rhTNF α表达条件的优化与中试发酵

为了确定出rhTNFα最佳表达条件,实验利用正交试验设计方法,对rhTNFα工程菌的进行发酵培养和42℃热诱导,此后借助蛋白凝胶电泳分析软件对各组样品的凝胶电泳图片定量分析,利用方差分析对影响TNF基因工程菌对目的产物表达的几个重要的条件进行了优化,并最终确定出pH7．5、培养温度27℃、培养时间4．5h、诱导时间5h的最佳表达条件。在该条件下进行中试发酵TNF的表达产物占到了菌体总蛋白的60％左右,且大部分以可溶形式存在。说明在大肠杆菌生长正常的前提下适度低温培养有利于rhTNFα的表达和减少包涵体的形成。     

复合益生菌制剂"海生元"急性毒性试验研究

目的 :观察复合益生菌制剂“海生元”(HSY)及其核心成分 益生菌 (M9、T9)经两种途径给药的急性毒性反应 ,评价其安全性。方法 :以健康小鼠为对象 ,将HSY、M9、T9三种受试物按i.p(腹腔注射 )和p .o(口服灌胃 )两种给药方式进行急毒试验。每种给药方法分 5个剂量组。i.p小鼠用Bliss法测得受试物的LD50 和 95 %可信限 ,p .o小鼠用安全限度试验测得受试物的最大耐受量。 结果 :1)i.p法测得各受试物LD50 和 95 %可信限 :M9为 898.31mg/ml(770 .18～ 92 5 .79) ;T9为 185 6 .95mg/ml(15 2 1.4 8～ 2 0 10 .36 ) ;HSY为 76 0 5 .2 3mg/ml(6 980 .5 2～ 830 4 .11)。 2 )p .o法测得各受试物最大耐受量及耐受倍数 :健康小鼠最大耐受量分别为M9>4 0 0 0mg/ml,T9>6 0 0 0mg/ml,HSY >15 0 0 0mg/ml;最大耐受量倍数 (即耐受成人每日用量的倍数 )分别为 133倍、2 0 0倍和 5 0 0倍。结论 :HSY、M9、T9口服给药均非常安全。三种受试物比较 ,又以HSY安全程度最高。     

痢疾杆菌体内诱导基因筛选方法的建立

分别用氯霉素乙酰转移酶基因(cat)和天冬氨酸半醛脱氢酶基因(asd)作为报告基因,用小鼠肺感染模型和HeLa细胞侵袭模型来试验筛选痢疾杆菌体内诱导基因的可行性。结果表明,以asd为报告基因,用HeLa细胞侵袭试验作为筛选模型,可成功地用于筛选痢疾杆菌的体内诱导基因。     

水蛭常见病原菌的分离与鉴定

从表现软体、水肿、出血和硬结等特征的患病宽体金线蛭(Whitmania pigra)中分离到13株细菌分离物。通过培养特征、形态学观察及生化试验,确定了所分离的细菌中有6株为大肠杆菌(占46．15％),4株为变形杆菌(占30．77％),3株为沙门氏菌(占23．08％)。动物回归试验表明,接种后10d内大肠杆菌、沙门氏菌和变形杆菌对水蛭的致死率分别为100％(4／4)、100％(4／4)和25％(1／4);药敏试验结果表明,这三种细菌普通对复合磺胺、氯霉素、丁胺卡那霉素、头孢哌酮、丙氟哌酸、氟哌酸敏感。研究结果表明,本病是由多个病因导致的一种临床综合症。因此,在进行药物治疗时,应选用多种药物联合以达到最佳的治疗效果。     

