Chitosan-DTPA-Gd舌间质磁共振淋巴造影显示兔颈淋巴的研究

目的：探讨磁共振间质淋巴造影剂Chitosan-DTPA-Gd经舌黏膜下注射后,显示颈淋巴的应用价值。方法：选取健康成年纯种新西兰大白兔12只,麻醉并仰卧位固定磁共振平扫,再于每只兔双侧舌缘中后交界处粘膜下各注射0.1 mL造影剂,注射部位按摩30秒,按摩后5、10、15、20、25、30、35、40 min行三维增强磁共振淋巴造影成像,测量增强前后不同时间颈部淋巴结的信号强度（SI）,计算相对应的信号强化率（E%）,采用SPSS软件进行数据的统计学分析。结果：Chitosan-DTPA-Gd于兔双侧舌缘粘膜下注射后很快吸收进入颈部淋巴引流区,淋巴结及淋巴管明显、均匀的强化,血管无显影。颈部淋巴结于注射后15 min信号强度达到峰值,并可保持一段时间,25 min后信号强化率开始明显降低,40分钟后淋巴系统显影与周围组织无差别。结论：间质磁共振淋巴造影剂Chitosan-DTPA-Gd用量小,强化效应明显,能够有效的显示颈部淋巴结形态及淋巴管走形。     

基于MODIS的中国草地NPP综合估算模型

草地生态系统是陆地生态系统分布最广的生态系统类型之一,其碳储量的估算在全球变化中的作用越来越受到重视。为了快速、便捷地实现中国草地净初级生产力(NPP)的估算,在获取野外调查资料与同期遥感影像数据的基础上,利用归一化植被指数(NDVI)以及气候数据,构建了草地NPP综合估算模型。模型包括叶面积指数(LAI)和光合累积量(PA)两个子模型,其中LAI子模型利用了遥感数据NDVI,PA子模型利用了温度、降水和辐射等气候数据。通过建模以外独立的实测数据的验证,模拟值与实测值之间有很好的相关性,R2为0.8519,相关性达到极显著水平。RMSE和RRMSE均较小,表明模型的模拟结果比较可靠。同时模拟值与实测值之间的平均相对误差仅为1.97%,模拟结果的准确度较高,因此利用上述模型估算中国草地NPP是可行的。以上结果为中国草地NPP估算提供了新的方法。     

杜鹃红山茶的传粉生物学

杜鹃红山茶(Camellia changii)为中国特有的濒危植物,仅见于广东省阳春市鹅凰嶂自然保护区内。对该保护区杜鹃红山茶自然种群进行了杂交指数(OCI)、花粉-胚珠比(P/O)和控制授粉试验研究,探讨其致濒原因。结果表明:杜鹃红山茶的繁育系统为专性异交型,自交不亲和,为典型的虫媒传粉型植物;在自然条件下,其子房败育率高达64%;杜鹃红山茶种群的花柱呈长度分化:20%为长花柱型(L型),76%为短花柱型(S型);杜鹃红山茶的有效传粉昆虫主要为蝶类和蜂类,但昆虫的访花频率较低。综合以上结果,杜鹃红山茶的濒危原因可能包括2个方面,一是自交不亲和性和花柱异长现象导致子房败育率高,二是传粉昆虫访花频率低导致自然结实率低。     

穴蚁蛉幼虫全长均一化cDNA文库的构建

通过构建穴蚁蛉幼虫(俗称蚁狮)全长均一化cDNA文库,以期了解蚁狮的抗菌肽、毒素蛋白以及其它药用蛋白种类,为日后筛选、克隆表达和分离纯化这些药用蛋白奠定基础.用针刺诱导蚁狮产生抗茵物质后,分离纯化总RNA,结合SMART全长文库与DSN(duplex-specific nuclease)均一化技术,构建全长均一化cDNA文库,并通过平板计数和菌落PCR方法鉴定文库.随机挑选192个单克隆进行5′端测序,并与NCBI数据库进行比对分析.结果显示,构建出的文库平均插入片段长度为1 200bp,原始文库的滴度达到7.5×105 CFU/mL,而扩增文库则为1.95×1011CFU/mL.在所挑选的单克隆中,共获得190条有效序列,平均读长1 340 bp,文库重组率达到98.96%.与NCBI数据库比对后发现,这些序列可能是一些编码蚁狮免疫、消化及毒性蛋白的基因.     

不同石斛兰香气成分的GC-MS分析

利用GC/MS技术分析了四种石斛兰Dendrobium Nora Tokunaga、Dendrobium Green Lantern、Dendrobium Spider Lily和Dendrobium Little Green Apples花朵的香气成分.结果表明,四种石斛兰香气成分的种类和含量存在明显差异,其中Den...     

