一株人肠源性高效尿酸降解菌的分离、鉴定及降尿酸条件优化

摘要 目的：肠道作为人体的重要消化器官，其内定植的微生物在尿酸合成和代谢过程中发挥着重要作用，本研究利用含尿酸靶向培养基筛选正常人群肠道内具有降尿酸功能的细菌并鉴定。方法：依据尿酸的摩尔质量制备含不同浓度尿酸的BHI培养基，液体培养基扩增并驯化肠道粪便微生物，固体培养基分离和纯化具有尿酸降解功能的细菌。挑取固体培养基上形态一致的单个菌落进行革兰氏染色和镜检，筛选出已纯化菌株，在需氧和厌氧培养条件下测定尿酸降解率，选取降解率≥50%以上的菌株为高效尿酸降解菌的候选菌株，再测定不同温度和pH值条件下的尿酸降解率，进行降尿酸条件优化。利用16S rDNA序列测定法对尿酸降解菌进行鉴定，药敏实验测定该菌对抗生素的敏感性。结果：正常人群粪便微生物中分离获得一株高效尿酸降解菌B5C，第5天需氧条件下的尿酸降解率均>50%，与初始尿酸浓度相比具有统计学意义（P＜0.05）。优化降尿酸条件后，在37℃、pH7.0时，降解率可达88.7%，经鉴定为粪肠球菌，对常见的抗生素如阿莫西林、氨苄西林和青霉素G等具有较高的敏感性。结论：本研究利用含不同尿酸浓度的靶向培养基驯化、分离和鉴定出一株人肠源性细菌，在需氧条件下也具有较高的尿酸降解率，可为今后临床降尿酸微生物制剂的开发和利用提供新的菌种资源。     

肺炎支原体肺炎伴喘息儿童血清25(OH)D_3、Th17/Treg表达水平与肺功能的关系

目的:探讨肺炎支原体肺炎伴喘息儿童血清25羟基维生素D3[25(OH)D_3]、辅助性17细胞/调节性T细胞(Th17/Treg)表达水平与肺功能的关系。方法:将新疆医科大学第五附属医院收治的肺炎支原体肺炎伴喘息患儿26例作为肺炎伴喘息组,肺炎支原体肺炎不伴有喘息患儿54例作为肺炎不伴喘息组,另选取健康儿童30例作为对照组,比较各组血清25(OH)D_3、白细胞介素(IL)-10、IL-17、Th17细胞及Treg细胞占CD4+T细胞比例及肺功能,并分析其相关性。结果:肺炎伴喘息组血清25(OH)D_3、IL-10、Treg细胞占CD4+T细胞比例低于肺炎不伴喘息组、对照组,Th17细胞占CD4+T细胞比例、Th17/Treg、IL-17高于肺炎不伴喘息组、对照组(P0.05)。各组第一秒最大呼气量占用力肺活量百分比(FEV1/FVC)比较差异无统计学意义(P0.05),肺炎伴喘息组FEV1占预计值百分比(FEV1%pred)、峰值呼气流量(PEF)低于肺炎不伴喘息组、对照组(P0.05),肺炎不伴喘息组与对照组FEV1%pred、PEF比较无统计学意义(P0.05)。肺炎伴喘息组患儿血清25 (OH)D_3与Th17/Treg、IL-17呈负相关(P0.05),与IL-10、FEV1%pred、PEF呈正相关(P0.05),血清Th17/Treg与IL-10、FEV1%pred、PEF呈负相关(P0.05),与IL-17呈正相关(P0.05)。结论:肺炎支原体肺炎伴喘息儿童血清25(OH)D_3、Th17/Treg表达水平异常,肺功能下降,且25(OH)D_3、Th17/Treg表达水平与肺功能相关。