巨噬细胞对氧化和丙二醛修饰的低密度脂蛋白结合与降解特性的比较研究

用Cu~(2+)(引发氧化修饰)和脂质过氧化降解产物丙二醛对低密度脂蛋白(LDL)进行修饰,分别测定了巨噬细胞系P~(300)D_1和小鼠腹腔巨噬细胞对两种被修饰LDL的结合量(包括内移量)和降解量。结果显示:LDL经氧化修饰和丙二醛修饰后被两类巨噬细胞的结合量与降解量均高于正常LDL,在修饰程度相近(琼脂糖电泳迁移率相近)时,两类巨噬细胞对氧化修饰LDL的结合量与降解量高于丙二醛修饰的LDL。竞争性抑制结果显示,丙二醛修饰的LDL和乙酰化修饰的LDL均可部分抑制巨噬细胞对氧化修饰LDL的结合与降解。     

巨噬细胞对氧化和丙二醛修饰的低密度脂蛋白结合与降解特性的比较研究

用Cu~(2+)(引发氧化修饰)和脂质过氧化降解产物丙二醛对低密度脂蛋白(LDL)进行修饰,分别测定了巨噬细胞系P~(300)D_1和小鼠腹腔巨噬细胞对两种被修饰LDL的结合量(包括内移量)和降解量。结果显示:LDL经氧化修饰和丙二醛修饰后被两类巨噬细胞的结合量与降解量均高于正常LDL,在修饰程度相近(琼脂糖电泳迁移率相近)时,两类巨噬细胞对氧化修饰LDL的结合量与降解量高于丙二醛修饰的LDL。竞争性抑制结果显示,丙二醛修饰的LDL和乙酰化修饰的LDL均可部分抑制巨噬细胞对氧化修饰LDL的结合与降解。     

氧化修饰低密度脂蛋白对巨噬细胞一氧化氮合酶基因表达的影响

氧化修饰LDL(OX-LDL)可抑制脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞NO释放, 而正常(N-LDL)和乙酰化LDL(AC-LDL)则没有抑制作用.OX-LDL对NO释放的抑制作用随LDL修饰程度的升高而增强,且具有浓度和时间效应.狭缝杂交结果显示OX-LDL处理可使LPS诱导的巨噬细胞NOS mRNA含量下降,提示OX-LDL对NO释放的抑制作用可能发生在转录水平.     

氧化LDL的不同组分在抑制巨噬细胞释放NO中的作用

研究表明：氧化ＬＤＬ（Ｏｘ－ＬＤＬ）可抑制ＬＰＳ诱导的巨噬细胞ＮＯ释放,而正常ＬＤＬ和乙酰化ＬＤＬ则无抑制作用。用谷胱甘肽地的酶模拟物ｅｂｓｅｌｅｎ清除Ｏｘ－ＬＤＬ上的脂氢过氧化物对其抑制作用没有影响。Ｏｘ－ＬＤＬ的蛋白组分对ＮＯ释放也没有影响,而脂质组分则有抑制作用。ＬＤＬ脂质的主要成分亚油酸和卵磷脂无论单独还是共同氧化后对ＮＯ释放都没有影响,而亚油酸和胆固醇一起氧化后则对ＮＯ的释放有很强的抑制     

几种抗氧化剂抑制低密度脂蛋白氧化修饰能力的比较研究

用ＦＯＸ（Ｆｅｒｒｏｕｓｉｏｎｏｘｉｄａｔｉｏｎｉｎｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｆｅｒｒｉｃｉｏｎｉｎｄｉｃａｔｏｒｘｙｌｅｎｏｌｏｒａｎｇｅｆｏｒｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔｏｆｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｉｄｅｓ）法直接测定脂氢过氧化物（ＬＯＯＨ）,观察了低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰过程中ＬＯＯＨ变化的动力学,研究了抗氧化剂ｐｒｏｂｕｃｏｌ、ＢＨＴ、ＶＥ、ＶＣ和β－胡萝卜素对ＬＤＬ氧化修饰的抑制作用,并比较了它们抑制能力的大小。结果显示：ＬＤＬ氧化修饰过程中ＬＯＯＨ的变化呈现三个时相：第一为延迟期,ＬＯＯＨ几乎没有变化;第二为扩增期,ＬＯＯＨ急剧增加;第三为降解期,ＬＯＯＨ达到最大值并开始出现下降趋势。抗氧化剂可以使延迟期的时间延长,延长的时间长短与抗氧化剂的浓度成正比。以ＶＥ或ＶＣ为标准,求出不同浓度各种抗氧化剂延长延迟期的时间及其相应的ＶＥ或ＶＣ浓度,计算出其浓度与相对的ＶＥ或ＶＣ间的倍数,通过比较倍数的大小,得出其抑制ＬＤＬ氧化修饰能力的大小顺序为：ＢＨＴ＞Ｐｒｏｂｕｃｏｌ＞ＶＥ＞ＶＣ＞β－胡萝卜素。     

氧化修饰与丙二醛修饰的低密度脂蛋白对巨噬细胞高密度脂蛋白结合量及胆固醇酯聚集的影响

本文用Cu~(2+)(引发氧化修饰)和脂质过氧化降解产物丙二醛(MDA)对低密度脂蛋白(LDL)进行修饰,观察了两种修饰的LDL对巨噬细胞高密度脂蛋白_3(HDL_3)结合量及细胞内胆固醇酯聚集的影响。结果说明:1.Cu~(2+)和MDA修饰的LDL都可使巨噬细胞HDL_3结合量下降,细胞内脂质过氧化物(LPO)含量升高,但当处理细胞在含10％无脂血清(LPDS)培养液中继续培养时,由MDA修饰的LDL(MDA-LDL)导致的HDL_3结合量降低又有一定的恢复,细胞内LPO含量不再升高,而Cu~(2+)修饰的LDL(Cu~(2+)-LDL)处理的细胞继续培养时,HDL_3结合量则继续下降,细胞LPO含量则继续升高。2.由Cu~(2+)-LDL导致的巨噬细胞HDL_3结合量下降与细胞LPO含量升高之间呈负相关(r=-0.81,P<0.01)。3.MDA-LDL和Cu~(2+)-LDL都可造成巨噬细胞胆固醇酯聚集,但MDA-LDL造成的胆固醇酯可被HDL_3大量清除而Cu~(2+)-LDL造成的胆固醇酯聚集则不能。     

磷脂酰丝氨酸外翻和磷脂氧化在凋亡细胞被吞噬细胞清除过程中的协作效应

为探讨磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)外翻和磷脂氧化在凋亡细胞被吞噬细胞清除中的作用,用脂质体整合的方法将不同的磷脂整合到红细胞上或用N-乙酰马来酰胺(N-ethylmaleimide,NEM)预处理红细胞然后整合磷脂,制备含不同凋亡信号的红细胞模型,测定巨噬细胞对整合不同磷脂信号红细胞的结合率和吞噬率。结果表明,单独整合PS或用NEM处理造成PS外翻,可显著性提高巨噬细胞对红细胞的结合率,但对吞噬率没有影响;同时整合PS和氧化磷脂(氧化PS或氧化磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC)),或用NEM处理造成PS外翻后再整合氧化PS或氧化PC,不仅可显著提高巨噬细胞对红细胞的结合率,而且可显著性提高吞噬率。这些结果提示PS外翻可能参与了巨噬细胞对凋亡细胞的结合,而磷脂氧化可能启动了巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬,二者协作才可能完成巨噬细胞对凋亡细胞的清除。