铜绿假单胞菌生物膜藻酸盐成分的致病作用

生物膜（biofilm,BF）是细菌在生长过程中,为适应生存环境而吸附于惰性或活性材料表面形成的一种与浮游细胞相对应的生长方式。由细菌和自身分泌的胞外基质组成。近年来,随着内置式医疗器材（如导尿管,气管插管,人工心脏瓣膜等）的广泛应用,临床上BF相关感染日益增多。研究发现,BF细菌群体耐药性极强（甚至可以达到其浮游状态的1000倍）,     

宫颈HPV16持续感染阶段宫颈P16和Ki67的表达及其与宫颈癌变的关系

目的:探讨宫颈人乳头状瘤病毒(HPV)16持续感染阶段宫颈P16和Ki67的表达及其与宫颈癌变的相关性。方法:采用P16/Ki67免疫组化双染法检测102例HPV16持续感染者、136例非持续感染者宫颈组织P16、Ki67蛋白的表达,并根据免疫组化结果分组为双染阳性组、双染阴性组。所有患者随访观察2年,比较两组患者的结局及宫颈癌前病变的发生率。结果:P16、Ki67及P16/Ki67双染的阳性率分别为40.3%、44.5%及34.0%,HPV16持续感染患者P16、Ki67及P16/Ki67双染的阳性率均显著高于非持续感染患者(P0.05)。HPV16持续感染患者的P16、Ki67蛋白表达呈显著正相关(P0.05)。HPV16持续感染患者中,双染阳性组的病情持续和进展比例明显高于双染阴性组,也明显高于HPV16非持续感染(双染阴性组、双染阳性组)患者(P0.05)。HPV16持续感染患者中,双染阳性组进展为HSIL及以上病变发生率为32.5%(13/40),显著高于双染阴性组6.5%(P0.05)。结论:P16,Ki67双染阳性在HPV16持续感染阶段与宫颈上皮内病变疾病进展成正相关,对HPV16持续感染进展为宫颈高度病变有预警价值,可作为HPV16阳性早期治疗的敏感指标。     

卵巢癌细胞中RhoA和NF-κB表达与癌细胞增殖、侵袭能力的关系

目的:探讨卵巢癌细胞中RhoA和NF-κB表达与癌细胞增殖、侵袭能力的关系。方法:采用RT-PCR和Western blot检测卵巢癌细胞A2780、SW626、Skow3和正常卵巢上皮HOSEA中RhoA和NF-κB的表达;MTT法测定A2780、SW626、Skow3的增殖能力;Transwell小室体外侵袭实验检验细胞侵袭能力。结果:三种卵巢癌细胞中RhoA与NF-κB的表达无差异,但均高于正常卵巢上皮HOSEA中表达(P0.05);MTT实验结果显示在24 h、48 h、72 h、96 h、120 h时间点,过表达RhoA组和NF-κB组吸光光度值大于对照组(P0.05);RhoA转染后,A2780、SW626、Skow3、HOSEA 4种细胞的穿膜细胞数测值分别是33.56±12.42、56.21±9.53、25.53±11.89、0,说明SW626侵袭力最强,HOSEA无侵袭力(P0.05),不同细胞间侵袭力存在差异,且具有统计学意义(P0.05)。NF-κB转染后,A2780、SW626、Skow3、HOSEA 4种细胞的穿膜细胞数分别为22.53±12.57、33.90±10.12、45.91±9.02、0,其中穿膜细胞数最多的是Skow3细胞,不同细胞间穿膜细胞数比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:卵巢癌细胞中RhoA与NF-κB表达增加,可增强细胞增殖能力,并使细胞具有侵袭性。     

14-3-3蛋白参与植物应答非生物胁迫的研究进展

14-3-3蛋白是一种在真核生物细胞中普遍存在且高度保守的蛋白。该蛋白在大多数物种中由一个基因家族编码,并以同源或异源二聚体的形式存在。不同的14-3-3蛋白同工型具有不同的细胞特异性,可通过识别特异的磷酸化或非磷酸化序列与靶蛋白相互作用。14-3-3蛋白在植物生长和发育的各个方面都起重要作用。本文主要围绕植物14-3-3蛋白的种类、结构、磷酸化或非磷酸化识别序列及其响应干旱、冷冻、盐碱、营养和机械胁迫等的分子机制研究进展进行综述。     

基于rhaSR嵌合操纵子的构建及其在大肠杆菌中表达的研究

通过PCR等重组DNA技术,构建了含rhaSR启动子表达调控元件、RhaR基因、报告基因gst(谷胱甘肽-S-转移酶)的两个嵌合操纵子,并插入大肠杆菌表达载体pALEX中构成pALEX-PR1和pALEX-PR2。其中pALEX-PR2的RhaR基因上游为原有的SD序列,而pALEX-PR1的RhaR基因上游则插入了增强的SD序列。把这两个重组表达质粒分别转入大肠杆菌BL21(DE3)中,报告基因gst能够在L-鼠李糖诱导下表达,其表达量是非诱导条件下的4～5倍,且pALEX-PR1的表达量是pALEX-PR2的3.14倍。以上结果表明,gst的表达既受L-鼠李糖诱导,同时又受RhaR的正调控。SDS-PAGE结果显示,GST占大肠杆菌培养物总可溶蛋白的5.41%(W/W),平均1L培养物可获得3.0mg纯化的GST。酶活性分析表明,所构建的嵌合操纵子表达的GST保持了正确的构型且具有很高的活性。     