DNA聚合酶与引物/模板的相互作用对PCR效率的影响

PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。传统的PCR引物设计软件基本上忽略了DNA聚合酶与引物/模板的亲和性对PCR效率的影响。为揭示DNA聚合酶与引物/模板的相互作用是否对PCR的效率有影响,通过构建Taq DNA 聚合酶与不同序列引物/模板DNA相互作用的三维结构模型,采用MM/GBSA方法计算复合物的结合自由能,以结合自由能为参数,为人血清白蛋白基因(Human Serum Albumin gene,HSA gene)和结核杆菌pyrF基因(Mycobacterium tuberculosis pyrF gene)设计了PCR引物。PCR实验结果表明,引物的PCR效率与结合自由能相关：引物与聚合酶的结合自由能越低,PCR实验的效率相对越高。这说明DNA聚合酶与引物/模板的相互作用对PCR效率有重要影响。因此,引物/模板DNA与聚合酶的结合自由能可以作为PCR引物设计的新参数。     

螺旋粉虱成虫体内细菌群落多样性的PCR-DGGE 和16S rRNA文库序列分析

为了解螺旋粉虱Aleurodicus dispersus体内细菌多样性和主要优势菌群结构, 用PCR-DGGE和16S rRNA文库对采自于海南省番石榴上螺旋粉虱雌、 雄成虫体内的细菌群落进行了分析。用PCR扩增体内细菌16S rRNA基因, 构建雌、 雄虫克隆文库; 再用限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism, RFLP）方法从文库中筛选不同16S rRNA基因图谱, 根据图谱对克隆子进行分型。从螺旋粉虱雌、 雄两个样品中共获得10 种分类操作单元(operational taxonomic unit, OTUs)。以16S rRNA基因为基础构建系统发育树, 系统发育分析表明, 螺旋粉虱雌、 雄成虫体内优势菌群主要为发酵菌属Zymobacter, 杀雄菌属Arsenophonus, 泛菌属Pantoea和假单胞菌属Pseudomonas。Candidatus Portiera aleyrodidarum和Arsenophonus sp.可能为其体内共生菌群, 在所有样品中均可稳定地检测到。这些微生物可能对螺旋粉虱生长发育、 繁殖和性比调控起到重要的协同作用。     

保幼激素类似物对斜纹夜蛾核型多角体病毒在宿主血淋巴中增殖动态的影响

通过研究保幼激素类似物(juvenile hormone analogues, JHA) methoprene对斜纹夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus, SpltNPV）在宿主血淋巴中增殖的影响,以探明JHA促进 SpltNPV增殖的初步机制,为阐明JHA促进病毒增殖提供更全面的理论依据。应用SDS PAGE及Western blot法,分析了methoprene对SpltNPV多角体蛋白(polyhedron, POLH)在宿主斜纹夜蛾6龄幼虫血淋巴中合成的影响。结果表明：经methoprene处理后2～3天可明显促进幼虫血淋巴液中POLH的合成。在此基础上,通过荧光定量PCR检测,发现methoprene对SpltNPV在幼虫血淋巴液复制的影响主要发生在处理后的第4和第5天,该期间polh基因的拷贝数比对照显著增加,拷贝数的峰值达1.22×10¹⁰/mL。     

重组人TGF-β3的表达纯化及复性研究

利用大肠杆菌表达重组人转化生长因子β3(humantransformgrowthfactor,hTGFβ3),目的蛋白以包涵体形式表达。用8mol/L尿素溶解的包涵体蛋白,经CMSepharoselFastFlow柱和SphacrylS100分子筛可获得纯度达90%以上的rhTGF-β3单体。将单体蛋白加到复性缓冲液(1mol/LNaCl,0.5mol/LLArg,0.5mmol/LGSSG,30mmol/LCHAPS,20%(v/v)DMSO)进行复性后,再经DEAESepharoselFastFlow柱和SphacrylS100分子筛可分离得到纯度达94%的二聚体rhTGFβ3,纯化后的产量为720mg/L,纯化总回收率为47%。MTT法测活表明,该重组蛋白具刺激成纤维细胞Balb/c3T3生长的作用。     

螺旋粉虱产卵行为及产卵分泌物的形态和化学成分

螺旋粉虱Aleurodicus dispersus Russell具独特的产卵过程--成虫将卵产在叶片上排列成螺旋状并覆盖丝状蜡泌物。本研究利用数码摄像机拍摄记录螺旋粉虱的产卵过程,并采用体视显微镜、扫描电镜及气相色谱/质谱联用研究产卵分泌物的结构和化学成分。结果表明：单头雌成虫产卵时可形成典型螺旋轨迹,当其他雌成虫加入产卵时,其产卵行为包括跨越螺旋轨迹后继续在外围扩大螺旋圈、仅在螺旋轨迹表面穿过及在螺旋轨迹外围直接产卵3种情况。 在体视镜及扫描电镜下产卵分泌物呈交错的白色丝状结构。 另用GC/MS联用检测仪检测发现产卵分泌物主要是一些饱和长链烃（66.21%）和芳香酯类（26%）,同时有少量酸和酚。 其中烃类化合物含有3种碘代物（10.64%）,其他为直链烃类,碳原子数介于C₈～C₃₀;芳香酯类化合物有3种,碳原子数介于C₁₆～C₂₄,其中含量最大的是邻苯二甲酸二丁酯（21.19%）。 最后讨论了产卵分泌物在吸引初孵爬虫、抵御天敌及阻碍其他植食性者进入螺旋圈的可能性。