蜜环菌的深层培养

为了代替天麻,解决临床供药,对蜜环菌[Arrraillaria mellea (Vahl ex Fr．)Quel.]的深层培养进行了研究。所得结果是：该菌在深层培养条件下菌丝体羌色,丝状,有横隔,具分枝;适宜的培养基为：蔗糖2％,葡萄糖1％,豆饼粉1％,蚕蛹粉1％,MgSO4 7H2O 0.075％,KH2PO40．15％,豆油0．2％,自然pH;用15％的接种量,通气量1：0．3--1：0.5(V／V／分)。在25—27℃培养6—7天,当pH降至5.0左右,残糖量降至0.5一0.3％,菌丝体具有亮光,发酵液变为棕紫褐色时,即可终止发酵。     

蜜环菌固体发酵的研究

天麻(Gastrodia data Blume)是一种常用中药,过去临床应用主要靠采挖的野生天麻。近数年来虽然报道人工栽培天麻已获得成功,但药源仍缺,供不应求。为改进天麻现有生产方法,解决广大群众的需要,我所根据在自然环境中天麻生长与蜜环菌的密切关系(没有蜜环菌,天麻则不能繁殖)的特点,于1971年以来,开展了用蜜环菌发酵物代替天麻的研究。试验证明,蜜环菌发酵物与天麻具有相似的生物学活性;临床试用结果证明,蜜环菌发酵物与天麻的疗效相似。     

麦角菌深层培养产生麦角新碱的研究

为了利用深层培养技术生产麦角新碱,对拂予茅麦角菌[Claviceps microcephala (Wallr.)Tul.] Ce-3菌株进行了发酵条件的研究。所得结果是：适宜接种菌龄为72小时,二级种龄48—48小时,接种量为5％．最适pH值是7．5,机械搅拌作用过大,损伤菌丝降低产量,加入0.5％豆油既能抑制泡沫,又利于提高产量。采用较适宜的发酵条件,经九天培养,其麦角总生物碱和麦角新碱的产率分别为0．009 36％和0．00579％,麦角新碱含量占二分之一以上。     

虫草菌1号深层培养产物的化学成分

为解决虫草药源不足和工业化生产虫草菌问题,我们对虫草菌1号(Cordyceps sp.NO.1)深层培养产物的化学成分进行了研究,并与天然冬虫夏草[C.Sinensis (Berk.) Sacc]和亚香棒虫草(C. Hawkesii Grag)的化学成分作了比较。从虫草菌1号深层培养产物中分离出腺嘌呤、腺嘌呤核苷、尿嘧啶、二十烷、蕈糖、甘露醇、麦角甾醇、硬脂酸和L-丙氨酸九种成分。前5种在此菌中尚未见报道。初步证明了虫草菌1号深层培养物的一些化学成分与天然虫草类似。     

麦角碱发酵生产的研究

1957年超分离自各种寄主植物的麦角菌发酵培养试验示明,液体发酵的产碱量极微,且需很长时间,麦角菌在固体发酵中特别是在经高温消毒的小麦培养基上生长迅速,经25天左右即能使麦粒变为黑紫色,内部充满菌褓和分生孢子。轻充分发酵后麦粒的麦角碱总量最高达0．061%,与黑麦上自然或染所产麦角的合碱量相等。小麦培养基中分别或同时加入适当的碳源、氮源友盐类等能显著提高了麦角碱的产量。分离自拂早茅等17种寄主植物的245个菌系在小麦培养基上测定秸果,85／／-(35％)能产生麦角碱,不同菌系的产碱力差异甚大,其中ce 3、Ce 3-2厦Hv 3—3等7个菌系产碱鞍为稳定。优良菌系ce 8—3—2、ce 3—2、Acl2、Ae 5-4、Hv 3-3、Hv 3—2皿Hv 2—3的最高产碱量分别为0．061、0．060、0．050、0．049、0．049、0．044及0．041％o菌系Ce 3在发酵过程中枉9天e口开始产生麦角碱,25天左右产碱量达最高;茵系Ce 3和它的很多变异系,根据祗层分析结果, 证明均能产生多量麦角新碱。     

麦角菌和雀稗麦角菌原生质体的形成与再生

本文报道了快速制备麦角菌(Claviceps purpurea)和雀稗麦角菌(Claviceps paspali)原生质体的方法及影响原生质体形成的若干因素。用适当方法培养菌丝体,利用商品溶壁酶制剂(10mg/ml),以0.7mol/l KCl为原生质体高渗液,28℃为酶解温度,处理时间仅需1—2h,菌丝体细胞壁即被彻底消化而释放出大量原生质体。在适当的固体再生培养基上,两种麦角菌原生质体的再生频率分别为7.7%和13.2%左右。培养基中添加25mg/l脱氧胆酸钠有利于形成易于计数和分离的小菌落。本文还就CaCl_2,MgCl_2及低温保藏(3—4℃,30天)对于原生质体稳定性与再生的影响作了初步探讨,并证实溶壁酶对原生质体有明显的破坏作用。