褐飞虱表皮蛋白基因NlICP的克隆及功能研究

表皮蛋白与几丁质结合构成抵御外界不良环境的昆虫角质层, 在昆虫的生长发育及蜕皮硬化中具有重要的作用。为了探讨表皮蛋白基因在褐飞虱Nilaparvata lugens生长发育中的功能, 本研究根据褐飞虱转录组测序信息, 对其中1个预测为编码表皮蛋白的Unigene36450序列进行了克隆, 并应用荧光定量PCR和RNA干扰（RNAi）技术分别对该基因的表达规律和功能进行了研究。结果表明： 克隆的 Unigene36450全长cDNA开放阅读框长585 bp, 编码的蛋白含194个氨基酸, 具有典型的表皮蛋白R&R保守结构域, 命名为NlICP。转录水平的时序表达分析发现, NlICP仅在褐飞虱若虫期表达, 且在3龄若虫体内表达量最高, 提示该基因编码的蛋白属于幼虫表皮蛋白。RNA干扰结果显示, 取食dsNlICP的1龄末2龄初（孵化后第3 天）若虫在干扰6 d和8 d时, NlICP基因的表达量分别较取食dsGFP的对照组下降58.8%和45.6%, 差异极显著(P<0.01); 干扰后部分褐飞虱若虫因蜕皮不完全死亡, 干扰5 d的存活率较对照下降26.7%。本研究结果提示, NlICP与褐飞虱若虫的生长发育及蜕皮相关, 可以作为褐飞虱防治的潜在靶标基因。     

血小板源生长因子受体与肿瘤

血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)经由其受体(platelet-derived growth fac tor receptor,PDGFR)表现细胞效应。PDGF和PDGFR涉及多种肿瘤的发病机制并在血管生成中起重要作用。PDGF在肿瘤中的自分泌刺激、PDGFR的过表达或过度活化或者刺激肿瘤内血管生成都会促进肿瘤生长;PDGFR的阻断可以降低实体瘤中组织间质液压而增强药物传送。这些机制可能提示在肿瘤治疗中PDGFR抑制剂单用、与化疗药物或者和其他靶点药物联合用药的可能性和可行性。随着PDGFR拮抗剂,如imatinib的上市,PDGFR作为抗肿瘤药物的靶点备受瞩目。     

血清胎盘生长因子、血管生成素-2联合应激诱导蛋白2预测重度子痫前期患者胎盘早剥的临床研究

摘要 目的：探讨重度子痫前期（SPE）患者胎盘早剥的危影响因素,并探讨胎盘生长因子（PLGF）、血管生成素-2（Ang2）联合应激诱导蛋白2（Sestrin2）对重度子痫前期并发胎盘早剥的预测价值。方法：选取2019年4月至2022年4月长沙市第四医院收治的SPE患者348例。根据患者是否发生胎盘早剥分组,分为胎盘早剥组（n=75）和无胎盘早剥组（n=273）。检测并对比两组血清PLGF、Ang2及Sestrin2水平。采用单因素及多因素Logistic回归模型分析SPE患者并发胎盘早剥的影响因素;采用受试者工作特征（ROC）曲线分析PLGF、Ang2联合Sestrin2对SPE患者并发胎盘早剥的预测价值。结果：胎盘早剥组的PLGF、Ang2低于无胎盘早剥组,Sestrin2高于无胎盘早剥组（P<0.05）。SPE并发胎盘早剥与剖宫产史、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、血小板、尿素氮、纤维蛋白原、血肌酐有关（P<0.05）。多因素Logistic回归模型分析结果显示：SBP偏高、DBP偏高、纤维蛋白原偏低、血肌酐偏高是SPE并发胎盘早剥的危险因素。Sestrin2水平下降,PLGF、Ang2水平升高则是SPE并发胎盘早剥的保护因素（P<0.05）。血清PLGF、Ang2联合Sestrin2检测对SPE并发胎盘早剥的预测价值优于各指标单独检测（P<0.05）。结论：SPE并发胎盘早剥患者中Sestrin2水平升高,PLGF、Ang2水平下降,联合检测可以辅助预测SPE并发胎盘早剥的发生。SBP偏高、DBP偏高、纤维蛋白原偏低、血肌酐偏高是SPE并发胎盘早剥的危险因素。Sestrin2水平下降,PLGF、Ang2水平升高是SPE患者并发胎盘早剥的保护因素。     

