全文获取类型
收费全文 | 816篇 |
免费 | 47篇 |
国内免费 | 320篇 |
出版年
2024年 | 3篇 |
2023年 | 14篇 |
2022年 | 20篇 |
2021年 | 19篇 |
2020年 | 19篇 |
2019年 | 21篇 |
2018年 | 24篇 |
2017年 | 18篇 |
2016年 | 19篇 |
2015年 | 27篇 |
2014年 | 37篇 |
2013年 | 31篇 |
2012年 | 40篇 |
2011年 | 50篇 |
2010年 | 42篇 |
2009年 | 47篇 |
2008年 | 82篇 |
2007年 | 62篇 |
2006年 | 54篇 |
2005年 | 66篇 |
2004年 | 50篇 |
2003年 | 41篇 |
2002年 | 55篇 |
2001年 | 73篇 |
2000年 | 29篇 |
1999年 | 25篇 |
1998年 | 31篇 |
1997年 | 14篇 |
1996年 | 17篇 |
1995年 | 24篇 |
1994年 | 29篇 |
1993年 | 13篇 |
1992年 | 20篇 |
1991年 | 14篇 |
1990年 | 7篇 |
1989年 | 11篇 |
1988年 | 5篇 |
1987年 | 10篇 |
1986年 | 2篇 |
1985年 | 8篇 |
1984年 | 3篇 |
1983年 | 1篇 |
1982年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
1955年 | 4篇 |
排序方式: 共有1183条查询结果,搜索用时 439 毫秒
991.
收集40例内镜确诊为胃十二指汤溃疡病人,随机分成两组,分别予泰胃美、奥美拉唑口服;干服药后分别行胃检查,并抽吸胃液行需氧菌、厌氧菌及真菌培养。结果示:胃液细菌量及硝酸盐还原菌量与胃液PH值呈正相关。 相似文献
992.
利用PCR突变方法,改造了人白细胞介素-3(hIL-3)cDNA,在成熟蛋白编码顺序5'端前突变入了XbaⅠ酶切位点和酵母类胰蛋白酶加工位点Lys-Arg的密码子。改造后的hIL-3cDNA插入大肠杆菌-酵母穿梭质粒pVT102u/α,使其准确融合于α-交配因子前导序列之后,并置于启动子ADH1调控之下。转化入酿酒酵母宿主菌S-78筛选后,30℃培养48h,上清能明显促进hIL-3依赖细胞TF-1生长。上清中分泌表达的hIL-3经ELISA鉴定并定量,其表达量大于1.0mg/L。3H-TdR掺入法测定上清中hIL-3活性为1.8×103u/ml。 相似文献
993.
在渗透势为-0.5和-1.0MPaPEG处理下,不抗旱的郑引一号小麦根PMH+-ATPase活性分别下降45%和65%,抗旱品种陕合六号则增加了11%和12%。小麦根组织H+分泌与PMH+-ATPase活性的变化趋势基本一致,即随着胁强增加,郑引一号H+分泌下降,陕合六号H+分泌是先升高后略降。Na3VO4和DCCD对H+分泌有不同程度的抑制,品种之间没有明显的差异。外源电子受体Fe(CN)63-的加入促进了小麦根H+分泌,陕合六号增加25%-39%,郑引一号增加21%-45%。与此同时,Na3VO4没有表现出对H+分泌的抑制作用。 相似文献
994.
本文利用血小板表面外露的GMP-140为血小板分泌反应的特异性标志,通过放射免疫分析法定量测定血小板表面GMP-140分子数,研究了细胞骨架抑制剂对凝血酶导血小板分泌反应的影响。结果表明,凝血酶激活使血小板表面GMP-140的外露明显增加,反应迅速,并在一定范围内呈剂量和时间依赖性;而ADP刺激则几乎不引起GMP-140外露的增加。凝血酶激活前加入不同的细胞骨架抑制剂处理可产生不同的效应:细胞松驰 相似文献
995.
应用PCR重组技术构建大肠杆菌分泌型表达载体 总被引:1,自引:0,他引:1
应用PCR重组技术,对大肠杆菌分泌型表达载体pIN-ⅢompA进行改建,除去原载体的HindⅢ位点,将信号肽序列末端两个密码子CAG GCC改为CAA GCT,从而引入一个新的HindⅢ位点,并在其下游接上一段多克隆位点序列,改建后的载体可用于直接插入外源DNA编码序更,表达产物在分泌过程中被切除信号肽而成为天然有活性的蛋白质,操作十分简便。 相似文献
996.
人α降钙素基因相关肽基因在酵母细胞中的分泌表达与产物的分离纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
化学合成的人α降钙素基因相关肽(CCRP)基因用PCR法改造后使其能正确融合在酵母分泌型表达载体pVT102U/α中的α交配因子前导肽序列之后,然后进行克隆并转化酵母宿主菌S-78进行表达.培养物的上清用酶标(ELlSA)鉴定为阳性,而对照S-78、pVT102u/α为阴性,表达量用ELISA定量大于2mg/L。表达产物经阳离子交按层析(CM—Sphadex C25)和HPLC纯化得到了HPLC纯产品。纯化后的CGRP能引起小鼠血压的降低,说明表达的目的蛋白既有CGRP的免疫结合活性,又有CGRP的生理活性。测定其N-端10个氨基酸序列,证明人工合成的CGRP基因在酵母细胞中已正确表达。 相似文献
997.
