。方法：依据尿酸的摩尔质量制备含不同浓度尿酸的BHI培养基，液体培养基扩增并驯化肠道粪便微生物，固体培养基分离和纯化具有尿酸降解功能的细菌。挑取固体培养基上形态一致的单个菌落进行革兰氏染色和镜检，筛选出已纯化菌株，在需氧和厌氧培养条件下测定尿酸降解率，选取降解率≥50%以上的菌株为高效尿酸降解菌的候选菌株，再测定不同温度和pH值条件下的尿酸降解率，进行降尿酸条件优化。利用16S rDNA序列测定法对尿酸降解菌进行鉴定，药敏实验测定该菌对抗生素的敏感性。结果：正常人群粪便微生物中分离获得一株高效尿酸降解菌B5C，第5天需氧条件下的尿酸降解率均>50%，与初始尿酸浓度相比具有统计学意义（P＜0.05）。优化降尿酸条件后，在37℃、pH7.0时，降解率可达88.7%，经鉴定为粪肠球菌，对常见的抗生素如阿莫西林、氨苄西林和青霉素G等具有较高的敏感性。结论：本研究利用含不同尿酸浓度的靶向培养基驯化、分离和鉴定出一株人肠源性细菌，在需氧条件下也具有较高的尿酸降解率，可为今后临床降尿酸微生物制剂的开发和利用提供新的菌种资源。     

肿瘤患者血清中SARS-CoV抗体阳性原因分析

探讨SARS冠状病毒(SARS—CoV)抗体在SARS病原学诊断中的特异性及其在肿瘤患血清中的假阳性问题。应用ELISA和荧光定量RT-PCR技术检测了111例正常对照和40例肿瘤患血清中SARS—CoV抗体的阳性率。在111例正常对照中,IgM抗体均阴性,IgG抗体的阳性率为3．6％(4／111);IgG抗体诊断SARS的特异性为96．4％,两种抗体同时阳性诊断SARS的特异性为100％。40例肿瘤患中,IgM抗体均阴性,IgG抗体阳性率17．5％(7／40)。经RT—PCR检测,上述肿瘤患阳性病例均为阴性。结果表明,同时测定SARS—CoV的两种抗体可降低诊断的假阳性率,提高诊断的特异性。用非纯化SARS—CoV抗原制备的ELISA试剂盒测定肿瘤患的SARS—CoV抗体,可能出现假阳性。在肿瘤患中出现假阳性的原因可能与包被的抗原有关。     

在校大学生口臭相关危险因素调查

目的:了解不同民族和性别大学生自述口臭发生率是否存在差异及引起口臭的相关危险因素和保护因素。方法:抽取我校的部分班级学生400名进行问卷调查。结果:我校大学生自述口臭发生率为15.0%,汉族15.8%,维吾尔族12.3%。结论:在校大学生自述口臭发生率在民族和性别间存在差异,喝酒、牙龈炎、牙龈出血、经常便秘为危险因素,刷牙和服用药物为保护因素。     

维吾尔族结肠癌患者肠道菌群的分布情况研究

目的:检测新疆维吾尔族结肠癌人群肠道菌群结构,探讨维吾尔族结肠癌患者肠道菌群结构差异,以求找到肠内与结肠癌有关系的菌群。方法:使用16Sr DNA-PCR-DGGE技术对维吾尔族结肠癌患者肠道菌群分布情况制作肠道菌群指纹图谱,从图谱中的条带进行切胶回收、进行克隆、测序,与Genebank数据库提供的序列进行比对做树状图分析,对新疆维吾尔族结肠癌患者肠道细菌种群多样性进行探讨。结果:通过实验得到了维吾尔族结肠癌患者肠道菌群结构特征的DNA指纹图谱、基因序列及树状图。测序结果显示,维吾尔族结肠癌患者肠道菌群中主要分布乳酸杆菌属,拟杆菌属和梭杆菌属以及很多差异性细菌的分布情况。从维吾尔族结肠癌患者肠道菌群的分布情况来看,优势菌乳酸杆菌量甚少,拟杆菌属,梭杆菌属数量较多。结论:肠道乳酸杆菌优势菌量的减少及拟杆菌属,梭杆菌属比例的改变可能与结肠癌患者发病有一定的关系。