编码人精子膜蛋白YWK-Ⅱ基因在人睾丸组织表达的研究

抗人精子膜蛋白的单克隆抗体YWK-Ⅱ,能引起人精子凝集和抑制体外穿卵,并发现在睾丸组织中至少有4种形式的mRNA对应于YWK-Ⅱ抗原,可能是同一基因转录而不同方式剪切的产物.从人睾丸λgt10 5’Stretch cDNA文库中筛选,得到1个4kb大小的cDNA,命名为 C211.在 C211的 5’变异区和 3’相对稳定区中选择了2段.DNA分别作为转录探针的模板,5’端为943 bP和3’端为1.5kb的片段,将以上二个片段与含SP6和T7启动子的PGEM3Z载体进行重组,采用体外转录,地高辛标记的方法,分别合成2,tRNA探针,对人睾丸组织进行原位杂交.人睾丸YWK-ⅡC211基因片段地高辛(Dig)标记的5’端和3’端Antisense cRNA探针均与支持细胞质中的mRNA杂交,证明YWK-Ⅱ抗原蛋白在Sertoli细胞中合成,并又镶嵌在生精细胞膜上,最终定位于精子头部赤道极.     

慢性低氧对大鼠肺内几种原癌基因表达的影响

本文用原位杂交技术动态观察了慢性低氧大鼠肺内原癌基因ｊｕｎ、ｆｏｓ和ｍｙｂ的表达,结果发现：（１）正常大鼠肺内有一定量的ｊｕｎｍＲＮＡ表达,少见到ｍｙｂ及ｆｏｓ的表达;（２）低氧１周时,ｊｕｎ的表达较正常下降,２周后有所增加。低氧３周后,ｊｕｎ的ｍＲＮＡ表达较正常明显上升;（３）低氧１、２周后,ｍｙｂ的表达明显增加,３周时基本恢复到正常水平;（４）ｆｏｓ原癌基因在低氧１、２周时有一定量的表达,低氧３周时达最大值。提示低氧可刺激大鼠肺内原癌基因ｊｕｎ、ｍｙｂ和ｆｏｓ的表达。     

内内葡聚糖苷水解酶的分离纯化和内源荧光性质

利用离子交换和分子筛层析技术从拟康氏木霉Ｓ－３８固态发酵液中提纯了两个内切葡聚糖苷酶组分。测定了一个组分的内源荧光性质。结果表明：该酶分子的内源荧光几乎都来自色氨酸。Ｎ－溴代琥珀酰亚胺（ＮＢＳ）修饰导致了酶活力的完全丧失,但是酶荧光残留了２５％,抑制剂纤维二糖与酶结合可使部分酶荧光得到保护,同时这种结合也可以保护一定的色氨酸荧光不被外来淬灭剂淬灭。     

应用G显带染色体荧光原位杂交（FISH）技术研究复杂的染色体易位

建立常规Ｇ显带染色体标本的荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）技术,用于分析患者复杂的染色体易位。原位杂交前,用甲醛固定Ｇ显带标本,是获得良好显带和荧光杂交效果的关键步骤。仅用常规细胞遗传学方法分析,显示一例习惯性流产患者的核型为４６,ＸＸ,ｔ（１;５;１２）（１ｐｔｅｒ→１ｑ２５：：１２ｑ２４→１２ｑｔｅｒ;５ｑｔｅｒ→５ｐ１１：：１ｑ２５→１ｑｔｅｒ,１２ｐｔｅｒ→１２ｑ２４：．５ｐ１１→５ｐｔｅｒ）,而采用本方法确定患者的核型实际为４６,ＸＸ,ｔ（１;５,１２）（１ｐｔｅｒ→１ｑ２３：：１２ｑ２２→１２ｑｔｅｒ,５ｑｔｅｒ→５ｐ１１：：１ｑ２５→１ｑｔｅｒ;１２ｐｔｅｒ→１２ｑ２２：：１ｑ２３→１ｑ２５：５ｐ１１→５ｐｔｅｒ）。结果表明,新建立的Ｇ显带染色体荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）技术能更有效地检测患者复杂的染色体易位。     

植物细胞核纤层的研究

应用细胞成分选择性抽提方法,结合非树脂包埋去包埋电镜技术显示悬浮培养的胡萝卜细胞和银杏雄性生殖细胞均具有核纤层结构,免疫印迹反应证明这两种细胞的核纤层由A型和B型核纤层蛋白组成;至少分别含有66ku,84ku和66ku,86ku多肽,免疫胶体金标记将这些蛋白定位在核周缘,光镜和电镜原位分子杂交显示植物细胞具有与动物细胞核纤层蛋白cDNA同源的序列存在;其mRNA分选的部位主要分布在靠近核膜周围的胞质部分,实验结果证明植物细胞确实存在核纤层.     

