不同预处理条件对海水养殖废弃物发酵产氢的影响

【目的】利用海水养殖场有机废弃物厌氧发酵产氢,可在减少有机污染物的同时获取氢气。【方法】以海水养殖场有机废弃物为底物,比较嗜热酶(S-TE)、酸、碱、灭菌、微波不同预处理方法对厌氧发酵产氢效果的影响,并对发酵过程中底物性质变化[SCOD、可溶性蛋白质、可溶性糖、pH、VFAs(挥发性脂肪酸)和乙醇]进行探讨。【结果】灭菌预处理产氢效果最好,产氢率为22.0 mL/g VSS,酸处理的效果最差,产氢率为7.6 mL/g VSS。可溶性糖大量消耗之后,氢气不再产生。接种S-TE预处理污泥的底物能更多地释放营养物质,并在整个发酵过程中保持较为稳定的pH值。发酵过程中产生的VFAs主要成分是乙酸,在发酵后期出现乙醇。【结论】灭菌预处理是海水养殖场有机废弃物厌氧发酵产氢的最佳预处理方法,可溶性糖为这一过程主要的营养来源。     

SII、COP-NLR评分与局部晚期鼻咽癌患者临床病理特征和预后的关系研究

摘要 目的：探讨系统性免疫炎症指数（SII）、血小板计数和中性粒细胞与淋巴细胞比值（COP-NLR）评分与局部晚期鼻咽癌患者临床病理特征和预后的关系。方法：选择2015年1月到2017年12月徐州医科大学附属医院收治的94例局部晚期鼻咽癌患者，计算SII和COP-NLR评分，受试者工作特征（ROC）曲线确定治疗前SII的最佳临界值，比较不同SII、COP-NLR评分局部晚期鼻咽癌患者临床病理特征的差异。绘制Kaplan-Meier生存曲线分析不同SII、COP-NLR评分的局部晚期鼻咽癌患者总生存期（OS）的差异，单因素和多因素Cox回归分析影响患者预后的危险因素。结果：根据SII最佳临界值、COP-NLR评分标准将局部晚期鼻咽癌患者分为低SII组（46例）和高SII组（48例），低COP-NLR组（0-1分，45例）和高COP-NLR组（2分，49例）。高SII组、高COP-NLR组TNM分期Ⅳa期、淋巴结转移、颅底侵犯比例高于低SII组、低COP-NLR组（P＜0.05）。高SII组、高COP-NLR组的5年OS明显降低（P＜0.05）。TNM分期Ⅳa期、SII升高、COP-NLR评分升高是局部晚期鼻咽癌患者预后不良的危险因素（P＜0.05）。结论：局部晚期鼻咽癌患者高SII、高COP-NLR评分与恶性病理特征和低生存率有关，SII、COP-NLR评分可作为局部晚期鼻咽癌预后预测的潜在生物学标志物。     

中性粒细胞/淋巴细胞比值与糖尿病酮症酸中毒严重程度的相关性研究

摘要 目的：探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）与糖尿病酮症酸中毒（DKA）严重程度的相关性。方法：回顾性分析2019年2月-2023年2月于南京医科大学附属江宁医院住院治疗的66例DKA患者的临床资料，根据严重程度将患者分为轻度组（21例）、中度组（24例）及重度组（21例）。比较三组患者在临床资料及实验室检查指标的差异。采用Spearman非参数相关性分析评估NLR与DKA严重程度的相关性。采用受试者工作特征（ROC）曲线评估NLR对DKA严重程度的预判能力。比较不同严重程度DKA患者治疗前后NLR水平差异。结果：三组患者在年龄、糖尿病类型、合并感染比率、心率、呼吸频率、入院随机血糖、CO2结合力、白细胞计数、中性粒细胞计数、NLR、C反应蛋白、血肌酐、D二聚体具有显著性差异（P＜0.05）。NLR与DKA严重程度呈正相关（r=0.499，P＜0.05）。ROC曲线分析NLR对DKA严重程度的预测价值，ROC-AUC为0.756（95%CI 0.621 0.890）。DKA患者治疗后NLR水平显著低于治疗前（P＜0.05）。结论：NLR与DKA严重程度相关，可作为早期识别DKA严重程度的简单易行的临床指标。     

急性心肌梗死并发严重心律失常的影响因素分析

目的:探讨急性心肌梗死并发严重心律失常的影响因素,为其临床防治提供参考依据.方法:选择2011年3月～2012年7月发生AMI24小时以内就诊并住院的63名患者为研究对象,按照是否发生严重心律失常分为A组(发生严重心律失常组)和B组(未发生心律失常组)两组,分别记录和分析患者的性别、年龄、发病时间、既往病史、不良习惯,以及入院时心肌酶、血常规检查及心电图检查结果.结果:A组患者的白细胞总数及中性粒细胞数均显著多于B组,但发病时间明显短于B组,差异有统计学意义(P＜0.005),而两组的中性粒细胞比率、CK、CK-MB值、性别、年龄、心电图是否出现Q波、既往病史及不良习惯比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).多因素Logistic回归分析结果表明仅发病时间、中性粒细胞计数与急性心肌梗死患者并发严重心律失常有明显的相关性(P均＜0.05).结论:发病时间、中性粒细胞计数＞7× 109/L是急性心肌梗死患者并发严重心律失常的危险因素.     

