经尿道2微米激光切除术与电切术治疗浅表性膀胱癌的疗效观察

目的:比较经尿道2微米激光切除术与电切术治疗浅表性膀胱癌的临床疗效。方法:按照随机数字表法将2014年1月-2015年1月我院收治的浅表性膀胱癌患者分为两组,观察组(61例)行经尿道2微米激光切除手术,对照组(46例)行电切术,比较两组的手术效果、治疗前后的炎症因子水平及并发症。结果:观察组手术时间、导尿管留置时间、住院时间及术中出血量少于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后两组患者IL-6、IL-10以及TNF-α水平均较治疗前升高,但是观察组治疗后的IL-6及TNF-α水平低于对照组,IL-10水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组患者术后均发生不同程度的并发症,其中观察组膀胱穿孔、闭孔神经反射的发生率为3.28%、1.64%,分别低于对照组的17.39%、13.04%,差异有统计学意义(P0.05)。结论:浅表性膀胱癌采用经尿道2微米激光切除术治疗具有明显的临床手术效果,减少术后并发症,同时对患者炎症因子的影响较小,临床有重要的参考价值。     

整合素α6在不同转移潜能膀胱癌细胞中的定量差异表达分析

整合素是一类跨膜糖蛋白,能够与细胞外基质结合参与许多生物学过程,尤其是与癌细胞的增殖、迁移等密切相关.目前在研究膀胱癌的发生发展过程中,对整合素的关注较少.本研究利用稳定同位素标记技术(SILAC)蛋白质定量技术结合质谱分析技术,对3株不同转移潜能的膀胱癌细胞株中的蛋白质组差异表达进行研究,并通过蛋白质免疫印迹技术、实时荧光定量PCR、细胞免疫荧光照相和流式细胞术等多种技术进行验证.同时使用临床组织基因芯片结果对比分析表明,与正常膀胱表皮细胞HCV29相比,整合素α6在膀胱癌细胞中表达量均有明显的上升,且在非侵染性膀胱癌KK47细胞中的表达量最高,侵染性的膀胱癌YTS1细胞中表达量次之.这一结果说明整合素α6与膀胱癌的发展具有密切关系,并为深入研究整合素α6在膀胱癌发生发展中的作用提供了前期基础.     

LOXL4mRNA在膀胱癌中的表达及意义

膀胱癌是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤,但其发生、发展的机制不清楚.通过采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测58例膀胱癌组织、12例时照膀胱组织LOXL4(lysyl oxidase-like protein 4)mRNA的表达及其与临床分期、病理分级的关系.研究发现,58例膀胱癌组织中,LOXIA mRNA阳性表达率为24.1%(14/58),对照膀胱正常组织中LOXL4 mRNA阳性表达率为100%(12/12),膀胱癌组LOXL4 mRNA阳性表达率明显低于对照组(P<0.05).在膀胱癌组织不同临床分期中,Ta～1期阳性表达率为40%(10/25),T2～4期阳性表达率为12.1%(4/33),T2-4期膀胱癌组LOXL4 mRNA阳性表达率低于Ta～1期膀胱癌(P<0.05).不同病理分级膀胱癌组织中,G1阳性表达率为42.9%(9/21),G2～3阳性表达率为13.5%(5,37),G2～3膀胱癌组LOXIA mRNA阳性表达率低于G1膀胱癌(P<0.05).结果表明膀胱癌组LOXL4 mRNA表达水平明显低于正常对照组,LOXL4 mRNA的表达与膀胱癌的临床分期和病理分级呈负相关.提示LOXL4失表达、低表达可能是膀胱癌发生、发展的关键因素之一.     

羧基化介孔二氧化硅纳米颗粒递送PD-L1抑制剂治疗膀胱癌的作用研究

摘要 目的：构建羧基化介孔二氧化硅纳米颗粒（COOH-MSN）递送PD-L1抑制剂治疗膀胱癌。方法：构建负载PD-L1抑制剂的COOH-MSNs，透射电镜检测纳米颗粒的特征，zeta电位分析仪检测纳米颗粒的电位变化；流式细胞术检测血液中T细胞和CD8⁺T细胞的比例；MTT实验检测细胞增殖；构建小鼠荷瘤模型，HE染色检测基本的病理学变化，免疫组化检测ki-67的表达。结果：透射电镜结果显示纳米颗粒呈圆形，直径约为100 nm；COOH-MSNs表面带负电荷，BSA呈强负电性，BSA包封后纳米材料整体负电荷增强；纳米材料可显著提高T细胞和CD8⁺T细胞的比例，并进一步抑制膀胱癌细胞的增殖；动物实验结果显示纳米材料可抑制移植瘤的生长，且移植瘤内淋巴细胞的数量显著升高；免疫组化结果显示相对于PD-L1抑制剂组，纳米材料组ki-67增殖指数显著减低；HE染色结果显示PD-L1抑制剂组肾组织内可观察到血管充血、扩张和较多炎细胞浸润，而纳米材料组肾组织损伤程度显著降低。结论：我们构建了一种负载有PD-L1抑制剂的COOH-MSNs，可有效激活抗肿瘤免疫反应，并降低对正常器官的损伤。     

