鹰嘴豆种子胰蛋白酶抑制剂的分离纯化与鉴定

为了寻找具有药物作用的天然胰蛋白酶抑制物,采用硫酸铵分级沉淀、离子交换层析(DEAE-纤维素52)及Sephadex G-100凝胶层析等方法, 从鹰嘴豆种子中分离出一种鹰嘴豆胰蛋白酶抑制剂（CPTI）. 研究表明：CPTI对胰蛋白酶有较强的抑制作用,抑制率达80%,而对胰凝乳蛋白酶抑制作用较弱,抑制率为32%, 对胃蛋白酶、木瓜蛋白酶及枯草杆菌蛋白酶均无抑制作用; 用SDS-PAGE测得CPTI近似分子质量为25.7 kD; CPTI具有较高的热稳定性,在100 ℃下加热60 min,对胰蛋白酶活性仍保持78%抑制率; Lineveaer-Burk作图得知该抑制剂属竞争性抑制类型. 动力学测定显示,来自鹰嘴豆中的CPTI对胰蛋白酶的抑制作用常数(Ki)为3.99×10^-7 mol/L.     

AdTGF-β1223/225气管内注射制备大鼠肺间质纤维化动物模型

目的观察TGF-β1基因过表达诱发大鼠肺间质纤维化动物模型的组织病理学变化.方法成年健康SD大鼠30只,随机分为空白对照组10只,模型组10只和空载体对照组10只,其中对模型组大鼠气管内一次性注射携带TGF-β1基因腺病毒载体(AdTGF-β1 223/225,1×109 pfu,0.4 mL),空白对照组大鼠气管内注射等量的生理盐水,空载体对照组大鼠气管内注射等量的腺病毒空载体.结果一次性肺气管内注射 AdTGF-β1 223/225可造成肺急性炎症和肺间质纤维化,而对照(腺病毒空载体)并不引起相应的变化.结论肺组织局部分泌的细胞因子TGF-β1可以单独诱发肺间质纤维化.     

结缔组织生长因子与肾脏纤维化

结缔组织生长因子属于CNN家族,是TGF-β的下游因子,它的表达受到TGF-β强烈诱导。结缔组织生长因子介导了FN、ColⅠ、ColⅢ、ColⅣ等mRNA及蛋白的表达,在纤维化的过程中可能起着重要的作用。     

裂殖酵母Cnb1参与胞质分裂过程

丝/苏氨酸特异性钙调磷酸酶(Calcineurin, CN)是一种在真核生物中广泛存在的蛋白, 是参与转录调控的重要分子。裂殖酵母中的CN是由催化亚基Ppb1和调节亚基Cnb1组成的异源二聚体。文章报道了裂殖酵母中cnb1+的缺失引起细胞生长速度缓慢, 产生多隔膜现象, 胞质分裂受阻滞。胞质分裂过程中, Cnb1与Ppb1组成CN复合物, 与收缩环在分裂平面上共定位, 并与收缩环一起收缩。cnb1Δ菌株的隔膜成熟过程存在缺陷, 微管出现纵穿隔膜的现象。上述结果说明Cnb1可能参与隔膜的成熟过程。此外, 还检测了cnb1D菌株中胞裂蛋白的信号。胞裂蛋白包括Spn1、Spn2、Spn3和Spn4, 它们是引导隔膜降解的重要分子。结果显示, 在cnb1D菌株中, 80%左右的细胞在隔膜处缺失Spn2和Spn3的信号, 20%左右的细胞缺失Spn1和Spn4的信号。由于胞裂蛋白的蛋白表达量在cnb1D中没有降低, 因此胞裂蛋白信号的消失不是转录缺陷引起的, 这暗示Cnb1可能采用了不依赖转录的方式来调控胞裂蛋白环的稳定性。以上结果提示, Cnb1可能通过影响隔膜的成熟及胞裂蛋白环的稳定性参与调节裂殖酵母的胞质分裂过程。     

