MKP-1在结核分枝杆菌感染中的作用和研究进展

有丝分裂原激活的蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK)信号通路是细胞感知外源性刺激并作出有效免疫应答的最重要的细胞内信号通路之一。近年来的研究表明:MAPK的表达异常与结核病的发生、发展密切相关。MAPK磷酸酶(MAPK phosphatases,MKPs)是一类在细胞内水解MAPKs家族的磷酸酶,通过负向调控MAPKs的活性,从而在调节细胞的应激、分化、增殖、凋亡等过程中发挥重要的作用,其中MKP-1是MKPs家族中被报道最多的成员,具有最强的去磷酸化能力。本文综述了MKP-1在结核分枝杆菌感染中的作用和研究进展。     

多功能核蛋白NONO研究进展北大核心CSCD

NONO(non-POU-domain-containing octamer binding protein)是一种多功能的核蛋白质,作为人类剪切蛋白家族的一员,NONO参与多种生物学事件,如基因转录调控、前体RNA剪接、DNA解螺旋和配对、缺陷RNA核滞留、DNA损伤的修复以及肿瘤发生等过程。尽管NONO参与胞内多种生物过程,但目前,针对NONO生物功能的研究仍处于初级阶段,其相关的临床研究更少。本文就NONO基因的结构及功能研究进展予以综述。     

多重耐药铜绿假单胞菌Ⅰ类整合子-基因盒的检测与分析

目的检测多重耐药铜绿假单胞菌(multi-drug resistant pseudomonas aeruginosa,MDRPA)携带Ⅰ类整合子-基因盒,分析其与耐药表型的相关性。方法使用K-B纸片扩散法(简称K-B法)进行药敏试验,确定菌株耐药表型;用PCR扩增Ⅰ类整合酶基因及可变区的基因盒,并进行测序及序列分析。结果 23株MDRPA中19株检出Ⅰ类整合酶基因,其中15株携带基因盒,基因盒结构共有6种。其中6株携带aad A4a、3株携带aac A4-cat B8-aad A1、1株携带aac(6’)lai-orfv-aad A1-qac EΔ1-sul、3株携带blaIMP-6-qnr-aac A4-blaOXA-1-aad A1-qac E△1-sul、1株携带permease of ABC transporter gene、1株携带bacteriophage protein gene。在15株携带Ⅰ类整合酶基因盒的可变区中,检出8种耐药基因和2种新型基因盒。结论 MDRPA携带的Ⅰ类整合子-基因盒结构具有多样性,与菌株的多重耐药表型密切相关;检出两种新型基因盒,分别是ABC转运系统蛋白和噬菌体蛋白的编码基因。这两种新型基因盒的功能尚不清楚,特别是它们与菌株耐药性的关系,有待进一步研究。     

间充质干细胞来源外泌体对脑内小胶质细胞极化和炎症因子释放的影响及机制研究

摘要 目的：探究间充质干细胞外泌体对脑内小胶质细胞极化和炎症因子释放的影响及其机制。方法：收集体外培养的间充质干细胞上清，超高速冷冻离心获取外泌体。采用纳米颗粒系统和透射电子显微镜分别检测外泌体粒径大小、形态结构和功能完整性。通过免疫荧光、ELISA和细胞流式等方式检测LPS刺激下，外泌体对BV2细胞的表型极化和炎症因子释放的影响。采用Western Blot法检测间充质干细胞外泌体对BV2细胞JAK1/STAT3通路活化的影响。结果：（1）间充质干细胞分泌的外泌体粒径大小主要介于40-100 nm，透射电镜显示外泌体形态呈典型膜性"杯盘"状结构；（2）流式结果表明，相比于对照组，LPS组能显著激活M1型小胶质细胞表面标志物CD11b和M2型小胶质细胞表面标志物CD206的表达，而经外泌体处理，CD11b的表达显著被抑制，CD206显著升高。同时ELISA结果证实，相比于LPS组，外泌体组分泌的促炎症因子（IL-1β、IL-6）和NO水平显著降低（P<0.05），抗炎因子（IL-10）显著升高 (P<0.05)；（3）间充质干细胞外泌体显著提高了BV2细胞JAK1/STAT3通路的磷酸化水平。结论：间充质干细胞外泌体通过激活JAK1/STAT3通路有效促进脑内小胶质细胞M1型向M2型极化。     

Nrf2信号通路在复发性外阴阴道念珠菌病发病机制中的作用CSCD

复发性外阴阴道念珠菌病是一种由念珠菌机会感染引起的皮肤黏膜疾病,其发病机制复杂,而念珠菌的侵袭与宿主诱发因素是复发性外阴阴道念珠菌病的主要致病因素。其中,念珠菌可通过多种方式攻击宿主细胞和逃避宿主免疫系统而导致机体损伤。Nrf2信号通路是细胞抗氧化的主要调控机构,同时也是一种重要的免疫调节机构。一方面,Nrf2通路可下调NF-κB通路和促进Th17、Treg、Th1细胞的活化,启动宿主适应性免疫;同时,Nrf2通路可激活树突状细胞介导机体固有免疫。另一方面,Nrf2通路还可通过抗氧化应激损伤来阻止阴道炎的发展。该文对Nrf2通路在复发性念珠菌性阴道炎发病机制中的抗氧化应激和免疫调节作用进行综述,旨在研究Nrf2信号通路与复发性外阴阴道念珠菌病发病机制间的关系,从而指导临床治疗复发性外阴阴道念珠菌病。     

