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需钠弧菌Vibrio natriegens作为近几年发展起来的一种新型生长快速底盘细胞,在合成生物学领域展现出良好的应用前景。基因组编辑是合成生物学研究中不可或缺的遗传操作手段。但是,开展需钠弧菌的合成生物学研究仍然有待进一步发展精准、高效的基因组编辑系统。针对这个问题,首先对6株需钠弧菌的生理表型进行检测,选取生长快速、表型稳定的CICC 10908菌株作为基因组编辑研究的宿主细胞。其次,建立并优化需钠弧菌自然转化系统。优化后的系统将筛选标记基因cat-sacB或KanR整合到需钠弧菌染色体上的同源重组效率分别达到4×10–5和4×10–4。再次,在优化的自然转化系统基础上,利用双向选择性筛选方法,建立了精准、高效的需钠弧菌基因组无痕编辑体系。通过测试,基因敲除、回补、插入和替换这4种不同类型基因编辑的阳性率分别为93.8%、100%、95.7%和100%。最后,需钠弧菌可以实现质粒的高效转化和消除。该工作为需钠弧菌合成生物学研究提供精准、高效的基因组无痕编辑手段。 相似文献
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目的:探讨小窝蛋白-1(Caveolin-1)在COPD大鼠肺组织中的表达及其与气道重塑的关系。方法:采用10周龄Wister大鼠20只,随机分为对照组与实验组,每组10只,对照组常规饲养,实验组采用烟熏法+内毒素法建立COPD模型。第91天处死全部大鼠,测定肺功能后取肺组织,采用免疫组织化学法检测Caveolin-1的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠肺组织匀浆中白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量;分析Caveolin-1的表达与IL-8、TNF-α、TGF-β表达的相关性。结果:与对照组比较,实验组大鼠的肺顺应性明显下降,肺弹性阻力及气道阻力显著升高,肺组织TNF-α、IL-8、TGF-β1的含量明显升高,Caveolin-1的表达明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。大鼠肺组织中Caveolin-1的表达与IL-8、TNF-α、TGF-β1含量呈显著负相关(P0.05)。结论:Caveolin-1在COPD大鼠肺组织中的表达明显降低,可能通过促进炎性细胞因子的释放与气道重塑参与COPD的发生和发展。 相似文献
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【目的】克隆表达一个来源于海洋细菌的酯酶E29,并研究其酶学性质。【方法】从细菌Altererythrobacter luteolus SW109T中筛选并扩增出一个酯酶基因,将其克隆至p SMT3载体上,并将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达,分析表达产物的酶学性质。【结果】氨基酸序列分析结果表明,酯酶E29属于脂类水解酶第二家族(Family II)。酶学性质分析结果显示,酯酶E29的最适反应底物为对硝基苯酚丁酸酯,最适反应温度为45°C,最适反应pH为8.5;10 mmol/L的Co~(2+)和Mn~(2+)及15%的异丙醇和乙腈能强烈抑制酯酶E29的活性,1%的SDS能使酶失活,甘油的存在能促进酶活性。【结论】酯酶E29是一个海洋来源的新型酯酶,其具有较高的酶活力值、较宽的底物谱以及对部分有机溶剂和金属离子较好的耐受性,在工业方面具有潜在的应用价值。 相似文献
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目的:探讨动态监测肺癌患者围手术期血清CEA、CA19-9、CA125及CA153水平变化的临床意义。方法:随机选取2014年5月至2015年5月收治的肺癌患者58例为研究对象,另选取同期在我院接受体检的健康人群15例为对照组。分别测定肺癌患者手术前及术后1天、1周、1个月、3个月的血清CEA、CA19-9、CA125、CA153水平,并与对照组的上述各血清肿瘤标志物进行比较。结果:肺癌患者术前空腹血清CEA、CA19-9、CA125、CA153水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.01)。肺癌患者术后1天、1周、1个月及3个月的血清CEA、CA19-9、CA125、CA153水平明显低于术前,差异具有统计学意义(P0.05)。肺癌患者术后1个月的平均空腹血清CEA、CA19-9、CA125、CA153水平高于术后3个月平均水平,但差异不具有统计学意义(P0.05)。结论:对肺癌患者的血清CEA、CA19-9、CA125、CA153水平进行围手术期动态监测有助于评估手术治疗效果。 相似文献
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为解决虫草药源不足和工业化生产虫草菌问题,我们对虫草菌1号(Cordyceps sp.NO.1)深层培养产物的化学成分进行了研究,并与天然冬虫夏草[C.Sinensis (Berk.) Sacc]和亚香棒虫草(C. Hawkesii Grag)的化学成分作了比较。从虫草菌1号深层培养产物中分离出腺嘌呤、腺嘌呤核苷、尿嘧啶、二十烷、蕈糖、甘露醇、麦角甾醇、硬脂酸和L-丙氨酸九种成分。前5种在此菌中尚未见报道。初步证明了虫草菌1号深层培养物的一些化学成分与天然虫草类似。 相似文献
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记述采自四川川西地区的细腹蚜蝇属2新种:暗颊细腹蚜蝇,新种Sphaerophoria melagena sp.nov.和川西细腹蚜蝇,新种Sphaerophoria chuanxiensis sp.nov..模式标本保存于陕西理工学院动植物标本馆. 相似文献
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记述采自陕西省秦岭山区斑胸蚜蝇属1新种及1新记录种,即楯斑斑胸蚜蝇Spilomyiascutimaculata,sp.nov.和连斑斑胸蚜蝇SpilomyiapanfiloviZimina1952。模式标本保存于陕西理工学院陕西省资源生物重点实验室。 相似文献