探寻肝再生磷酸酶3在膀胱癌细胞T24中的作用

目的：已经有研究证明肝再生磷酸酶3（PhosphataseofRegeneratingLiver-3,PRL-3）在消化道肿瘤的发生发展过程中起到重要作用,但其在膀胱癌中发挥何种作用尚不清楚,本次研究主要探寻PRL-3在膀胱癌细胞T24中作用,以求为膀胱癌的治疗提供新思路。方法：采用siRNA干涉的方法下调T24中PRL-3蛋白表达水平,通过westernblot方法检测干涉效果,绘制细胞生长曲线、构建裸鼠种植瘤模型,检测PRL-3下调对细胞体外及体内增殖的影响。结果：我们所设计的siRNA能够下调PRL-3在A498细胞中的表达（F=7．26,P〈0．05）,细胞生长曲线显示下调PRL-3能够抑制细胞的增殖,这种作用从干涉后的第60h开始,随时间增加作用愈加明显（F≥8．35,P〈0．05）;动物实验表明,siRNA下调PRL-3能够抑制T24细胞在活体内的增殖,从干涉后第21天开始这种作用开始体现出来（F≥10．46,P〈0．05）,并且干涉组的肿瘤肿瘤明显低于两个对照组（F=13．63,P〈0．05）。结论：我们构建的siRNA能够在T24细胞中实现对PRL．3蛋白的下调,siRNA介导的PRL-3蛋白下调能够明显抑制T24细胞在活体外及活体内的增殖,这初步证明PRL-3在膀胱癌中发挥重要的作用。随着我们对PRL-3分子进一步深入的了解,揭示其发挥作用的具体机制,PRL-3很可能成为膀胱癌基因治疗的新靶点。     

高强度聚焦超声对人膀胱癌细胞的生长抑制作用及机理研究

研究高强度聚焦超声（high intensity focused ultrasound,HIFU）对人膀胱癌细胞的杀伤作用,并探索其作用机理.用不同强度的HIFU处理人膀胱癌细胞T24,用台盼蓝排斥法染色、细胞增殖试验（MTT法）研究HIFU对癌细胞的杀伤和生长抑制作用;流式细胞术检测其对癌细胞周期、凋亡及相关基因表达的影响.HIFU处理后,癌细胞死亡率升高,增殖活性降低,G0/G1期细胞数增加,S期细胞数减少,凋亡指数升高,与对照组比较,差异有显著性意义（P＜0.05）;P53、BCL-2和FAS表达阳性细胞数与对照组比较,无显著性意义（P＞0.05）;HIFU强度为600 W/cm^2时,HSP70表达阳性细胞数升高,与对照组比较差异有显著性意义（P＜0.05）.HIFU对人膀胱癌细胞T24具有明显的杀伤及抑制作用,其机理与抑制DNA合成有关;HIFU具有诱导癌细胞凋亡的作用,其诱导凋亡作用可能与P53、BCL-2和FAS无关.     