两个弥漫性掌跖角化病家系的病理特征与基因突变分析

为了明确两个弥漫性掌跖角化病家系的临床、病理特征、角蛋白9在局部组织中的表达情况及KRT9基因的突变, 对2名先证者的手掌皮肤进行组织病理学、免疫组织化学分析, 并用聚合酶链反应技术及直接测序分析的方法, 对家系中46名成员的KRT9基因进行突变分析。发现两名先证者的表皮都呈显著的角化过度, 颗粒层和棘层明显增厚, 真皮浅层有轻度的炎症细胞浸润, 上基底的棘层和颗粒层的角质形成细胞中都有特征性的空泡变性存在; 角蛋白9只在棘层和颗粒层的角质形成细胞中特异性表达; 两个家系患者分别存在KRT9基因的点突变N160S和L167S; 说明这两个家系都属于表皮松解性掌跖角化病家系, KRT9基因N160S和L167S突变分别导致这两个家系发病。     

一种促分裂活性降低的hbFGF突变体的表达及纯化(英文)

为了降低由人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的广谱促分裂活性引起的潜在副作用,用中性氨基酸丙氨酸取代了hbFGF第108位的丝氨酸,构建了促分裂活性降低的hbFGF突变体(mhbFGF)。IPTG诱导突变体在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达。mhbFGF的表达量约为全菌体蛋白的30％。通过离子交换和肝素亲和层析从菌体上清中纯化目标蛋白。MTT法检测促分裂活性表明,mhbFGF的促分裂活性显著低于野生型hbFGF。纯化的:mhbFGF可用于进一步的药效和安全性研究。     

FGF-1改构体对小鼠脾细胞增殖与凋亡的影响

目的:主要探讨非促分裂改构人酸性成纤维细胞生长因子(MrhFGF-1)对balb／c小鼠脾细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用3H-TdR掺入的方法检测MrhFGF-1同野生型hFGF-1相比对脾细胞增殖的影响,实验组分为(1)对照组;(2)FGF-1处理组;(3)ConA处理组;(4)FGF-1+ConA处理组。用流式细胞仪定量分析MrhFGF-1对脾细胞的凋亡保护作用,(1)对照组;(2)DEX处理组;(3)DEX+FGF-1(hFGF-1、rhFGF-1、MrhFGF-1)处理组。结果表明,利用DNA重组技术构建的一种非促分裂FGF-1突变体MrhFGF-1和野生型FGF-1相比,对脾细胞的促细胞增殖能力明显降低,但其对细胞凋亡保护作用的影响并无显著性变化,说明FGF-1的促细胞增殖能力和细胞凋亡保护信号通路并非由同一信号通路来实现的。     

基因工程药物的过去、现在和将来

生物技术的开发迅猛异常、日新月异。生物技术的核心是基因工程,基因工程技术最成功的是用于生物治疗的新型药物的研制。已有近３０种基因工程药物投入市场,产生了巨大的社会效益和经济效益。生物技术用于疾病的预防和疑难病症的治疗已经成为现实。以下就其现状和我国基因工程药物的研究与发展,作一分析。     

致癌基因:分子探针在恶性肿瘤疾病中的临床应用

现在,我们借助卓越的基因工程技术,能利用逆转录病毒致癌基因探测并确定许多同源相关的基因。这些基因称为原致癌基因(Proto-Oncogene),人们认为它们参与正常细胞至肿瘤形成的转化过程。已经知道,这些基因来源于正常细胞,但其中有许多最初是在逆转录病毒中鉴定出来的。     

快速诊断试验法

<正> Hazleton公司的一个子公司,即Hazleton生物技术公司(维也纳,弗吉尼亚)和Cell-ular产品股份有限公司(布法罗,纽约)决定制定一项生产用于诊断仪器的单克隆抗体的联合计划。Cellular公司能提供来自人体血液成分的一些高纯化抗原,这可能是与Hazleton公司一位组织培养和杂交瘤生产方面的专家的配合分不开的。生产出的第一批单克隆抗体可能对人体Platelet-Derived生长因子(PDGF)和人体免疫干扰素具有特异性。据Richard     

能显着降低培养基成本的生长因子

<正> Nova药品公司研制出一种低成本生长培养基。这种培养基中含有从奶中衍生的一种新生长因子。据Nova药品公司的Bill Sbakelford讲,培养基中应用2.5%的生长因子来培养杂交瘤,就可以使培养基中的血清浓度减少1～10%,但仍可以保持相同的细胞生长曲线。Bill Shakelford以前使用的是预选的血清,每升价值190美元。使用生长因子就可以节省大