蛋白磷酸酶2A在真菌细胞中的研究进展

蛋白质可逆的磷酸化修饰在真菌细胞生命活动中发挥着重要作用。磷酸化与去磷酸化过程相互协调。蛋白质中磷酸丝氨酸/苏氨酸位点的去磷酸化反应主要由蛋白磷酸酶2A (Protein Phosphatase2A,PP2A)负责催化。PP2A由催化亚基、调节亚基与结构亚基组合成有活性的三聚体全酶形式发挥功能。本文以模式真菌酿酒酵母、裂殖酵母与人类条件致病菌白色念珠菌为例,总结了PP2A家族成员在真菌细胞中的研究进展及去磷酸化作用调控真菌细胞生命活动的重要性,分析了PP2A调控真菌生命活动尚需解析的作用机制,并提出了可能的研究思路。     

日本旭硝子公司成功制造出最小基因组工厂

日本旭硝子公司新事业推进中心ASPEX事业推进部的浜祜子研发团队称,公司ASPEX事业推进部通过敲除作为基因重组蛋白质制造宿主的裂殖酵母S．pombe的无用基因,提高了模型蛋白质的生产率。     

拟南芥盐胁迫应答相关基因AtGRP9的克隆及表达

利用拟南芥cDNA文库在裂殖酵母中的功能性表达 ,从拟南芥中分离了一个编码富甘氨酸蛋白 (glycine richprotein ,GRP)的cDNA克隆 (其基因被命名为AtGRP9)。在裂殖酵母中大量表达AtGRP9cDNA能显著提高细胞的耐盐性。在拟南芥中 ,AtGRP9基因的表达受盐胁迫诱导 ,其表达具有根器官特异性 ;而且 35S启动子组成形成超量表达植株的耐盐性明显提高。这些实验结果表明拟南芥AtGRP9可能是一盐胁迫应答相关基因。     

粟酒裂殖酵母核糖体蛋白RPL21表达不足引发细胞粘附

【目的】随机选择裂殖酵母核糖体蛋白RPL21作为研究对象,分析其表达不足对细胞的影响。【方法】通过同源臂交换的方法,敲除裂殖酵母基因组中RPL21蛋白的编码基因rpl21-1和rpl21-2,观察突变菌株rpl21-1Δ和rpl21-2Δ细胞内的核糖体合成情况以及细胞表型变化。【结果】突变菌株rpl21-1Δ和rpl21-2Δ细胞内总的rpl21(rpl21-1+rpl21-2)表达水平与野生型菌株相比分别减少了66.5%和58.7%,合成的核糖体总量较野生型菌株分别下降了62.8%和50.4%。突变菌株在YEPD液体培养基中培养时发生细胞粘附现象,而基因回补的重组菌株rpl21-1Δ/RPL21-1和rpl21-2Δ/RPL21-2突变株细胞中粘附现象消失。【结论】核糖体蛋白损伤造成核糖体合成受阻,进而引发细胞生长过程中的粘附在粟酒裂殖酵母中是普遍存在的现象。     

Comparative analysis of chromosome segregation in human,yeasts and trypanosome

Chromosome segregation is a tightly regulated process through which duplicated genetic materials are equally partitioned into daughter cells. During the past decades, tremendous efforts have been made to understand the molecular mechanism of chromosome segregation using animals and yeasts as model systems. Recently, new insights into chromosome segregation have gradually emerged using trypanosome, an early branching parasitic protozoan, as a model organism. To uncover the unique aspects of chromosome segregation in trypanosome, which potentially could serve as new drug targets for anti-trypanosome chemotherapy, it is necessary to perform a comparative analysis of the chromosome segregation machinery between trypanosome and its human host. Here, we briefly review the current knowledge about chromosome segregation in human and Trypanosoma brucei, with a focus on the regulation of cohesin and securin degradation triggered by the activation of the anaphase promoting complex/cyclosome （APC/C）. We also include yeasts in our comparative analysis since some of the original discoveries were made using budding and fission yeasts as the model organisms and, therefore, these could provide hints about the evolution of the machinery. We highlight both common and unique features in these model systems and also provide perspectives for future research in trypanosome.     

