嗅鞘细胞复合PLGA导管修复周围神经缺损的研究

探讨嗅鞘细胞(OECs)复合聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)导管对大鼠坐骨神经缺损的修复作用。方法:SD大鼠80只,随机分成4组,切除右侧部分神经干造成10mm的神经缺损。OECs PLGA组用充满细胞外基质凝胶和OECs悬液(CM-DiI预标记)的PLGA导管桥接坐骨神经缺损;OECs 硅胶管组用含相同内容物的硅胶管桥接;PLGA组和硅胶管组则分别用充满细胞外基质凝胶和DMEM/F12培养基的PLGA导管和硅胶管桥接。术后每周进行感觉运动功能检测,8周时行腓肠肌湿重恢复率、乙酰胆碱脂酶(AChE)染色、电生理和组织形态学分析等检测,同时移植细胞的两组每周进行细胞示踪观察。结果:移植细胞沿神经纵轴分布;除坐骨神经功能指数(SFI)指标外,OECs PLGA组的各项再生功能指标均优于其它三组。结论:OECs复合PLGA导管能够促进再生神经的成熟和靶组织功能的恢复,二者联合移植是一种有效的周围神经缺损修复方法。     

嗅球成鞘细胞的分离培养与鉴定

目的:探讨一种获取高纯度嗅球成鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)的方法.方法:从新生SD大鼠(3d)嗅球中迅速分离嗅神经层和嗅颗粒层,采用酶消化法分离细胞,差速贴壁法纯化细胞,接种于多聚赖氨酸包被的培养板内培养2d,采用NGFRp75和S100蛋白双标免疫组化、以Hoechst33342复染鉴定OECs的纯度.结果:OECs的纯度为(95.64±2.76)%.结论:本法是一种相对简便易行且经济、稳定、有效的OECs分离方法.     

肢体火器伤复合海水浸泡时骨骼肌组织一氧化氮含量检测及意义

本实验通过检测肢体火器伤复合海水浸泡时骨骼肌组织一氧化氮(Ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ,ＮＯ)含量变化,探讨其在弹道伤骨骼肌组织继发损伤中的作用。1　材料和方法实验采用体重25～3.5ｋｇ健康大白兔14只,雌雄不限,3%戊巴比妥钠耳缘静脉麻醉。以762ｍｍ滑膛枪,发射质量为250ｍｇ,初速600～800ｍ/ｓ的钢珠,射击兔单后肢股部肌肉丰满处,伤后将致伤兔浸入由粗制海盐配制的人工海水(盐度254,ｐＨ8.4,水温21℃)中30ｍｉｎ,出水后更换敷料,静脉输入失血量3～4倍的平衡盐液。实验室温度25℃。伤后6、12、24ｈ分别沿肌肉纤维走向,手术切取距伤道边缘0…     

周围神经组织液对大鼠EPI-NCSCs体外分化的影响

为了探讨周围神经组织环境因素对EPI-NCSCs（epidermalneuralcreststemcells）分化的影响，该文用坐骨神经组织提取液为环境因素，对体外培养的EPI—NCSCs进行分化诱导。以正常培养的EPI—NCSCs为对照组，细胞培养液成分为：DMEM／F12、10％FBS、2％B27、20ng／mLbFGF。在细胞培养液中添加1％周围神经组织液作为实验组。MTT结果显示。周围神经组织液对EPI-NCSCs的活性和增殖无影响；对照组和实验组EPI-NCSCs都呈多种形态。RT-PCR分析显示，在对照组和实验组中EPI．NCSCs均表达GFAP、S-100、β-IIITubulin（Tujl），但在实验组中，这3种蛋白的表达量均高于对照组。免疫组化分析显示，在对照组中，EPI—NCSCs同时表现了雪旺细胞和早期神经元的鉴定特征；在实验组中，EPI—NCSCs没有神经元的鉴定特征，只表达雪旺氏细胞的鉴定特征。这表明，周围神经组织液可以诱导体外培养的EPI-NCSCs向雪旺氏细胞分化。