新疆达坂城盐湖中度嗜盐微生物的筛选分离与其抑菌性、生长特性初步研究

极端微生物作为非常宝贵的微生物资源,具有广阔的研究和应用前景。为获得中度嗜盐微生物,采用渗透压选择性培养基,从采自新疆达坂城盐湖及附近的20份水土样本中获得6株中度嗜盐菌,其中包括2株细菌、1株放线菌和3株霉菌。其中两株嗜盐菌对包括大肠杆菌在内的三种指示菌有不同程度的抑制作用。对有抑菌能力的两株中度嗜盐微生物进行生长特性的初步研究,发现其最适生长盐度为10%(以NaCl计),当盐度超过15%时则不生长;在pH6~9,温度25~37℃条件下均长势良好。     

AAV载体介导的蓬佩病模型小鼠体内基因治疗研究*

Objective: Pompe disease is a lysosomal glycogen storage disease caused by acid α-glucosidase (GAA) deficiency, which is characterized by glycogen accumulation in the heart, skeletal muscle, and central nervous system (CNS). AAV vector-mediated gene therapy is expected to be a breakthrough in the treatment of Pompe disease. In this study, AAV9 vector was used to mediate GAA gene transfer in Pompe disease model mice, and the changes of GAA protease activity, glycogen accumulation in tissues and pathological changes in mice after transgenic intervention were evaluated. Methods: Codon optimized GAA gene (coGAA) was carried by AAV9 vector, and the AAV vector was packaged by baculovirus production process. Adult Pompe model mice were given a single intravenous injection at the dose of 1.1×10¹³, 3.0×10¹³, 1.2×10¹⁴ vg/kg, and aged Pompe model mice were given a single intravenous injection at the dose of 3.0×10¹³ vg/kg. After reaching the end point of the experiment, the mice were euthanized, GAA protease activity was determined by fluorescence spectrophotometry, glycogen accumulation was observed by PAS staining, and pathological changes were detected by HE staining. Results: Five weeks after administration, GAA protein was widely expressed in all tissues of adult model mice, with higher expression levels in heart and liver, and lower expression levels in brain and spinal cord. After rAAV9-coGAA treatment, glycogen content in myocardium, skeletal muscle and brain decreased, and vacuolar degeneration in myocardium and skeletal muscle decreased significantly. After treatment, the tissue enzyme activity of the aged animals was significantly increased compared with that of the model mice. The vacuolar degeneration and inflammatory cell infiltration of the myocardium were decreased, but the pathological improvement of skeletal muscle was limited. Conclusion: A single intravenous injection of rAAV9-coGAA can enhance GAA enzyme activity, reduce glycogen accumulation and improve pathology in Pompe model mice. The therapeutic effect was dose-dependent, and the injection also had certain therapeutic effect on aged animals. This study laid a theoretical foundation for the clinical application of AAV9 mediated gene therapy via intravenous route in Pompe disease.     

rhGM-CSF联合氨磷汀治疗放射性口腔黏膜炎的临床疗效及对外周血淋巴细胞亚群的影响

摘要 目的：研究重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）联合氨磷汀治疗放射性口腔黏膜炎患者的临床治疗疗效以及对外周血淋巴细胞亚群的影响。方法：选取2019年1月到2020年12月在我院接收治疗的放射性口腔黏膜炎患者60例,随机分为对照组和rhGM-CSF组两组,每组30例。对照组接受静脉滴注氨磷汀治疗,rhGM-CSF组接受rhGM-CSF漱口液漱口联合静脉滴注氨磷汀治疗。比较两组患者临床治疗疗效、治疗后口腔黏膜炎评分、疼痛评分、吞咽功能、血清炎症因子以及外周血淋巴细胞亚型。结果：（1）rhGM-CSF组患者临床治愈率和治疗总有效率分别为26.67 %和90.00 %,均高于对照组6.67 %临床治愈率和70.00 %临床治疗总有效率（P<0.05）。（2）治疗后,rhGM-CSF组口腔黏膜炎评分、疼痛评分、吞咽功能、血清干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子（TNF-α）和白介素-6（IL-6）含量均显著低于对照组患者（P<0.05）。（3）rhGM-CSF组患者治疗后外周血CD3⁺T淋巴细胞与对照组比较无差异（P>0.05）,外周血CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞亚群显著高于对照组患者,而CD8⁺T淋巴细胞亚群显著低于对照组患者（P<0.05）。结论：rhGM-CSF漱口液联合静脉滴注氨磷汀治疗治疗放射性口腔黏膜炎临床疗效更优,有助于减轻患者外周血炎症反应,增强细胞免疫功能。     