革兰阴性菌在儿科重症监护病房的分布及耐药性分析

目的分析儿科重症监护病房(PICU)常见革兰阴性(G~-)菌的分布特点及其对常用抗菌药物的耐药性情况,为合理使用抗生素提供参考。方法回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院重症医学科2013年1月至2015年2月临床分离的213株G~-菌进行耐药性分析。结果经培养共分离出的213株G~-菌,以呼吸道来源为主,占64.8%。常见G~-菌为铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽黄单胞菌。药敏结果显示细菌耐药性明显增强,阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亚种对美洛培南、亚胺培南敏感率为100.0%,对环丙沙星、左旋氧氟沙星、阿米卡星敏感性在70.3%以上;超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株检出率在76.7%以上。铜绿假单胞菌仅对环丙沙星、左旋氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、多粘菌素敏高度感度,敏感度在87.0%以上。鲍曼不动杆菌对美洛培南、亚胺培南、环丙沙星、左旋氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶相对敏感,敏感度在53.3%~73.3%;ESBLs检出率为76.7%。嗜麦芽黄单胞菌仅对左旋氧氟沙星、环丙沙星、复方新诺明相对敏感,敏感度在53.3%~73.3%,对美洛培南、亚胺培南100.0%耐药。结论 G~-菌耐药日趋严重,多为多重耐药。为避免耐药率上升,临床应合理使用抗生素。     

大鼠心肌线粒体肌酸激酶肌膜型亚基的克隆及其鉴定

根据以发表的大鼠心肌线粒体肌酸激酶肌膜型亚基基因（ｓＭｉＭｉＣＫ）的ｃＤＮＡ序列,设计并人工合成一对特异性引物,以大鼠心肌总ＲＮＡ为模板,反转录聚合酶链式反应（ＲＴＰＣＲ）扩增出一段编码大鼠心肌ｓＭｉＭｉＣＫ的ＤＮＡ片段（１．３３ｋｂ）,将该片段克隆到载体ｐＵＣ１９上并进行初步鉴定,然后进行测序分析,结果与国外以报道的序列完全一致,证明已得到ｓＭｉＭｉＣＫ基因,为今后ｓＭｉＭｉＣＫ基因的表达创造了良好的条件     

牙周炎的治疗对动脉粥样硬化特征的改善分析

通过进行系统回顾和分析,研究牙周炎治疗对改善动脉粥样硬化特征的稳定性。在Medline-PubMed、Cochrane CENTRAL和EMBASE中检索文献,基于牙周控制的干预实验(包括一个非干预组),来提取数据并进行荟萃分析。荟萃分析显示了hsCRP (-0.50 mg/L, 95%CI:-0.78;-0.22)、IL-6 (-0.48 ng/L, 95%CI:-0.90;-0.06)、TNF-α(-0.75 pg/mL, 95%CI:-1.34,-0.17)、纤维蛋白原(-0.47 g/L, 95%CI:-0.76;-0.17)、总胆固醇(-0.11 mmol/L, 95%CI:-0.21;-0.01)和有利于牙周干预的HDL-C (0.04 mmol/L, 95%CI:0.03; 0.06)之间的显著加权平均差异(WMD)。重要的是,伴有并发症的牙周炎患者大多从牙周治疗中获益;对于hsCRP(-0.71 mg/L, 95%CI:-1.05;-0.36)、IL-6 (-0.87 ng/L, 95%CI:-0.97;-0.78)、甘油三酯(-0.24 mmol/L, 95%CI:-0.26;-0.22)、总胆固醇(-0.15 mmol/L, 95%CI:-0.29;-0.01)、HDL-C (0.05 mmol/L, 95%CI; 0.03; 0.06)和Hb A1c (-0.43%, 95%CI:-0.60;-0.25)的水平观察到了显著的加权平均差异。牙周治疗可改善内皮功能,减少动脉粥样硬化性疾病的生物标志物,对那些已经患有心血管疾病和/或糖尿病的人更为显著。     

生物酶催化聚合的研究进展

酶催化聚合反应是近年来的研究热点之一,氧化还原酶是应用广泛的一类催化聚合酶。概括总结了近年来酶促聚合反应的研究进展,重点叙述了辣根过氧化物酶(HRP)、大豆过氧化物酶(SBP)和漆酶(laccase)的结构、催化机理以及它们在酶催化聚合中的应用概况。