分离和克隆小鼠ES细胞集落的主要影响因素

目的　研究不同培养条件分离和克隆小鼠ES细胞集落的效率。方法　以PMEF饲养层、NIH3T3细胞饲养层或培养液中加入LIF为培养条件 ,分离和克隆昆明小鼠ES细胞集落 ,比较其效率。结果　饲养层的培养条件明显优于培养液中加入LIF的培养条件 ;有饲养层的培养条件下 ,桑椹胚的ES细胞集落出现率显著低于囊胚 ;两种饲养层培养囊胚 ,其ES细胞集落的出现率差异无显著性。结论　以PMEF或NIH3T3细胞作饲养层 ,培养昆明小鼠的囊胚 ,适时离散ICM ,是比较理想的分离ES细胞集落的方法。     

OxLDL 与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化是发生在中等以上动脉壁的慢性炎症 ,它是化学修饰后的脂质、单核细胞来源的巨噬细胞、Ｔ细胞以及血管壁多种正常细胞相互作用的结果[1] 。目前研究资料表明经氧化修饰后的低密度脂蛋白 (ＯｘＬＤＬ)参与了动脉粥样硬化发生、发展的各个环节。本文就ＯｘＬＤＬ致动脉粥样硬化的研究进展做一综述。1.ＯｘＬＤＬ的形成和分类天然低密度脂蛋白 (ＬＤＬ)中含有大量不饱和脂肪酸 ,在自由基或其他氧化剂作用下生成脂类自由基 ,并能产生更多的过氧化脂质引起连锁的自由基链式反应 ,最终生成多种活性醛。这些化学性质活泼的醛和ＬＤＬ中…     

新基因促进骨形成

大阪大学助教小守寿文等人发现了促进骨形成所需的新遗传基因。试验证明,没有这种遗传基因的小鼠骨形成很难。上述发现将有助于开发骨质疏松症、软骨病和关节痛等病症的有效治疗方法。     

Flt3配体的同源二聚体构建及其生物学特性

Flt3配体 (FL)是一种早期造血生长因子 ,与相应受体结合后 ,驱动受体二聚化 ,从而启动细胞内信号转导。体内 ,可溶性的FL主要以单体形式存在。将 2个相同的编码可溶性FL的基因片段 ,通过连接序列以首尾相连的方式构建成FL FL基因 ,并在毕氏酵母 (Pichiapastoris)中表达。SDS PAGE试验表明 ,FL FL融合蛋白 (rFL FL)分子量约为 4 3kD ,与预期相符 ,并为Western印迹试验所证实。骨髓祖细胞体外集落形成试验提示 ,rFL FL具有更强的生物学活性 ,约是单体FL(rhFL)的 10倍之多。另外 ,FL FL融合蛋白还能促进和延长饥饿的Raji细胞存活 ,与rhFL相比 ,也表现出较强的生物学功能。     

低氧提高肿瘤细胞反义VEGF165基因表达

为了探讨反义VEGF1 65基因对食管癌的抑制作用 ,并初步探讨利用肿瘤低氧微环境改善基因治疗的效果 ,采用PCR技术和DNA重组技术构建了含低氧反应元件的真核表达载体 ,并用此载体构建了含荧光素酶报告基因和反义VEGF1 65基因的重组载体。用脂质体将重组载体导入食管癌细胞 ,体外用化学发光光度计测定低氧对报告基因表达的调节和ELISA法间接测定低氧对反义VEGF基因表达的调节作用。体内利用裸鼠皮下移植实验研究低氧对反义VEGF1 65基因抑瘤作用的影响。体外实验表明 ,用带低氧反应元件的重组真核表达载体转染食管癌细胞 ,在低氧培养下可以使报告基因的表达提高 3 780 % ,并可以显著提高反义VEGF1 65基因的表达 ,体内用带低氧反应元件的载体将反义VEGF1 65基因导入食管癌细胞中 ,其抑瘤效果显著优于不含该元件的载体 ,抑瘤率分别为 71 .7%和 5 6 .1 %。反义VEGF1 65基因能显著抑制食管癌的生长 ;利用肿瘤低氧可以实现治疗基因的自主调节 ,改善基因治疗的效果     

植物幼苗顶端弯钩形成机制研究的重要进展

正顶端弯钩的形成对于幼苗的成功出土至关重要,顶端弯钩形成缺陷突变体(如hookless1突变体,hls1)不能从土壤中出土见光生长,因此难以存活。过去研究发现,植物激素在调控顶端弯钩形成的过程中发挥重要作用,其中乙烯通过稳定其信号通路核心转录因子EIN3/EIL1进而促进顶端弯钩形成,而茉莉素抑制顶端弯钩形成并拮抗乙烯的促进     

Dysfunction of Wnt signaling and synaptic ：lisassembly in neurodegenerative diseases

The molecular mechanisms that regulate synapse formation have been well documented. However, little is known about the factors that modulate synaptic stability. Synapse loss is an early and invariant feature of neurodegenerative diseases including Alzheimer＇s lAD） and Parkinson＇s disease. Notably, in AD the extent of synapse loss correlates with the severity of the disease. Hence, understanding the molecular mechanisms that underlie synaptic maintenance is crucial to reveal potential targets that will allow the development of ther- apies to protect synapses. Writs play a central role in the formation and function of neuronal circuits. Moreover, Wnt signaling compo- nents are expressed in the adult brain suggesting their role in synaptic maintenance in the adult. Indeed, blockade of Wnts with the Wnt antagonist Dickkopf-1 （Dkkl） causes synapse disassembly in mature hippocampal cells. Dkkl is elevated in brain biopsies from AD patients and animal models. Consistent with these findings, Amyloid-β （Aβ） oUgomers induce the rapid expression of Dkkl. Importantly, Dkkl neutralizing antibodies protect synapses against Aβ toxicity, indicating that Dkkl is required for Aβ-mediated synapse loss. In this review, we discuss the role of Wnt signaling in synapse maintenance in the adult brain, particularly in relation to synaptic loss in neurodegenerative diseases.     

无斑肥螈消化道五羟色胺免疫活性细胞的分布与形态学观察

用S－P免疫组织化学的方法对无斑肥塬消化道五－羟色胺（5－HTIR）免疫活性细胞的分布及形态进行了观察。结果表明,5－HTIR细胞从食道到直肠的消化道各段均有分布。其中,幽门部密度最高,十二指肠次之,直肠最低。5－HTIR细胞形态多样,有圆形、梭形、纺锤形或烧瓶形,梭形、纺锤形或烧瓶细胞有较长的胞突,有时胞突可见明显分叉。同时讨论了5－HRIR细胞的分点特点、形态与功能的关系。