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新抗菌靶点分选酶基因(srtA)在两种原核载体中的克隆表达 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】革兰氏阳性菌的表面蛋白在病原菌致病性方面具有重要作用,表面蛋白锚定到细胞壁过程的关键酶—分选酶成为抗感染的新靶点。【方法】本文利用GenBank中的分选酶A基因(srtA)序列设计特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得618 bp的DNA片段。按照常规分子克隆操作成功构建两种原核表达载体pet22-srtA和pTRX-srtA,转入大肠杆菌感受态BL21(DE3)中,在1 mmol/LIPTG诱导下进行表达。利用SDS-PAGE和western blot进行鉴定和分析,【结果】结果显示:(1)重组载体pet22-srtA和pTRX-srtA分别表达出相对分子量为约45 kDa和39 kDa的外源蛋白;【结论】(2)分子伴侣硫氧还蛋白(Trx)有利于分选酶A基因的可溶性表达。该实验为后续的分选酶酶学性质研究特别是抑制剂筛选研究奠定良好基础。 相似文献
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1 植物名称 四季草莓"赛娃"(Fragaria vesca cv.selva). 2 材料类别 匍匐茎尖. 3 培养条件 (1)芽诱导培养基:MS+6-BA 0.5 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.1;(2)增殖培养基:MS+6-BA 1+IBA 0.05;(3)生根培养基:1/2MS+IBA 0.3.琼脂6.5 g·L-1,蔗糖30 g·L-1,培养基pH值为5.6~5.8,培养温度(25±1)℃,光照度1 500~2 000 lx,光照时间12 h·d-1. 相似文献
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巴西固氮螺菌中吸氢酶基因同源性的分子检测 总被引:2,自引:0,他引:2
通过TTC(2 ,3,5 氯化三苯基氮唑 )实验筛选出 12株能产生吸氢酶蛋白 (Hup+ )的巴西固氮螺菌 (Azospir rilumbrasilense)菌株。用Qiagen柱分离提纯含豌豆根瘤菌的hup基因片段的质粒 pHVT10 9和pHVT115 ,并用地高辛标记法标记pHVT115 ,与 12株Hup+ 巴西固氮螺菌的总DNA进行斑点杂交 ,结果显示pHVT115所含的吸氢酶基因 (hup基因 )片段与巴西固氮螺菌的大部分菌株的hup基因同源性不强。这一结果表明hup基因在固氮生物中存在着遗传多样性 ,异源hup基因探针不一定都适宜于探测hup基因。 相似文献
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亚硫酸钠处理对与采后竹笋木质化作用有关的细胞壁物质及酶活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
研究了Na2SO3处理对与采后竹笋与木质化作用相关的细胞壁物质及其酶活性的影响。结果表明:1%Na2SO3处理能显著延缓竹笋组织中多聚半乳糖醛酸酶活性的降低和抑制苯丙氨酸解氨酶活性的上升,因此水溶性果胶含量显著高于对照,硬度、木质素和原果胶含量显著低于对照。但1%Na2SO3处理对纤维素酶、果胶甲酯酶活性和纤维素含量无显著影响。 相似文献
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79.
神经营养因子受体TrkA、TrkB、TrkC和TrkE在参环毛蚓体内的分布 总被引:1,自引:0,他引:1
高亲和性神经营养因子受体Trk,广泛存在分布于哺乳神经组织,研究表明:随着动物进化程度的降低,亚型Trk受体的类型有所减少,在低等动物,关于环节动物(Annelida)Trk受体存在与否,分布如何尚未见报道,以我国环节动物门典型代表参环毛蚓(Pheretima aspergillum)为研究对象,运用免疫细胞化学染色技术,在光镜下观察TrkA,TrkB,TrkC和TrkE阳性细胞和纤维的形态与分布,发现Trk存在于参环毛蚓的神经系统和非神经组织,各亚型分布有所差异,TrkA阳性 经细胞存在于咽下神经节和肠神经系,阳性神经纤维存在于腹神经索和肠神经系,TrkB阳性细胞存在于非神经组织的肠上皮,TrkC阳性神经细胞存在于脑,咽下神经节和肠神经细胞,阳性神经纤维存在于围咽神经环,腹神经索和肠神经系,TrkE阳性神经细胞存在于脑,阳性神经纤维存在于咽下神经节和腹神经素,上述研究结果表明:Trk存在于进化程度较的环节动物,Trk在进化上具有悠久的历史,各亚型Trk受体的不同分布提示不同部位的神经细胞受不同神经营养因子的作用。 相似文献
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