金属离子和氨基酸对Eupenicillium sp.E-UN41生物合成咪唑立宾的影响

为考察金属离子和氨基酸对Eupenicillium sp.E-UN41菌体生长及其产生的次级代谢产物咪唑立宾(MZ)的生物合成影响,在培养基中添加了无机盐和氨基酸.结果表明在发酵培养基中添加适量的镁、钠、锰、钾、钙等金属离子可提高咪唑立宾产量5％～15％,添加1.0％L-组氨酸,MZ产量提高94％.添加适宜的L-天门冬氨酸和L-甘氨酸对产MZ亦有促进作用,而L-精氨酸明显抑制Eupenicillium sp.E-UN41生物合成MZ.本研究为咪唑立宾发酵的产业化奠定了基础.     

UV与NTG复合诱变选育咪唑立宾高产菌

为选育咪唑立宾的高产菌株,对咪唑立宾产生菌Eupenicillum sp.E-0509-2的孢子分别进行了紫外线照射(UV)、亚硝基胍(NTG)和UV+NTG复合诱变处理筛选突变株。结果表明试验所确定的咪唑立宾产生菌的孢子诱变适宜条件为:将孢子悬液在电磁搅拌下,经紫外线照射处理60s后,以3.0g/L NTG处理20min。经发酵筛选试验,获得了一株遗传性状稳定、高产咪唑立宾的诱变菌株Eupenicillum sp.E-UN41,其咪唑立宾产量较出发菌株提高13倍。     

Eupenicillium sp.E-UN41产活性物质的分离与结构分析

在筛选微生物来源代谢产物的过程中,分离得到一株正青霉Eupenicillium sp.E-UN41,发酵液经离子交换树脂和葡聚糖凝胶等方法分离得到化合物UN41A.通过核磁共振波谱和X-单晶衍射进行该化合物的分子构型和晶体结构分析,确定其为4-氨甲酰基-1-β-D-呋喃核糖-5-羟基咪唑,与咪唑立宾同质.晶体属斜方晶系,空间群P212121,晶胞参数a=7.4897(7),b=11.3801 (15),c=14.0090(13)(A),V=1194.0(2) (A)3,Z=4,Dc=1.553g/m3,F(000) =592.晶体结构分析表明,分子中存在咪唑环共平面.     

微波诱变结合抗性突变筛选放线菌素D高产菌株

采用微波结合链霉素抗性筛选法选育放线菌素D的高产菌株。通过考察链霉素对Streptomyces rubiginosohelvolus FIM-N31菌株孢子生长情况的影响确定链霉素致死浓度,出发菌株FIM-N31的孢子经微波辐照处理后,涂布在含链霉素致死浓度（50 μg/mL）的培养基平板上培养,获得了大量的链霉素抗性基因突变株。摇瓶发酵筛选突变株,结果获得一株遗传性状稳定的放线菌素D高产菌Str186,其产放线菌素D的能力比出发菌株提高了8倍以上。     

布雷菲尔德菌素A高产菌的选育和发酵条件优化

研究了选育布雷菲尔德茵素A(BFA)高产茵和优化发酵条件.采用紫外线照射(UV)、亚硝基胍(NTG)和UV+NTG复合诱变处理BFA产生茵Eupenicillum sp.E-0506筛选突变株后进一步发酵选育;采用单因素筛选结合正交试验考察摇瓶装液量、转速等因素的影响.试验所确定的BFA产生茵的孢子诱变适宜条件为:孢子...     

Streptomyces sp.FIM-16-06产他克莫司摇瓶发酵条件的优化

采用单因素试验和正交试验研究发酵培养基组成,优化Streptomyces sp. FIM-16-06产他克莫司的发酵条件,探讨摇瓶发酵的主要影响因子初始p H、装液量、转速等发酵参数的影响。确定了适宜的发酵培养基和发酵参数:6. 0%玉米淀粉、2. 0%黄豆粉、2. 0%葡萄糖和0. 5%玉米浆,初始pH 7. 5,装液量50 m L/500 m L三角瓶,种子菌龄48 h,接种量10%,摇床转速250 r/min,发酵温度27℃,发酵周期7 d。优化后的发酵水平较原生产工艺提高60%以上。他克莫司的优化发酵工艺为其工业化生产奠定了基础。     

UV+MW复合诱变结合抗性突变筛选替考拉宁高产菌株

采用微波照射(MW)、紫外照射(UV)和MW+UV处理技术,对替考拉宁产生菌AT-92的孢子进行诱变,诱变处理的孢子悬液涂布在含替考拉宁致死浓度的培养基平板上培养,获得替考拉宁抗性突变株,通过摇瓶发酵对替考拉宁抗性基因突变株进行筛选,获得一株遗传性状稳定的替考拉宁高产菌AT 92-52-37菌株,其产替考拉宁能力比出发菌株的提高5倍。