欧前胡素调节Gas6/Axl轴对膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能的影响

摘要 目的：探讨欧前胡素（IMP）调节生长停滞特异蛋白6（Gas6）/Axl轴对膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：从60只SPF级雄性C57BL/6小鼠中随机选取12只小鼠作为对照组（CON组）,其余小鼠平均分为Model组、IMP组、Gas6组、IMP+Gas6组,每组12只,往其左侧前肢皮下注射0.2 mL浓度为1×10⁷个/mL的鼠源性膀胱癌肿瘤细胞系T739细胞溶液（Model组和IMP组注射对照载体的T739稳转株细胞,Gas6组和IMP+Gas6组注射过表达Gas6的T739稳转细胞株）造模。造模成功后,IMP组及IMP+Gas6组通过腹腔注射5 mg/kg的IMP;CON组、Model组及Gas6组通过腹腔注射等量的生理盐水,2天1次,持续5次。测量小鼠肿瘤体积和重量;测定胸腺指数和脾脏指数;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清白介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）、血管内皮生长因子（VEGF）水平;苏木精-伊红（HE）染色检查肿瘤组织病理变化;流式细胞术检测T细胞亚群;TUNEL染色检测细胞凋亡;蛋白质印迹法（Western blot）检测Gas6/Axl通路相关蛋白表达。结果：Model组肿瘤细胞整体上排列松散,出现不同程度的核固缩、核碎裂现象;IMP则可以逆转该现象,使肿瘤细胞排列重新变得紧密,细胞核固缩程度提升,核碎裂现象降低;Model组较CON组肿瘤体积、肿瘤质量、CD8⁺细胞百分比、Gas6、Axl蛋白水平、VEGF水平显著增加（P<0.05）,胸腺指数和脾脏指数、IL-2、IFN-γ、CD4⁺细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺、肿瘤细胞凋亡率显著下降（P<0.05）;与Model组相比,IMP组胸腺指数和脾脏指数、IL-2、IFN-γ、CD4⁺细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺、肿瘤细胞凋亡率显著升高（P<0.05）,肿瘤体积、肿瘤质量、CD8⁺细胞百分比、Gas6、Axl蛋白水平、VEGF水平显著下降（P<0.05）;而Gas6组结果与IMP组趋势相反;而IMP+Gas6组的结果显示：IMP能逆转Gas6过表达后对膀胱癌荷瘤小鼠的促瘤作用。结论：IMP可能通过下调Gas6/Axl信号通路改善膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能,从而产生抑瘤效果。     

免疫重建荷人膀胱癌 -SCID 鼠模型的建立 *

摘要 目的：探讨建立稳定的荷人膀胱癌 SCID 鼠人化复合型的方法,为在人免疫重建荷人膀胱肿瘤 SCID 鼠型检测重组 BCG 的免疫刺激和免疫保护中打下基础。方法： 经 SCID 鼠腹腔内注射人 PBL、 皮下接种 RT4 膀胱癌细胞, 于接种后 4 周检测 SCID 鼠体内人免疫细咆水平(IgG 和 CD 3+ 、 CD 4+ 、 CD 8+ T 细胞)及脾脏重量, 观察皮下成瘤潜伏期及成瘤率。结果： 型组 100％ 成 瘤,病理类型为移行细胞癌; 检测 SCID 鼠血中人 IgG 均一定水平存在, 与对照组间差异有统计学意义(P<0.01); 人 CD 3+ 、 CD 4+ 、 CD 8+ T 细胞在鼠血及脾中均有表达, 而对照组均未检出(P<0.05); 4 周鼠脾重平均(178.9± 45.2)mg。较对照组(40.6± 14.8)mg 差异 有统计学意义(P<0.01)。结论： 采用腹腔注射人 PBL、 皮下接种 RT4 膀胱癌细胞的方法可以有效地建立人化荷人膀胱癌 SCID 鼠 型, 较好地拟人浸润性膀胱癌体内生物学特性,是膀胱癌免疫基因治疗的较理想型。     

Blockage of IGF－1R signaling sensitizes urinary bladder cancer cells to mitomycin－mediated cytotoxicity

INTRODUCTIONtransitional cell carcinoma (TCC) of the bladder represents the fifth most preValent malignancy inwestern population. A major problem in the management of TCC is the low sensitivity to chemotherapy and the high recu-rrence after transurethral resection, which occupies a large proportion (approximately 40%) among bladder cancer patients[1, 21. Sodrug resistance remains a major and difficult problem to resolye in TCC chemotherapy. This phenomenon has often been ascribed to so…     

国内外卡介苗治疗膀胱癌的经验与展望

1976年,美国首次报道,用卡介苗经膀胱灌注,治疗膀胱癌有良好疗效;次年,我国亦作了同样的介绍。实验证明,卡介苗可增强和提高患者的局部和全身免疫,术后治疗的复发率;国外资料为32.91%（化疗组40.61%,未治疗组为87.67%）;我国资料为17.32%（化疗组为34.01%,未治疗组为60.90%）,副反应主要为尿痛、尿频、轻度血尿、低热等一过性反应;很少见全身性副反应。国内所见副反应率低于国外资料。目前,用于治疗膀胱癌的卡介苗,已获本国批准的有5个以上制品;我国同类产品已完成临床Ⅱ期试验,正在申报审核中。本品治疗膀胱癌是一种安全、效好的首选药品。