DL—1—(2,6—二甲基苯氧基)—2——氨基丙烷氨基酸衍生物的研究

<正> DL—1—(2,6—二甲基苯氧基)—乙—氨基丙烷盐酸盐,商品名为慢心律(Mcxiletine)是七十年代进行临床研究的一个抗心律失常药物。目前国内外广泛用于临床,其特点是可以长期口服治疗和预防室性心律失常。根据国内外近十年的临床观察,若用量超过600—800mg/日,则有明显副作用如神经兴奋、噁心、复视、抽搐、振颤等。为了寻找更理想的抗心律失常药物,国内外已做过一些慢心律的类似物供药理筛选研究。本文是从前体药物的角度以慢心律自由碱DL—1—(2,6—甲基苯氧基)—2—氨基丙     

丁氏双鳍电鳐电器官烟碱样胆碱能受体的分离提纯

本文用湖南眼镜蛇神经毒素为配基偶联的AH-Sepharose 4B毒素型亲和凝胶从国产丁氏双鳍电鳐电器官中提纯了烟碱样胆碱能受体(N-ChR)。提纯123倍,产率5.4%,比结合力5.411nmole毒素结合部位/mg受体蛋白,每毫升湿胶可制备受体蛋白0.037毫克。AH-Sepharose 4B的亲和分离效能与CN-Sepharose 4B无明显差别。用AH-Sepharose 4B毒素型亲和凝胶提纯的N-ChR经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白区带。SDS凝胶电泳主要显示四个亚基,分子量分别为4.1、4.7、5.6及6.7万道尔顿。丁氏双鳍电鳐电器官N-ChR与其他种属电鱼电器官N-ChR的亚基近似。     

鲤鱼生长激素基因的PCR扩增、克隆及其序列比较

从鲤鱼(Cyprinus carpio)脑垂体中分离其总RNA,经反转录成为第一条链cDNA。以第一条链cDNA为模板,以合成的两段29个寡聚核苷酸为引物,再经过PCR扩增,合成了鲤鱼的生长激素基因,并把其克隆到大肠杆菌表达载体(P^{blue-ocripx Ks+/-})上。序列分析和限制酶切图谱表明所克隆的鲤鱼生长激素基因的开放读框含有630bp,编码210个氨基酸,其中含有22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟GH序列。我们所克隆的鲤鱼GH基因与Koren发表的鲤鱼GHcDNA的序列在编码区完全一致,但是与chao发表的鲤鱼GHcDNA比较,在编码区核酸序列和氨基酸序列的同源性分别为95．6％和96．7％。     

Expression of human transforming growth factor β1 in E. coli (I) --Direct expression in cytoplasm

Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβｓ(ＴＧＦβｓ)ａｒｅａｆａｍｉｌｙｏｆｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｐｒｏｔｅｉｎｓｏｎｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ.Ｔｈｅｙａｒｅａｌｓｏｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎａｌｍｏｓｔａｌｌａｓｐｅｃｔｓｏｆｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｃｅｓｓｅｓ;ｔｈｅｙｈａｖｅｗｉｄｅｓｐｒｅａｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄｐｒｏｆｏｕｎｄｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｐｏｔｅｎｔ…     

甜菜碱稳定PSⅡ放氧中心外周多肽机理

用不同理化因子处理PSⅡ膜颗粒 ,研究甜菜碱对它们释放放氧外周多肽的影响 .结果表明 ,甜菜碱对高浓度NaCl以及 0 .8mol/LTris( pH8.0 )处理引起的放氧外周多肽脱落具有保护作用 .而对三氯乙酸钠 (TCA)和高温处理不具有保护能力 .用几种卤代乙酸钠处理PSⅡ膜颗粒 .发现它们去除放氧外周多肽的能力依次是三氯乙酸钠 (TCA) >二氯乙酸钠 (DCA) >一碘乙酸钠 (MIA) >一溴乙酸钠(MBA) >一氯乙酸钠 (MCA) .卤代乙酸钠去除外周多肽的能力随分子疏水性增强而增大 .表明甜菜碱对于电解质引起的放氧外周多肽释放具有稳定作用 ,而对疏水作用引起的外周多肽脱落可能不具有明显保护功能 .     

四氢小檗碱的中枢抑制作用与GABA受体无关

应用蚯蚓背肌收缩反应,证实四氢小檗碱（ＴＨＢ,１０－７－１０－４ｍｏｌ／Ｌ）不能影响ＧＡＢＡ和ＡＣｈ两种受体的功能,多巴胺受体阻滞剂氟哌啶醇（ＨＡＬ）亦不能影响它们。由于异烟肼（ＩＮＨ）和氨基硫脲（ＴＳＣ）抑制ＧＡＢＡ的生物合成,印防己毒素（ＰＴ）和毕枯枯灵（Ｂｉｃ）作用于ＧＡＢＡ－ＢＺ受体复合体,它们都使小鼠产生惊厥,该作用能被氨基氧乙酸（ＡＯＡＡ）和安定（ＢＺ）所拮抗,但ＴＨＢ和ＨＡＬ却不能。由此表明前述ＴＨＢ的中枢抑制作用与ＧＡＢＡ抑制无关。     

神经生长因子的发光免疫分析法

介绍了一种灵敏的神经生长因子化学发光免疫测定方法。小鼠神经生长因子（ｍＮＧＦ）的抗体ＩｇＧ用亲和层析纯化并用吖啶酯标记。该法可用于大鼠组织中ＮＧＦ含量的测定。方法的灵敏度为１０ｐｇ／ｍＬＮＧＦ;批内批间变异系数分别为８．７％及１３．２％;回收率平均为１０３％。ｍＮＧＦ抗体对人的ＮＧＦ也有极强的交叉反应,故本方法也可能用于病人血清或脑脊液中ＮＧＦ含量的测定。     

肝素结合的EGF样生长因子成熟肽的基因克隆

采用PCR方法扩增出肝素结合的EGF样生长因子(HB-EGF)成熟肽的cDNA。该cDNA用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后,回收含HB-EGF成熟肽基因长约270bP的DNA片段,插入经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切的pUC18载体中,进行序列分析。结果表明所扩增出的片段与原设计完全一致。     

抗人表皮生长因子受体单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

 用人上皮癌细胞系A 431细胞作为抗原免疫BalB/c小鼠,制备七株抗人表皮生长因子受体的单克隆抗体的杂交瘤,这些杂交瘤经三次亚克隆后仍能稳定地分泌单克隆抗体。对其中四株杂交瘤分泌的单克隆抗体进行了鉴定。免疫沉淀放射自显影结果示单克隆抗体3、101和176均可识别A 431细胞膜抗原MW为170000的蛋白质即EGF受体。单克隆抗体59可以识别低分化鼻咽癌细胞膜上EGF受体。单抗3、176和59等可抑制EGF与受体的特异结合,而101和94则不能抑制EGF与受体的结合。 用Protein-A Sepharose CL4B纯化了单抗,纯化的单抗主要为IgG_1亚类。用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳对纯化的单抗进行了纯度测定。