反义lncRNA在NSCLC中的作用及机制

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)在我国发病率和死亡率非常高,严重威胁着公众健康。由于缺乏敏感有效的早期诊断指标、易复发、易产生耐药性等因素,NSCLC的临床治疗效果一直不佳,导致患者预后差及生存率低。反义长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的异常表达与NSCLC发生发展密切相关,在NSCLC的增殖、凋亡、侵袭、迁移、上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和耐药等方面均发挥着重要作用,已成为近年来的研究热点。本文探讨反义lncRNA在NSCLC发生发展过程中的功能及具体调控机制,旨在为NSCLC患者提供更有效的治疗理论参考。     

揭示蛋白激酶CK2生物学功能——亚基敲除/敲减北大核心CSCD

蛋白激酶CK2是一种真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,可催化细胞内多种蛋白质的磷酸化,由2个催化亚基CK2α或α'以及2个调节亚基CK2β组成的异源四聚体结构。为深入了解CK2的结构与功能,通过运用同源重组敲除、条件性敲除及RNAi引起的基因敲减技术分别对其3个亚基进行敲除与抑制,发现在CK2亚基敲除与抑制后,可对个体生殖、胚胎发育、肿瘤、代谢以及衰老造成重要的影响,说明CK2各亚基具有重要的生物学功能。本文就敲除与敲减蛋白激酶CK2任一亚基后其功能变化的进展作一综述。     

microRNA-378 与肿瘤血管生成的研究进展

微小RNA(MicroRNAs,mi RNAs)是真核生物中一类长度约为21到23个核苷酸的非编码小分子单链RNA。mi RNA通过与靶m RNA 3′UTR(3′-untranslated region,3′非编码区)完全或不完全结合,抑制翻译或直接诱导其降解,发挥转录后负调控作用。mi RNA参与机体多种生理和病理过程,且可通过调控其靶标基因参与各种信号通路,影响血管生成。mi R-378属于诸多mi RNAs中的一种。目前已知mi R-378的研究主要集中在肿瘤发生及血管生成、心血管疾病和脑缺血等病理过程,其中与肿瘤发生及血管生成相关研究居多。mi R-378在不同肿瘤中的发挥的作用也不一样,在脑胶质瘤,肺癌,横纹肌肉瘤等肿瘤中发挥促癌基因的作用,在卵巢癌,胃癌,大肠癌等肿瘤中发挥抑癌基因的作用。但是,mi R-378调节肿瘤血管生成的作用机制还有待于深入研究。本文主要对mi R-378在四种肿瘤(脑胶质瘤、肺腺癌、卵巢癌和横纹肌肉瘤)中调控血管生成的相关性研究进展进行综述,以期为这些疾病的治疗和预防提供一种新的思路。     

应用pIRES2-EGFP表达载体快速建立Hela细胞稳转细胞系

[目的]探索应用pIRES2-EGFP表达载体快速建立Hela细胞稳转细胞系的筛选方法。[方法]EcoRⅠ和Bam HⅠ双酶切,T4 DNA连接酶连接构建目的基因p IRES2-EGFP表达载体并测序确定,Lipofectamine3000转染Hela细胞分为Mock组(未转染组)、NC组(p IRES2-EGFP空载对照组)、重组质粒转染组,转染后24 h消化细胞进行初步筛选(900μg/m LG418),转染后14～16 d将长至肉眼可见的细胞克隆全部重新消化进行二次筛选(方法同初步筛选),转染后28～32 d挑选3个肉眼可见的细胞克隆,实时荧光定量PCR和WB检测目的基因过表达效率。[结果]双酶切及测序确定重组质粒成功构建,与Mock组相比,NC组无明显变化,重组质粒转染组各克隆目的基因mRNA水平分别升高109±8. 3、127±10. 5、122±9. 1倍,P 0. 01,蛋白水平分别升高33±3. 3、45±4. 7、47±4. 9倍,P 0. 01。[结论]该筛选方法 28～32d左右可快速建立Hela细胞稳转细胞系,过表达效率高,可直接进行后续实验。     

低氟铝长期与高氟铝短期暴露后大鼠骨生长的比较研究

目的观察不同剂量氟铝联合摄入时间长短对大鼠纵向骨生长及骨代谢的影响。方法48只8周龄体重170~190g清洁级SD大鼠,随机分成正常对照,低氟铝和高氟铝组,且分别设45d和90d组。进行胫骨近端生长板和干骺端松质骨的骨形态计量学分析。结果与正常组比较,高氟铝组生长板增厚,45d组软骨细胞层次清楚,排列整齐,形态无异常,而90d组软骨细胞拥挤,潴留;低氟铝(45d和90d)组干骺端次级小梁骨矿化周长、骨形成率、成骨细胞周长都增加,且骨吸收周长在90d组增加;上述骨代谢指标在高氟铝45d组均增加,90d组均降低。结论高氟铝短期暴露刺激软骨生长,长期抑制纵向骨生长。低氟铝短期暴露只增加次级小梁骨形成,低氟铝长期与高氟铝短期暴露均可刺激小梁骨形成,增加骨吸收,高氟铝长期抑制骨形成和吸收。