游离DNA研究进展及标准化的必要性

游离DNA (cell free DNA,cfDNA)作为一种新型分子标志物在疾病预测、肿瘤防治等方面的作用日益突出.但在实现其广泛的临床应用前仍存在诸多障碍,主要是cfDNA相关的标准较少,导致目前的研究报道缺乏可比性,检测结果缺乏稳定的可重复性,从而降低了临床应用的可靠性.本综述集中阐述了近年来cfDNA的相关研究进展,包括cfDNA的样本来源、样本保存、样本提取、定性定量检测和应用,并分析比较了cfDNA研究的各个环节采用的方法及其优缺点,对其中存在的问题进行了剖析和总结,指明了cfDNA相关标准制定的迫切性.     

毛囊来源的神经嵴干细胞修复大鼠坐骨神经缺损

毛囊来源的神经嵴干细胞(Epidermal Neural Crest Stem Cell,EPI-NCSC)由于取材方便,具有多种分化潜能,是一种具有良好应用前景的组织工程种子细胞。目前,在神经损伤修复领域中,EPI-NCSC主要被应用于脊髓损伤的修复。为了探讨EPI-NCSC对周围神经缺损的修复作用,对原代培养的GFP-SD大鼠来源的EPI-NCSC的体外性质进行了考察,并以其为种子细胞,将其等量与细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)混合后,预置入聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(Poly lactic acid co glycolic acid copolymer,PLGA)导管中,同时,以等量的达尔伯克(氏)改良伊格尔(氏)培养基(Dulbecco's Modified Eagle's medium,DMEM)代替EPI-NCSC作为对照,以用于修复大鼠坐骨神经10 mm距离的缺失。噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色分析结果显示,EPI-NCSC在PLGA膜上的初期粘附率为89.7%。在第1、3、5、7天细胞相对增殖率分别为89.3%、87.6%、85.6%和96.6%。细胞周期与DNA倍体分析表明,与PLGA共培养的EPI-NCSC与单独培养的EPI-NCSC相比较,二者的细胞周期变化趋势相同,增殖指数变化趋势也相同。在神经导管移植4周,术部实现了组织学水平的修复。大鼠手术一侧后肢感觉功能有所恢复,坐骨神经指数有所提高。研究结果表明,在PLGA导管中预置EPI-NCSC,有望实现较好的周围神经缺损的修复效果。     

HER2基因组DNA标准物质互通性研究

采用实验室建立的数字PCR方法 (ddPCR)和荧光定量PCR (qPCR)方法研究HER2基因组DNA标准物质的互通性,评价HER2基因组DNA标准物质与临床样本的互通性,为临床实验室检测提供具有互通性的可溯源标准物质.将研制的5个水平标准物质随机穿插于29例临床样本间,使用ddPCR方法与qPCR方法同时进行检测.参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)指南文件EP30和中华人民共和国卫生行业标准基质效应与互通性评估指南WS/T356-2011的推荐,采用Deming回归法评价标准物质的互通性.结果显示,5种标准物质与临床样本之间具有良好的互通性,可以用于临床实验室对HER2基因拷贝数变异检测方法的方法验证和质量控制.     

鸡公山自然保护区蝶类多样性及其影响因素

2019年4-10月,在鸡公山自然保护区的核心区和实验区内不同生境、不同人为干扰程度的区域选取6条样线,对蝶类群落进行了观测研究.共记录蝴蝶3431头,隶属于10科79属127种;其中蛱蝶科Nymphalidae的种类数最多,共23属36种;粉蝶科Pieridae和灰蝶科Lycaenidae为保护区优势科,菜粉蝶Pieris rapae(Linnaeus)、蓝灰蝶Everes argiades (Pallas)和苎麻珍蝶Acraea issoria (Hübner)为保护区优势种.保护区内蝶类群落的种-多度曲线呈正态分布模式,表明区内生态环境整体情况较好.不同样线中蝶类群落的种类、数量及多样性指标存在明显差异,无人类活动的样线Ⅴ和Ⅵ中蝶类群落的各项多样性指数均优于另外4条样线;适度人为干扰的样线Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ中蝶类群落的各项指数均大于旅游景区样线Ⅲ的,且样线Ⅲ的优势度指数明显大于其他样线.各样线蝶类群落的种类数、个体数以及多样性指数的变化趋势与温度相一致,呈显著正相关关系;而与降雨量无显著相关性.由此可见,鸡公山保护区现有的旅游规模、森林经理和项目建设对蝶类群落产生了负面影响,但是适度的人类活动能在一定程度上延缓蝶类多样性的降低.     

周围神经组织液对大鼠EPI-NCSCs体外分化的影响

为了探讨周围神经组织环境因素对EPI-NCSCs（epidermalneuralcreststemcells）分化的影响，该文用坐骨神经组织提取液为环境因素，对体外培养的EPI—NCSCs进行分化诱导。以正常培养的EPI—NCSCs为对照组，细胞培养液成分为：DMEM／F12、10％FBS、2％B27、20ng／mLbFGF。在细胞培养液中添加1％周围神经组织液作为实验组。MTT结果显示。周围神经组织液对EPI-NCSCs的活性和增殖无影响；对照组和实验组EPI-NCSCs都呈多种形态。RT-PCR分析显示，在对照组和实验组中EPI．NCSCs均表达GFAP、S-100、β-IIITubulin（Tujl），但在实验组中，这3种蛋白的表达量均高于对照组。免疫组化分析显示，在对照组中，EPI—NCSCs同时表现了雪旺细胞和早期神经元的鉴定特征；在实验组中，EPI—NCSCs没有神经元的鉴定特征，只表达雪旺氏细胞的鉴定特征。这表明，周围神经组织液可以诱导体外培养的EPI-NCSCs向雪旺氏细胞分化。