用SILAC技术研究感染H5N1禽流感病毒后A549肺癌细胞蛋白质组的表达变化

目的：鉴定高致病性H5N1禽流感病毒感染A549肺癌细胞后,细胞蛋白质组的表达变化,并鉴定特异分子通路的改变及其涉及的关键蛋白质分子。方法：利用稳定同位素标记氨基酸技术（SILAC）标记A549细胞,得到“重标”或“轻标”的A549细胞;“重标”细胞感染高致病性F15N1禽流感病毒24h后提取细胞总蛋白,与从未感染病毒的“轻标”细胞中提取的总蛋白等量混合,酶解肽段,经正交反相色谱分离后用质谱鉴定,对数据进行定性和定量分析。结果：共鉴定到3504个蛋白质,有定量信息的蛋白质为2469个,病毒感染后表达量升高的蛋白质为72个,表达量降低的蛋白质为66个,其中包括参与多个分子调控途径如RNA剪接体、干扰素诱导通路、泛素化通路、胰岛素通路等的蛋白质。结论：建立了利用SILAC技术研究宿主细胞一病毒相互作用的方法,发现了高致病性H5N1禽流感病毒感染宿主细胞相关的关键蛋白质,为探索H5N1病毒致病的分子机理提供了理论基础。     

转化生长因子-β与器官纤维化

本文综述了转化生长因子-β(TCF-β)的生物学效应、信号转导途径、影响其效应的因素、TGF-β在器官纤维化中的作用以及围绕TGF-β信号转导途径所进行的抗纤维化治疗的最新进展。     

报道基因技术及其应用

报道基因技术被广泛用于监测与信号转导及基因表达有关的细胞内事件。将基因调控元件与报道基因相连并转染到细胞内,报道基因表达产物可以反映细胞内与基因表达有关的信号转导事件。本文主要综述了报道基因的种类及其检测方法、以及报道基因载体的特点和报道基因技术的应用。     

三七总皂苷对肺纤维化小鼠血清中Ⅳ-C型胶原透明质酸的干预作用

目的:研究三七总皂苷对小鼠肺纤维化血清中Ⅳ-C型胶原及透明质酸的的影响.方法:C57BL/6雄性小鼠60只,分为三七总皂苷高、中、低剂量组,强的松组.模型组,假手术组,每组10只.除假手术组外其余各组小鼠气管内一次性滴注盐酸博莱霉素,假手术组小鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水.造模后第2天开始给药,持续到处死动物的前一天.三七总皂苷高、中、低剂量组分别为120、60、30mg/kg/d,强的松组为0.56mg/kg,假手术组、模型组分别灌服等体积的生理盐水.于28d后处死,观察比较各组小鼠血清中Ⅳ-C型胶原及透明质酸的含量.结果:模型组小鼠肺组织中Ⅳ-C型胶原、透明质酸含量均明显高于假手术组(P<0.01),与模型组相比,三七总皂苷高中低剂量组均能降低小鼠血清中Ⅳ-C型胶原、透明质酸舍量,其中中、高剂量组的降低作用较为显著(P<0.01).结论:三七总皂苷可通过降低肺纤维化小鼠细胞外基质含量而发挥治疗肺纤维化作用.     

探究临床检验ABO血型鉴定的质量控制措施

目的:探究与分析ABO血型鉴定的影响因素,旨在制定积极有效的质量控制方法。方法:选取300名健康人员作为研究对象,采取玻片法及卡式法对其血型进行鉴定。结果:对于同一人员进行玻片法及卡式法得过的鉴定结果存在一定的不符,但差异不具有统计学意义。结论:输血安全作为临床上一类至关重要的问题,在血型鉴定的过程中常易收到多种因素的影响,应综合考虑并完善质量控制措施。     

化疗损伤性卵巢功能早衰小鼠动物模型的研究

目的探索建立化疗损伤性卵巢功能早衰动物模型的适宜方法及最佳时间。方法以70只ICR雌性小鼠为研究对象,腹腔连续注射顺铂7~14 d,观察不同剂量和时间条件下顺铂对小鼠的体重、卵巢功能、肝肾毒性及卵巢组织抗氧化系统各指标的变化。结果顺铂可引起小鼠体重明显下降,卵巢功能减退,出现肝肾毒性,并可引起卵巢抗氧化及氧化损伤指标的异常,与对照组比较均有明显差异。结论3.0~4.0 mg/(kg.bw)的顺铂作用7 d后即可引起小鼠出现明显的卵巢功能衰退、肝肾损伤,氧化损伤是顺铂产生其毒性作用的可能机制之一。该模型的生殖内分泌和病理组织学变化,与人类化疗损伤性卵巢功能早衰病变过程相似。