室内诱导绿眼虫包囊形成的研究

绿眼虫 ( Euglena)是一种常见淡水动物 ,广泛分布在有机质丰富的池塘及湖泊等小型富营养性静水水体中。在环境条件适宜时 ,绿眼虫大量繁殖使所栖水域呈现绿色。一旦生活条件不适宜 ,虫体即能分泌胶质形成包囊 ,以抵御不良环境 ,环境条件改善后又会脱包囊而出。如何在实验室内诱导绿眼虫包囊形成 ,使学生直接观察到这一生命现象 ,目前未见有报道。本研究旨在探讨如何在实验室内诱导绿眼虫包囊的形成 ,它可作为无脊椎动物实验教学中“眼虫形态结构观察”的一个补充。1　材料与方法1.1　材料　实验用绿眼虫采集于南京西郊水沟。沟水呈浅绿色 ,…     

酵母菌C10产内切型菊粉酶发酵条件研究

在多个单因素实验的基础上,采用正交试验方法,通过对筛选及诱变选育后得到的产内切型菊粉酶较高酵母菌株C10进行发酵工艺条件实验,得到一个比较优化的发酵工艺条件为:pH5.5,温度30℃,菊芋干粉5％,NH4H2PO40.5%。不同金属离子及不同诱导物对酶合成的影响表明,Mn^2 激活作用能显著,而Zn^2 、Cu^2 、Fe^2 有抑制作用,菊芋干粉为合成菊粉酶的最佳诱导物。     

金针菇FV908菌株液体培养工艺

通过单因子试验统计分析,优化筛选了适于金针菇(Flammulina velatipes)FV908的适宜培养基和摇瓶培养条件,结果表明,其适宜的液体培养基组成为5.0%玉米粉,2.0%麸皮,0.1%KHOP4,0.05%MgSO4*7H2O,10μgVB1/100ml,50μgVB2/100ml;适宜的摇瓶培养条件为培养基的起始pH6.0～7.0,500ml摇瓶装量为150ml,接种量为10%,培养温度25℃,摇床转速为120r/min,菌丝干收率4.1g/100ml.     

老年嗜麦芽窄食单胞菌院内肺炎92例临床分析

目的：分析和总结老年嗜麦芽窄食单胞菌医院获得性肺炎的临床特点及对抗生素耐药情况。方法：对92例老年嗜麦芽窄食单胞菌医院获得性肺炎的临床资料进行统计、分析。用VITEK－AMS微生物自动鉴定仪鉴定细菌,并用其配套GNS－KI或GNS－201卡测定该菌体外药敏及MIC50、MIC90。结果：92例患者均有基础疾病,以恶性肿瘤（占27．2％）最常见,其次为COPD伴呼吸衰竭（占23．9％）、脑血管意外（占17．4％）及糖尿病（占14．1％）。其中重症监护病号（ICU）病房患者占72％（66／92）。不合理使用广谱抗生素、激素使用、气管切开、意识障碍、化疗、放疗等为本病高危因素。临床表现：发热（97．8％）;咯嗽、咳痰（53．3％）;肺部影像学显示,89％患者表现为双下肺斑片状阴影。药敏试验,该菌耐药严重。结论：老年嗜麦芽窄食单胞菌医院获得性肺炎多发生在有各种基础疾病、免疫功能低下者,各种高危因素又促成本病发生,临床表现危重,复杂。该菌耐药率高,合理治疗有赖于药敏结果。     

胃癌患者胃粘膜无芽胞厌氧菌分析及药物敏感试验

对98例具有消化不良症状的患者做胃镜检查,取胃粘膜组织进行细菌分离培养,结果表明,不同的消化道疾病,胃粘膜微生物群均发生不同的改变,其中胃癌患者改变最明显,胃内微生物检出率最高,无芽胞厌氧菌检出率87.88％（29／33）,其中产亚硝酸优杆菌检出率为57.60％（19／33）,硝酸盐还原试验阳性菌株占72.70％（24／33）。这些细菌和胃癌的关系有待深入研究。对19株产亚硝酸优杆菌做药物敏感试验,结果显示,该菌对青霉素类药物均耐药,对氯霉素,红霉素,庆大霉素敏感。