心脏组织特异性表达 Neuregulin -2转基因小鼠的建立及心脏功能分析

目的：神经调节蛋白2（ neuregulin-2, NRG2）可促进神经系统发育,基因缺失表现早期生长延迟, NRG2在心脏中也有表达,但其在心脏发育尤其是病理刺激时对心脏结构及功能的影响尚未见报道。本文目的是建立心脏组织特异性表达NRG2转基因小鼠,分析其在正常及压力负荷刺激时对心脏结构及功能的影响。方法将人NRG2基因插入到心脏特异性启动子α-MHC下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立NRG2转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠基因型,western blot鉴定NRG2蛋白在心脏中的表达并筛选高表达的转基因品系,主动脉缩窄术（ transverse aortic constriction , TAC）制备压力负荷诱导的心肌肥厚小鼠模型。利用超声影像分析和病理学观察小鼠心脏结构和功能改变。结果建立了心脏组织特异性高表达NRG2转基因小鼠品系。与同窝阴性转基因小鼠相比,转基因小鼠左心室舒张末期后壁厚度（LVPWD）明显增加,3月龄时可达15．6％（P＜0．05）,经压力负荷刺激后,NRG2转基因手术小鼠心室壁增厚程度显著下降,心室腔增大,同时心肌排列紊乱程度和纤维化程度明显比NTG手术小鼠严重。结论在压力负荷下,转基因表达NRG2缩短了肥厚过程,同时加速了心衰进程。     

miR-375 在AGEs介导糖尿病血管损伤细胞中的生物学功能

目的：探讨miR-375 在血管损伤细胞中的表达及生物学功能。方法：利用基因克隆技术构建miR-375表达载体;然后将 miR-375 表达质粒转染至血管损伤细胞中,同时分别设立Huvec12对照组,血管损伤细胞组,血管损伤抑制组,Huvec12 转染 miR-375 组。24h 后收集细胞,在mRNA 和蛋白水平检测Mtpn、NFγB、profilin1、sICAM1 的表达,经荧光染色观察细胞F-actin 的 变化,再用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：血管损伤细胞中过表达miR-375后,在mRNA和蛋白水平靶基因Mtpn 下降,NFγB 的表达活性下降,使糖尿病血管病变的标志profilin1 下调;F-actin 表达恢复;细胞粘附因子（sICAM1）表达下降,细胞凋亡减少。 结论：初步证明miR-375 可以抑制AGEs 介导的糖尿病血管细胞损伤的发生,可能成为糖尿病血管损伤并发症基因治疗的靶点。     

猪γ干扰素基因的克隆、表达及其纯化

以RT-PCR方法,从经丝裂原诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出编码猪IFNγ的基因。经测序证实后插入载体pJLA503,并实现在大肠杆菌中的高表达。表达产物以包涵体形式存在,经7mol/L盐酸胍变性及精氨酸存在的情况下复性。再经DEAE-Sepharose离子交换柱、Sephdex-200凝胶过滤柱分离获得电泳单一纯猪IFN-γ蛋白,细胞病变抑制实验检测纯化产物有干扰素活性。     

赤爱胜蚯蚓(Eisenib Foetide Sorigng)纤溶酶的研究 1.提取纯化和生物化学性质

采用35％和65％的饱和硫酸铵分级沉淀法,获得蚯蚓纤溶酶活性蛋白,并对其纤溶酶的分子量,纤溶酶对其底物专一性,温度对纤溶酶的影响,纤溶酶最适pH值和pH值稳定性,纤溶酶的等电点,抑制剂对蚓蚯纤溶酶的影响几方面的测定,从而确定了蚯蚓纤溶酶的生物化学性质。     

肺癌细胞学亚型巴氏染色的计算机图像色度学定量分析

用计算机图像处理技术,对痰涂片中巴氏染色的角化性鳞癌细胞（ＫＳＣＣ）、非角化性鳞癌细胞（ＮＫＳＣＣ）和腺癌细胞（ＡＣＣ）胞浆进行了色度学定量分析。测试参数为红（Ｒ）、绿（Ｇ）、蓝（Ｂ）三基包含量和Ｒ、Ｇ、Ｂ的三色系数,同时还测算了胞浆的色度、饱和度、亮度和灰度,并进行了逐步判别分析。结果表明：ＫＳＣＣ的Ｒ、Ｇ、Ｂ及其三色系数、色度、饱和度与ＮＫＳＣＣ和ＡＣＣ相比差异非常显著;三基色的改变较灰度敏感．用三色系数、色度、饱和度对ＫＳＣＣ与ＮＫＳＣＣ、ＫＳＣＣ与ＡＣＣ进行计算机判别,准确度可达９５．３％和９７．１％。这些结果提示：三基色、三色系数及色度、饱和度分析对判别ＫＳＣＣ与ＮＫＳＣＣ、ＫＳＣＣ与ＡＣＣ有重要价值。对有关问题进行了讨论。     

重组人α8型干扰素的纯化与鉴定

采用酵母表达载体进行重组人α８型干扰素（ＨｕＩＦＮα８）的表达,该表达菌株可将重组α８型干扰素分泌进入培养基中,回收培养基进行纯化,然后利用超滤浓缩,先过Ｓ．ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ柱,再进行ＤＥＡＥ-ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ层析和Ｇ-２５脱盐,最后用高效液相ＨＰＬＣ,ＳＤＳ-ＰＡＧＥ丙烯酰胺凝胶电泳及肽图等方法对纯化产品进行鉴定。采用以上两步纯化方法纯化酵母分泌表达的重组人α８型干扰素纯度可达９５％以上,其比活性为３.０×１０^８ｕ／ｍｇ。     

棉酚对金鱼生殖机能影响的研究

棉酚对金鱼生殖机能影响的研究富惠光,叶继丹,卢彤岩,张良（中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,哈尔滨１５００７０）关键词棉酚,金鱼,生殖ＥＦＦＥＣＴＯＦＧＯＳＳＹＰＯＬＯＮＲＥＰＲＯＤＵＣＴＩＯＮＯＦＧＯＬＤＦＩＳＨ（ＣＡＲＡＳＳＩＵＳＡＵＲＡＴＵＳ...     

普达措国家公园2个针叶树种径向生长对温度和降水的响应

基于树轮年代学方法,利用普达措国家公园海拔上、下限丽江云杉(Picea likiangensis)和长苞冷杉(Abies georgei)树轮宽度资料,构建差值年表并分析其与温度和降水的关系,阐明影响该区域2个主要针叶树种径向生长的主要气候要素。结果表明:(1)海拔下限丽江云杉径向生长同时受到温度和降水的影响:与上年11月平均温、当年生长季后期(9—10月)平均温和上年7月降水呈显著正相关;(2)海拔上限丽江云杉径向生长只受温度影响,与上年生长季后期平均温呈显著负相关,与当年生长季盛期(6—8月)平均温呈显著正相关;(3)长苞冷杉径向生长只与温度表现出显著相关性,海拔下限的生长与上年11月平均温呈显著正相关,海拔上限的生长与当年生长季盛期平均温呈显著正相关。结果可为气候变化对滇西北高原树木生长影响研究提供参考,为滇西北高原森林生态系统管理与保护提供理论依据。     

西里伯斯青鳉tyr和slc24a5的克隆及表达分析

为了探究黑色素合成相关基因酪氨酸酶(Tyrosinase,tyr)和溶质载体24家族成员5(Solute carrier family 24,member 5,slc24a5)在西里伯斯青鳉(Oryzias celebensis)中的表达特征,研究采用RACEs(Rapid Amplication of cDNA En...