一例母 JUE TI 及其亲子DNA指纹与血清蛋白、酯酶遗传的研究

采用DNA指纹分析和聚丙烯酰胺凝胶电泳法, 对一例与公驴交配生育了后代的母|JUE||TI|后代进行了亲缘鉴定和血清蛋白、酯酶遗传的分析。结果可以认定其亲子关系并证实母骡生育的事实。虽然本例母|JUE|| TI|的后代在Pr、Al、Pa和Hb、Es等基因座位上的基因表达倾向于驴,但其外貌仍明显地带有种间杂种的特征。因此,尚不能简单地认为其已“回归”为纯种的驴。 Abstract:By adopting DNA fingerprints analysis and polyacrylamide gel electrophoresis simultaneously,the author made an genetical study on analytical evaluation of kindred relationship and contents of serum protein and esterase of a female hinny and her offspring bred after her mating with a masculine ass.As a result,the parental relationship together with the child-bearing fact of the hinny is hereby clearly verified.The appearance of the offsping,however,still showed some prominent characters of interspecific hybrid,though in the gene demonstration the offsping was proved inclining to the ass especially on those gene loci as Pr,AL,Pa,Hb and Es.Therefore,in the author′s opinion,the offsping could not be simply regarded as a “regressed” ass pure-line.     

小麦叶片的状态转换涉及PSⅡ向PSⅠ激发能满溢的变化

叶片照远红光后,其叶绿素荧先参数Fm／Fo和两个光系统低温荧光产量比值F685／F735升高,照红先后,其Fm／Fo和F685／F735降低;在照远红光或红先过程中,与F685／F735的变化相比,Fm／Fo的变化幅度在较短的时间内达到最大;NaF预处理的叶片经远红光照射时,其Fm／Fo和F685／F735不增加;DCMU预处理的叶片经红光照射时,其Fm／Fo和F685／F735降低的幅度比对照小。这些结果表明,小麦叶片状态转换过程中两个先系统间能量分配的变化至少部分地与激发能满溢变化有关。这种满溢的变化与捕光色素蛋白复合体LHCⅡ的磷酸化相联,并且,与光吸收截面变化相比,满溢的变化是对两个光系统不平衡光吸收的较快响应。     

胆碱脱氢酶光谱性质的研究

胆碱脱氢酶（ＣＤＨ）蛋白质部分内源荧光发射峰在３３５ｎｍ,并不受底物的影响,但底物可改变辅基ＦＡＤ部分的内源荧光光谱。应用ＦＴＩＲ技术研究了增溶ＣＤＨ的二级结构,其结果如下：５３．４％α－螺旋,２４．５％β－片层,１３．９％３１０－螺旋及０．５％β－回折。在ＣＤＨ处于非底物结合状态时,分子内部结构表现为α－螺旋以及β－片层优势构象,呈现出球状蛋白样的空间结构特征。在与底物作用过程中,３１０－螺旋的比例逐渐上升至４２％左右,与此同时α－螺旋结构则降低到３５％。提示了底物诱导ＣＤＨ分子内部发生了蛋白分子的重新折叠。     

免疫白粉病的小麦种内易位系的创制

以普通小麦Ａ５５２为父本、ＩＲＳ／ＩＢＬ黑麦和小麦易位系早抗为母本的杂种Ｓ３０６３,经Ｃ－分带和原位杂交鉴定,发现丢失了母本的黑麦成分,同时又发生了小麦种内易位,变成了５ＢＳ／７ＢＳ、５ＢＬ／７ＢＬ臂间双易位系。与此同时,白粉病抗性和一些农艺性状也发生了变化,此已己连续３年对白粉病免疫,且免疫条锈、叶锈和高抗黄矮病,每公顷５５２３千克,接近北京推广品种京冬６号     

用原位杂交技术定位甲状旁腺素基因于猪染色体14q25—q28

本文报告了以氚标记的人甲状旁腺素ＤＮＡ片段为探针,用原位杂交法将此基因定于猪染色体１４ｑ２５－ｑ２８的实验结果。此外本文还对相关问题进行了讨论