圈卷产色链霉菌分化相关基因samR调控的初步研究

在野生型的圈卷产色链霉菌中,增加单个或多个拷贝数的samR,观察该基因对野生株表型和形态的影响。结果表明,samR的拷贝数的增加会使孢子形成提前,但是增加单拷贝的菌株与增加多拷贝的菌株所表现的增效作用相同。在大肠杆菌中对samR进行了GST融合表达和纯化,通过凝胶阻滞实验证明,SamR蛋白可与其上游的调控区特异性结合。由此推测samR是一个自调控基因。     

人铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆和在乳酸乳球菌中的表达

采用RT-PCR技术从人肝总RNA中分离扩增了0.45kb的人铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)基因的cDNA序列,首先克隆至大肠杆菌表达质粒pET23b,进行了序列测定和超高表达。将Cu/Zn SOD cDNA亚克隆至乳酸乳球菌表达载体pMG36e,用电穿孔法将重组质粒pMG36esod转化到乳酸乳球菌中,获得Cu/Zn SOD的组成型表达,其表达量约占乳酸乳球菌可溶性蛋白的5%以上,活性染色表明该工程菌表达的Cu/Zn SOD具有较好的酶活性。     

圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因sanA的克隆、结构和功能

圈卷产色链霉菌是尼可霉素产生菌,经紫外线诱变后,以赤星灰霉为指示菌筛选到遗传稳定的尼可霉素生物合成阻断突变株,选择其中的NBB19为受体,以质粒pIJ702为克隆载体,从野生型圈卷产色链霉菌的DNA文库中克隆到了6kb的DNA片段,能互补NBB19使之恢复尼可霉素的产生能力.对6kbDNA片段中的部分片段进行了序列分析,结果表明2710bpDNA片段包含一个1365bp的完整开放阅读框架,编码一个由454个氨基酸残基组成的蛋白质,该基因命名为sanA.蛋白序列数据库比较结果表明,sanA编码的蛋白质氨基酸序列与Pyrococcus horikoshii的甲基转移酶有较高的同源性,353个氨基酸残基中有25%的一致性.用基因破坏策略研究了sanA的功能,野生型菌株sanA基因被破坏后导致失去合成尼可霉素的能力,表明sanA是尼可霉素生物合成中的一个新的重要基因.     

谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD的功能研究北大核心CSCD

【目的】由于谷氏菌素产生菌禾粟链霉菌的遗传操作效率较低,本研究在谷氏菌素生物合成基因簇成功异源表达的基础上,通过在异源宿主天蓝色链霉菌M1146中阻断谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD,研究其在谷氏菌素生物合成中的作用,为谷氏菌素生物合成途径的阐明奠定基础。【方法】以含有谷氏菌素生物合成基因簇的黏粒D6-4H为基础,通过PCR-targeting的方法分别将gouC和gouD敲除得到重组质粒p GOUe-ΔC和p GOUe-ΔD。通过接合转移将这两个重组质粒分别导入天蓝色链霉菌M1146中,获得gouC和gouD的缺失突变株M1146-GOUe-ΔC和M1146-GOUe-ΔD,通过HPLC分析突变株的谷氏菌素中间产物积累情况,分离纯化后对其进行结构鉴定和生物活性检测。【结果】gouC和gouD的缺失均导致谷氏菌素不能合成,突变株发酵液中积累了不同的中间产物,生物活性分析发现这些中间产物均失去了对肿瘤细胞的抑制活性。【结论】gouC和gouD是谷氏菌素生物合成的重要基因,与谷氏菌素肽基部分的肌氨酸残基合成相关。本研究为阐明谷氏菌素的生物合成机制提供了更多的依据。     

盐霉素产量提高及其活性优化

盐霉素(salinomycin)是由白色链霉菌(Streptomyces albus)产生的一元羧酸聚醚类抗生素,具有较强的抗革兰氏阳性菌和杀灭球虫的作用,而且对环境污染也较低;此外,还能特异性地抑制多种肿瘤细胞及肿瘤干细胞的生长,具有多重作用靶点,有望成为抗肿瘤的特效药。为提高盐霉素的产量,人们采用传统诱变技术和现代分子遗传学手段,对盐霉素产生菌进行了改造,获得了高产菌株;同时,通过对盐霉素化学结构进行修饰或者通过药物载体和联合用药等,增强了其活性和靶向性、减少了毒副作用。本文对盐霉素产生菌的改造策略、药物靶向性提高和活性优化等研究进展进行综述,并对今后的研究热点进行展望。     

六十年一路同行 新时代再创辉煌——祝贺中国科学院微生物所建所60周年

正辞旧迎新之际,迎来了中国科学院微生物研究所60周年华诞。我们谨代表《微生物学报》编委会在此表示热烈祝贺。六十年春华秋实锐意进取,六十年上下求索继往开来,《微生物学报》作为主办单位中国科学院微生物所创办最早的期刊,与时代同行,始终以国家战略需求和经济发展为导向,在推动微生物学科快速发展与微生物所风雨同舟、砥砺前行、改革创新、携手共进,一起见证了中国微生物学领域六十年的发展与辉煌,实现共同繁荣,铺就     

酵母SOD高产工程菌培养优化条件研究

研究了酵母ＳＯＤ高产工程菌培养条件,培养基组分、糖浓度、ｐＨ、通气量、培养时间、微量元素等对该菌的生物量和ＳＯＤ含量均有影响。其中通气量和微量元素的影响最显著。在优化条件下,细胞生物量为５．１５ｇ／１００ｍｌ培养基;ＳＯＤ产量为２０７０Ｕ／ｇ菌体。     

庆大霉素产生菌质粒DNA的分离和鉴定

本文首次报道从庆大霉素产生菌——棘孢小单孢菌绛红变种As 4.890中分离得到了质粒,经电泳检测和电镜观察证实,存在共价闭合超盘旋和开环两种分子构型,分子量约为4.4Md(6.8kb),此质粒被命名为pME1。高温消除质粒获得的突变株(4.890-1)与原株(As 4.890)比较,两者在产生庆大霉素及其3个主要组份(c_1、c_2、c_(?))方面未发现差异,但在孢子层和基丝的颜色上有明显的差异。As 4.890孢子层黑色、丰满,基丝橙色,稀少。4.890-1孢子层棕色、稀疏,基丝橙色、丰满。上述结果表明,质粒pME1与庆大霉素的生物合成可能没有关系,但在As 4.890中,与孢子层、基丝的颜色有关的某些基因可能位于此质粒上。     

链霉菌发育控制启动子—P_(TH4)对孢子形成的影响

在原核生物发育分化的分子遗传学研究中,链霉菌因其复杂的分化生命周期,无与伦比的合成次级代谢产物的能力（目前世界上所知的数千种天然抗生素的７０％由链霉菌产生）,使之成为原核生物乃至微生物发育与分化研究的最好模式系统［１］,为研究基因时空表达和阐明分化调…     

链霉菌发育控制启动子—PTH4对孢子形成的影响

在原核生物发育分化的分子遗传学研究中,链霉菌因其复杂的分化生命周期,无与伦比的合成次级代谢产物的能力（目前世界上所知的数千种天然抗生素的７０％由链霉菌产生）,使之成为原核生物乃至微生物发育与分化研究的最好模式系统［１］,为研究基因时空表达和阐明分化调...