酵母pac—1基因的克隆、序列分析和在大肠杆菌中的高效表达及活性测定

粟酒裂殖酵母菌 (Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｍｙｃｅｓｐｏｍｂｅ)的 ｐａｃ 1基因于 1991年Ｙｕｉｃｈｉｌｉｎｏ等首次报道。在温度敏感型的酵母突变体中 ,ｐａｃ 1基因是一个多拷贝阻遏子 ,它使酵母在限制温度培养条件下的减数分裂不受调控 ,对酵母的生长过程起着重要的调节作用。该基因有一个编码 36 4个氨基酸的开放阅读框 ,编码产物的羧基端与大肠杆菌核糖核酸酶Ⅲ有2 5 %的同源性。通过酶活性测定 ,已经确定它是一类依赖ｄｓＲＮＡ的核糖核酸酶 ,具有降解ｄｓＲＮＡ的功能[1,2 ] 。由于大多数植物病毒为ＲＮＡ病毒 ,因此无论它的基…     

絮凝法固定粟酒裂殖酵母实现乙醇连续发酵过程的研究

本文利用了粟酒裂殖酵母的絮凝颗粒,依此作为固定化手段,在悬浮床生物反应器中,对淀粉糖化液进行了连续发酵的实验研究。对发酵过程中的酵母絮凝颗粒特性作了初步考察。三个月以上的不间断运转,证明该反应器操作可行可靠,酵母浓度可达40-60g(干重)／L,设备的生产强度可达20—24g(乙醇)／L．H,超过一般用载体包埋法固定化酵母的指标。悬浮床反应器由空气为驱动力,由此而供人的有限量氧提高了酵母的发酵活性和对乙醇的耐受性,可使乙醇的比生成速率提高6—8％。本文还根据连续发酵所获得实验数据分别整理出了该发酵体系的动力学方程式,它们是 对通空气情况, V=1.02S-18.2+S(1--112P) 对完全厌氧情况：V=0·943 -24.9+S-S(1-108—P)     

粟酒裂殖酵母染色体DNA的脉冲电泳分析

采用等高锁状均质电场（ＣＨＥＦ）凝胶电泳技术,对来自中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心的粟酒裂殖酵母菌株ＡＳ２．２１４进行染色体ＤＮＡ分析。ＣＨＥＦ电泳结果显示菌株ＡＳ２．２１４的４条染色体ＤＮＡ的分子大小分别约为５９００ｋｂ、３２００ｋｂ、２５００ｋｂ和５５０ｋｂ,基因组大小约为１２０００ｋｂ。供试菌株ＡＳ２．２１４第Ｉ条染色体ＤＮＡ为５９００ｋｂ与已研究报道的菌株９７２ｈ＾－和ＨＭ２４８（     

我国各类基物上的酵母菌分布及其尿素酶活性

本文讨论了2300株由我国各地分离到的酵母菌和类酵母菌与各类基物的关系。共述及23属,占Lodder(1970)系统的半数以上。在十几类基物中酵母菌的分布各有不同,叶子上有大量掷孢酵母,果实上比其它基物更能获得克勒克酵母属(Kloeckera),在咸腌食品中相对地有较多耐高渗透压的酵母如球拟酵母属(Torulopsis)与德巴利酵母属(Debaryomyces)。对部分属的定种工作也已进行,说明某些属的种在我国均有发现而且为数不少。此外还研究了600余株代表各类酵母的尿素酶活性,结果说明担子菌酵母或系统上接近担子菌的酵母都有尿素酶活性,而子囊菌酵母则无。根据作者的观察子囊菌酵母中裂殖酵母属(Schizosaccharomyces)则常常例外地有尿素酶反应,且常有辅酶Q_(10),从而可见裂殖酵母属有其特有的生物学特性,在系统上很可能与其它子囊菌酵母不同。对属于不完全菌的无孢子酵母也进行了尿素酶活性测定,结果表明它们部分与子囊菌有关,部分与担子菌有关。     

酿酒酵母与粟酒裂殖酵母属间原生质体融合选育降解苹果酸强的葡萄酒酵母

采用赖氨酸缺陷型酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｎｉｓｉａｅ）Ｌ１原生质与肌醇缺陷型粟酒裂殖酵母（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ）ＰＭ－５原生质体事例选育了葡萄酒发酵性能良好且具有降解苹果酸能力的酵母菌株。对融合子菌落形态、遗传稳定性、降解苹果酸能力和葡萄酒发酵性能进行了研究。结果表明：用促融合剂「３０％聚乙二醇（ＭＷ６０００）、０．０２ｍｏｌ／Ｌ ＣａＣｌ２和１