癌组织中的遗传不稳定性的RAPD分析(简报)

肿瘤仍然是导致人类死亡的重要原因,由于缺乏深刻了解癌症的发生机制,尽管在过去25年中肿瘤的诊断和治疗都取得很大的进展,但肿瘤病人的存活率并没有显著的提高。目前有很多癌基因和抑癌基因如P16、P53、P73、ras、DCC和RB等     

大鼠肝和BERH—2肝癌5Kb BamHI DNA片段的克隆及其转录研究

本文克隆了大鼠肝和肝癌BERH-2 DNA的分子大小约为5kb的BamHI片段(Bam5族重复顺序)。从筛选出的克隆中取一个来自肝癌细胞基因组DNA的克隆片段H5 B-1和来自肝细胞基因组DNA克隆片段L5 B-4做进一步分析研究。采用RNA点杂交法对L5 B-4DNA片段的转录产物在细胞核、质间分布的研究结果表明:L5 B-4 DNA片段转录产物在肝癌细胞的总核RNA,poly A~ 核RNA和poly A~-核RNA中的相对量,比正常肝细胞的相应RNA组分低;在肝癌细胞的总胞质RNA和多聚核蛋白体RNA中的相对量,则比正常肝细胞的相应RNA组分高;其转录产物在poly A~ 核RNA中的相对含量高于其他细胞RNA组分,几乎不存在于rRNA中。当用大鼠肝和肝癌总RNA进行RNA点杂交比较时其转录产物在肝癌细胞中的相对含量则高于正常肝。结果提示,L5 B-4 DNA片段的转录产物从细胞核向细胞质内转运,肝癌细胞明显高于正常肝细胞。以H5 B-1 DNA片段代替L5 B-4 DNA片段进行RNA点杂交,得近似的杂交放射自显影图谱。     

小鼠鼻咽部组织相对特异基因调控区的克隆与分析

通过RT－PCR证实PLUNC基因在小鼠鼻咽部具有相对特异性表达。进一步用染色体步移的方法克隆该基因5′端旁侧序列847bp,网上分析结果提示此序列具有调控活性,体外报道基因的研究亦证实这一结果。进一步的研究表明,其核心调控区位于转录起始位点上游200bp之内。这一工作将为构建鼻咽癌转基因动物提供良好的前提。     

采用原位杂交及电镜检测CR2转染小鼠细胞的EB病毒感染

EB病毒不能感染小鼠是因为小鼠CR2受体构像与人的不同,通过对小鼠CR2受体进行定点空变,然后将野生型和突变型小鼠CR2／1（MCR2／1）及人CR2（hCR2）用基因转移技术导入小鼠鼻咽上皮细胞系（TMNE）进行表达,观察转染阳性细胞是否具有结合EB病毒的能力,EBER－1杂交结果显示,只有转染hCR2和空变型MCR2（mtMCR2)的TMNE细胞可以感染EB病毒,但是前感染EB病毒的阳性率比后高的高得多。电镜结果也进一步证实EB病毒可以感染这两种细胞,这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。     

新型润滑油生物降解性及其分析方法改进探讨

运用生物方法研究新型蓖麻油基润滑油的可降解性.通过反复实验,建立了该润滑油生物降解的基本分析方法,并与常规分析方法进行了比较.结果表明,此分析方法准确可靠,科学逻辑性更严密,且重复性好.利用筛选的最佳细菌5-11-4混合菌株,在最适降解条件下,采用该分析方法,微生物对该润滑油的降解率达到88.37%,比常规分析方法高约10.25%左右(常规分析方法的降解率约为78.12%),体现了两种分析方法之间的差异.     

牛布鲁氏菌A19突变株的构建及在BALB/c鼠中的免疫保护评估北大核心CSCD

【目的】构建牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株并免疫BALB/c鼠,初步评估了其免疫保护效果。【方法】应用PCR方法扩增A19疫苗株VirB12基因的上下游同源臂序列,构建重组质粒pBK-CMV-SacBVirB12,将该质粒电击转化至布鲁氏菌A19感受态细胞中,筛选得到布鲁氏菌疫苗株A19的VirB12基因缺失株。以A19疫苗株为参照,应用A19-ΔVirB12疫苗接种BALB/c小鼠,免疫45d后布鲁氏菌2308强毒株攻毒,攻毒15d后取BALB/c鼠的脾脏进行克脾指数测定和病理组织学检测。Western-blotting鉴定VirB12蛋白的免疫反应性。【结果】构建了牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株,小鼠免疫攻毒后15d,A19-ΔVirB12免疫组和A19免疫组的克脾指数与对照组之间有显著性差异(P<0.05)。A19免疫组与A19-ΔVirB12免疫组之间克脾指数差异不显著(P>0.05)。Western blotting实验表明VirB12蛋白具有免疫反应性。【结论】牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株与亲本株A19免疫保护性无明显差异,通过血清学方法可区分疫苗免疫与野生型牛种布鲁氏菌(Brucella abortus)感染动物,具备作为标记疫苗的潜力。     

人胚鼻咽组织基因表达谱

以水囊引产５、６、７、８个月人胚胎鼻咽组织总ＲＮＡ逆转录标记ｃＤＮＡ探针,与代表５８８个基因的Ａｔｌａｓ＾ＴＭｃＤＮＡ阵列进行杂交,观察了这些基因在不同发育时期内的表达差异。结果发现与细胞分裂增殖及细胞生长相关的基因明显高表达,不同胎龄存在多个表达水平不同的基因及同一基因在不同时期表达水平也不一样,如早期生长反应蛋白１（ｅａｒｌｙ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｐｒｏｔｅｉｎ１）基因ＥＧＲＰ１在     

人鼻咽与鼻咽癌及肺癌基因表达谱差异的研究

研究鼻咽癌、肺癌与正常鼻咽组织基因表达谱差异及筛选鼻咽癌相关基因,采用α- ³²P逆转录标记组织总RNA,将cDNA探针与有5 184个基因或表达序列标签EST(expression sequence tag)的高密度cDNA微阵列GF200杂交,软件分析表达谱差异.结果发现三者均呈低表达为主的表达谱,密度值在200以上的基因及EST在鼻咽癌有110个,肺癌134个而鼻咽组织有158个;5个EST在鼻咽高表达但鼻咽癌低表达,3个EST在鼻咽癌高表达但正常鼻咽低表达.结果表明鼻咽癌与正常鼻咽及肺癌组织存在差异表达基因,可能还有新基因在鼻咽癌发生中起作用;采用高密度cDNA微阵列是一种筛选差异表达基因的快速有效方法.     

中小型公立医院卫生人力资源配置存在问题与对策

随着医改的不断深入,中小型公立医院卫生人力资源配置面临着新的发展机遇和挑战,这就需要医院管理者对中小型公立医院的卫生人力资源进行深入思考。针对中小型公立医院卫生人力资源管理存在的诸多问题,从更新理念、人力规划、人才培养、构建团队、考核机制、契约机制以及医院文化等方面进行探讨,提出了卫生人力资源管理新策略。     

新型润滑油生物降解性及其分析方法改进探讨

运用生物方法研究新型蓖麻油基润滑油的可降解性。通过反复实验, 建立了该润滑油生物降解的基本分析方法, 并与常规分析方法进行了比较。结果表明, 此分析方法准确可靠, 科学逻辑性更严密, 且重复性好。利用筛选的最佳细菌5-11-4混合菌株, 在最适降解条件下, 采用该分析方法, 微生物对该润滑油的降解率达到88.37%, 比常规分析方法高约10.25%左右(常规分析方法的降解率约为78.12%), 体现了两种分析方法之间的差异。