人a降钙素基因相关肽基因在酵母细胞中的分泌表达与产物的分… 总被引:2,自引:0,他引:2
化学合成的人a降钙素基因相关肽(CGRP)基因用PCR法改造后使其能正确融合在酵母分泌型表达载体pVT102U/a中的a交配因子前导肽序列之后,然后进行克隆并转化酵母宿主菌S-78进行表达,培养物的上清用酶标(ELISA)鉴定为阳性,而对照S-78、pVT102U/a为阴性,表达量用ELISA定量大于2mg/L。表达产物经阳离子交换层析(CM-Sephadex C25)和HPLC纯化得到了HPLC 相似文献
998.
【目的】微孢子虫是一种营专性细胞内寄生的微生物,它可以感染几乎所有动物种类,包括人类和重要的经济动物。本研究对家蚕微粒子虫分泌蛋白己糖激酶(Nosema bombycis hexokinase, NbHK)在家蚕胚胎细胞中表达特征、亚细胞定位、调控作用和宿主互作蛋白质进行了系统分析,为阐明该蛋白在侵染中的作用与机理提供参考。【方法】利用原核表达蛋白免疫小鼠,制备NbHK的多克隆抗体,并利用Western blotting和间接免疫荧光法分析家蚕微粒子虫在感染的家蚕胚胎细胞(Bombyx mori embryo, BmE)中的表达和定位;通过过表达和RNA干扰实验,分析NbHK对病原增殖的作用;利用RNA-seq分析NbHK调控的家蚕基因表达和通路;利用生物素-链霉亲和素系统和质谱技术,从NbHK::APEX2转基因细胞中分离鉴定NbHK的互作蛋白。【结果】在感染家蚕微粒子虫的BmE中,NbHK持续上调表达,主要被定位于宿主细胞核内。过表达NbHK显著促进了病原增殖,而敲低NbHK则明显抑制了病原增殖,说明在NbHK感染过程中发挥关键作用。利用RNA-seq分析鉴定了94个差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs),其中58个基因上调,36个基因下调。DEGs的富集分析显示,细胞寿命和内质网蛋白加工通路受到显著激活,而线粒体自噬途径受到明显抑制。互作蛋白鉴定分析发现,NbHK可能与宿主细胞核内的核蛋白易位启动子区(nucleoprotein translocated promoter region, NTPR)等蛋白间存在相互作用。【结论】NbHK主要被定位至家蚕细胞核中,调控家蚕细胞寿命等多个重要通路的基因表达,以利于病原增殖。本研究为深入解析NbHK在感染过程中的功能及其调控机理提供了新的参考。 相似文献
999.
本實驗比較急性實驗狗、慢性胰瘻狗和經過麻醉的慢性胰屢狗對於鹽酸注入小腸所引起的胰液分泌量和潛伏期,結果證明: (1)在急性實驗情况下,狗胰腺對鹽酸刺激小腸所引起的胰液分泌量遠較在慢性實驗時為少,且潛伏期較長。 (2)巴比妥類麻醉劑:硫賁妥鈉(sodium pentothal)和戊烷巴比妥鈉(sodiumpentobarbital)對鹽酸所引起的胰液分泌量及潛伏期影響極微。 (3)在急性實驗情况下,由鹽酸所引起的胰液分泌量的減少和潛伏期的加長,似乎不是由於巴比妥類麻醉劑的作用,而可能是由於手術創傷的影響。 (4)注射阿托平後,胰腺對於鹽酸刺激小腸所引起的反應顯著减小,故推测在鹽酸引起胰液分泌的機制中可能有神經反射作用的參與。本工作在进行過程中,承蘇聯專家同志親切地給予指導,并承沈(?)淇、劉曾復二教授关懷和支持,(?)此誌謝。 相似文献
1000.
中国芸香科植物叶分泌囊比较解剖学研究 总被引:6,自引:0,他引:6
利用整体透明、石腊和薄切片方法对芸香科22属,40种和2变种植物叶分泌囊的形态结构和分
布进行了比较研究。成熟分泌囊都由鞘细胞和一层上皮细胞围绕圆形腔隙构成,上皮细胞扁平,细胞壁
薄、完整,故分泌囊属裂生方式发生。鞘细胞1~5层,不同种类的层数有变化,个别种缺乏。内层鞘细
胞为扁平的薄壁细胞,外层的细胞壁较厚。分泌囊的形态结构、着生位置和分布密度等在不同属或不同
种间存在一定差异。根据分泌囊在叶中的分布位置和形态结构特点,可将其划分为:叶缘齿缝分泌囊,
叶肉分泌囊和两者混合型。叶肉分泌囊又可分海绵组织分泌囊和栅栏组织分泌囊。在此基础上对该科各类型分泌囊的形态演化关系以及各亚科或各属间的亲缘关系进行了探讨。 相似文献