血清嗜酸性粒细胞表达水平与鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤病理的相关性分析

摘要 目的：探讨血清嗜酸性粒细胞（EOS）表达水平与鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤（SNIP）病理的相关性。方法：选取我院2016年1月至2020年1月收治的63例SNIP患者作为研究对象,依照所有患者EOS水平将其分为低EOS组、中EOS组、高EOS组,对比三组患者的临床病理特征,并分析EOS表达水平与SNIP病理的相关性。行手术治疗后将63例患者分为预后不良组与预后良好组,对比两组患者的临床相关指标,并分析EOS表达水平对SNIP的预后预测价值。结果：三组患者临床分期、病理诊断对比差异显著（P＜0.05）;以EOS表达水平进行分级：高水平：＞300个/μL,中水平：100-300个/μL,低水平：＜100个/μL。Spearman相关分析结果显示：性别、年龄、病灶位置与EOS表达水平无明显相关性（P＞0.05）,临床分期、病理诊断与EOS水平呈负相关（P＜0.05）;预后良好组与预后不良组患者PLT水平对比无明显差异（P＞0.05）,预后两组患者L、EOS水平明显高于预后不良组,N、PLR、NLR低于预后不良组（P＜0.05）;logistic回归分析结果表明：NLR、EOS为SNIP的预后独立预测因素（P＜0.05）。结论：SNIP患者的临床分期、病理诊断与EOS表达水平呈负相关,且应用NLR和EOS可对SNIP术后复发情况进行预测,因此,可以考虑应用EOS表达水平对SNIP进行诊断与治疗效果判定。     

嗜热古菌Infirmifilum uzonense来源的双功能高温β-葡萄糖苷酶IuBgl3的原核表达及酶学性质分析

β-葡萄糖苷酶在食品、医药、生物质转化等领域具有重要的应用价值,因此发掘适应性强、性质优良的β-葡萄糖苷酶是国内外研究热点。本研究从嗜热古菌Infirmifilum uzonense中成功克隆出一个GH3家族的β-葡萄糖苷酶基因,命名为Iubgl3。基因序列分析显示Iubgl3全长为2109bp,编码702个氨基酸,理论分子量为77.0kDa。将该基因在大肠杆菌中进行克隆表达并对纯化后的IuBgl3进行酶学性质研究。结果显示,重组酶IuBgl3最适pH5.0,最适温度85℃。该酶具有良好的热稳定性,80℃处理2h后仍能保持85%以上的酶活力。其具有优良的pH稳定性,在pH4.0−11.0范围内处理1h,仍维持85%以上的酶活力。通过底物特异性测定发现,该酶对对硝基苯-β-d-吡喃葡萄糖苷(p-nitrophenylβ-d-glucoside,pNPG)和对硝基苯-β-d-吡喃木糖苷(p-nitrophenyl β-d-xylopyranoside,pNPX)均有很高的水解能力,是典型的双功能酶。以pNPG为底物时的动力学参数K_m和V_max分别为0.38mmol和248.55μmol/(mg·min),催化效率k_cat/K_m=6149.20s⁻¹mmol⁻¹。大多数金属离子对IuBgl3的酶活力没有显著影响,SDS可导致酶完全失活,而EDTA却能提高30%的酶活力。本研究丰富了高温古菌GH3家族的β-葡萄糖苷酶基因,获得了一个稳定性优良的高温酸性双功能酶,具有良好的工业应用前景。     

双氢青蒿素对嗜热四膜虫的毒性效应

以嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)为试验对象, 双氢青蒿素(Dihydroartemisinin, DHA)以终浓度为0(对照组)、40、80、160和320 μmol/L 分别加入到嗜热四膜虫细胞培养液中, 探讨双氢青蒿素对嗜热四膜虫的毒性作用。采用 CCK-8 法检测嗜热四膜虫细胞增殖, 倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞的形态结构及运动, 采用流式细胞术检测线粒体膜电位, 检测细胞内抗氧化还原酶活力和线粒体酶活力。结果表明, DHA显著抑制嗜热四膜虫增殖(P＜0.05), 在一定暴露时间内增殖活力和浓度呈负相关。双氢青蒿素作用嗜热四膜虫48h后各暴露组细胞皱缩变圆, 对照组细胞呈椭圆状。其中在160和320 μmol/L DHA暴露下, 嗜热四膜虫在培养基中的活动减弱, 细胞核出现固缩和浓染等特征, 线粒体膜电位显著下降(P＜0.05)。随着 DHA浓度增加, 细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性先增强后下降。线粒体内琥珀酸脱氢酶(SDH)活性逐渐降低, 与对照组相比, 差异均有统计学意义(P＜0.05)。上述结果表明, 双氢青蒿素对嗜热四膜虫具有毒性作用, 抗氧化酶在一定程度上能抵抗双氢青蒿素暴露导致的氧化损伤。氧化应激和线粒体损伤可能是双氢青蒿素对嗜热四膜虫产生毒性效应的重要机制。