小麦叶绿体基因组定点整合表达载体的构建

从小麦中分别克隆了包括rbcL基因3′端部分和完整的psaI、ycf4基因的DNA片段.利用克隆到的DNA片段作为同源重组片段、烟草叶绿体16S rRNA基因的启动子Prrn和PsbA基因的终止子PsbA3′控制筛选标记基因aadA和报告基因gfp的转录,构建了小麦叶绿体基因组定点整合表达载体pRAGY. 用该载体转化大肠杆菌,在激光扫描共聚焦显微镜下,检测到了gfp基因成功表达的产物被激发出的强烈的绿色荧光.     

定点整合抗虫基因到油菜叶绿体基因组并获得转基因植株

以基因枪法进行了油菜叶绿体基因组的定点转化,载体pNRAB携带抗壮观霉素的筛选标记基因aadA和抗虫基因cry1Aα10,基因的两侧被添加了可用于同源重组的叶绿体DNA序列,基因枪轰击过的油菜子叶柄经植株再生和壮观霉素筛选,获得了36株抗性植株,PCR检测和Southern杂交显示,其中4株的叶绿体基因组已被转化,外源基因已被定点整合进叶绿体基因组的rps7和ndhB基因之间。用转基因植株的叶片饲喂二龄小菜蛾,1周后幼虫死亡率达33%-47%,存活幼虫的生长明显减慢,转基因油菜的叶片受害较轻。     

植物基因工程表达载体的改进和优化策略

外源基因在转基因植物中表达效率低一直是令相关研究者困扰的一个问题.转基因植物的生物安全性最近在全球范围内开始引起世人的担忧.本文简要介绍了近年来在植物表达载体构建方面所采用的一些新策略,这些策略有助于增强外源基因的表达水平、提高生物工程体的安全性。 Abstract:The low expression level of foreign genes in transgenic plants is a puzzling question for researchers in plant genetic engineering.The biosafety concern is now causing a growing public wariness of transgenic plants around the world.This article reviews the new strategies currently used in construction of plant expression vector for plant genetic engineering.These strategies are important for obtaining better expression of foreign genes and developing safer transgenic plants.     

植物抗虫基因工程研究进展

植物抗虫基因工程为防治农业害虫提供了一条崭新途径。本文对植物抗虫基因工程近年来所取得的某些研究进展,包括目前已发现和利用的抗虫基因、提高抗虫基因在植物体内表达的方法以及防止或延缓害虫产生抗性的策略等方面进行了综合评述,并对植物抗虫基因工程中有待解决的问题和发展前提提出了自己的看法。     

小麦不同类型愈伤组织及其悬浮系的原生质体培养和植株再生

小麦不同类型愈伤组织及其悬浮系的原生质体培养和植株再生侯丙凯陈际江（山东大学生物系,济南２５０１００）宋协志（莱阳农学院,莱阳２６５２００）ＰＬＡＮＴＲＥＧＥＮＥＲＡＴＩＯＮＦＲＯＭＰＲＯＴＯＰＬＡＳＴＳＯＦＤＩＦＦＥＲＥＮＴＴＹＰＥＳＯＦＷＨＥＡ...     

小麦6B染色体微切割及其不同片段的DNA文库构建

用Nd∶YAG激光微束将处于有丝分裂中期的小麦(Triticum aestivum L.)6B染色体微切割为四段,并用微细玻璃针将每个片段分别回收。将分离的染色体片段DNA用Sau3A接头介导的多聚酶链式反应(LA-PCR)分别扩增。Southern杂交证明4个特定区域的DNA确实来自于小麦基因组。用一系列(42对引物)位于6B染色体和其他染色体上的微卫星序列对微切割的染色体片段的PCR产物进行了验证。结果表明,获得的染色体片段的PCR产物来自于小麦6B染色体。将6B染色体4个片段的第二轮PCR产物克隆到pGEMT-vector中,建立了4个染色体特定区域的基因组文库,命名为R1、R2、R3和R4,分别包含2.1×10~5、2.74×10~5、2.45×10~5和2.93×10~5个重组子克隆。每个文库均随机挑选150个克隆进行质粒的小量制备和酶切验证。结果显示:插入片段大小在300～1800 bp之间,平均大小为820～870 bp,其中43％～48％的克隆为低/单拷贝序列,42％～47％为中/高拷贝序列。本研究为详细分析植物单染色体的不同片段的分子遗传学研究提供了基础。     

低温处理对小麦长期培养愈伤组织分化能力的影响（简报）

小麦幼穗愈伤组织继代6个月后分化能力大大降低．5C低温处理10d后则明显提高。低温处理后过氧化物酶同工酶的第8条酶带明显减弱,而第9条酶带则明显增强,显示其与分化可能有关。     

植物抗病毒基因工程的某些现状

植物抗病毒基因工程的某些现状侯丙凯于惠敏（山东大学生物系,济南２５０１００）（山东教育学院生化系,济南２５００１３）ＣＵＲＲＥＮＴＲＥＳＥＡＲＣＨＯＮＴＲＡＮＳＧＥＮＩＣＰＬＡＮＴＳＦＯＲＣＯＮＦＥＲＲＩＮＧＶＩＲＵＳＴＯＬＥＲＡＮＣＥ￥ＨｏｕＢｉｎ...