贵州三个地方猪种的系统发育分析

采用PCR产物直接测序方法首次测定贵州3个地方猪种(白洗猪、从江香猪、黔北黑猪)共计57个个体线粒体DNA控制区的全序列,将它们与GenBank上已知的25个国内外猪种一起计算遗传距离,并构建系统发育树。结果表明,3个贵州地方猪种mtDNA D-loop区的序列长度为1 254-1 314 bp之间,贵州地方猪种遗传距离在0.002 9-0.007 2之间,白洗猪与黔北黑猪、从江香猪之间的距离最大,均为0.007 2。系统发育分析的结果支持中国家猪分别有南北两个母系起源的观点,且各地方猪种之间可能有基因交流。     

北京松山国家级自然保护区野生种子植物分布及物种组成分析

采取踏查、样方和样线相结合的方法,调查了北京松山国家级自然保护区内野生种子植物的分布状况,并对其种类组成和分布区类型进行了分析。调查结果显示：该保护区内共有野生种子植物92科382属721种,其中,裸子植物3科4属5种、被子植物89科378属716种;被子植物中包含双子叶植物78科298属569种和单子叶植物11科80属147种。含20种或20种以上的科有7个,包含的属、种数量均占该保护区野生种子植物属、种总数的40%以上,优势科现象明显;含1种和含2-4种的属分别有235和128个,具有绝对优势。该保护区野生种子植物科的分布区类型可分为8个,除世界广布科外,以泛热带分布型科和北温带分布型科为主;属的分布区类型可分为15个,以北温带分布型属为主,热带性质属与温带性质属的数量比为0.20。该保护区内有国家重点保护野生植物2种、北京市重点保护野生植物52种,其中包含兰科（Orchidaceae）植物14属18种以及数量极少的丁香叶忍冬（LoniceraoblataK.S.HaoexP.S.HsuetH.J.Wang）和北京市特有植物北京水毛茛（BatrachiumpekinenseL.Liou）;该保护区内还有7种具有入侵倾向的外来植物。此外,还有北京新记录植物3种,分别为柳叶野豌豆也Viciavenosa（Willd.exLink）Maxim.页、北方红门兰（OrchisroborowskiiMaxim.）和廻旋扁蕾也Gentianopsiscontorta（Royle）Ma页。研究结果表明：该保护区的野生种子植物区系具有典型的温带性质并有一定的过渡性。     

猪水泡病病毒VP2基因抗原区在大肠杆菌中的表达

利用RT_PCR技术 ,以SVDVHK’70为材料 ,扩增出VP2基因抗原区。将目的基因的PCR扩增产物直接进行双酶切 ,然后将酶切产物与酶切后的表达载体pGEX 4T_1进行连接 ,转化BL2 1菌体并提质粒 ,经酶切、PCR鉴定为阳性的重组质粒命名为pGEX_VP2 ,并测序。测序结果表明 ,目的基因插入的位置、大小和读码框均正确 ,表达载体构建成功。将含有阳性质粒的BL2 1菌液经IPTG诱导后进行SDS_PAGE分析 ,出现预期的目的蛋白条带 ,此目的蛋白经Westernblot检测确定其有免疫活性。     

水稻长颖壳突变体的形态发生、解剖结构观察及其遗传鉴定

长颖壳花器官突变体从野生稻(Oryza nivara Sharma et Shastry)和栽培稻(Oryza sativa subsp. indica Kato)杂交后代材料中获得。该突变体的内外稃变长、呈叶状,且顶端表现不同程度的开裂;每朵颖花的雄蕊1~10枚不等;雌蕊1~3枚不等;子房上柱头1~5个不等;有的颖花形成雄蕊/雌蕊嵌合体;子房处常附有瘤状物;此突变体结实率为18.2%;花粉可育率为62.46%。利用扫描电镜观察了该突变体花器官形态发生过程,并经遗传分析鉴定该突变性状由单隐性基因(暂命名为lh)控制。本文讨论了lh基因和以前鉴定的其他突变体基因之间的关系,通过表型分析推测,突变体基因可能影响花器官数目同时具有拟南芥B类基因的部分功能。     

sTREM-1、PCT在社区获得性肺炎早期诊断中的价值

目的:探讨可溶性髓系细胞触发受体-1(soluble triggeringreceptorexpressed on myeloidcells-1,sTREM-1)、降钙素原(procalcitonin,PCT)在社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)早期诊断中的价值。方法:选择48例CAP住院患者(其中重症肺炎8例)和病毒性上呼吸道感染患者20例,所有病例均在入院后24小时内取血清,采用酶联免疫测定法(ELISA法)测定其血清sTREM-1、PCT水平,并应用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析二者对CAP的诊断价值。结果:入院后24小时内,普通肺炎患者、重症肺炎患者血清sTREM-1、PCT水平均明显高于对照组,且重症肺炎组明显高于普通肺炎组,差异均具有统计学意义(P0.01)。二者诊断CAP的ROC曲线下面积分别为0.884、0.788,联合二者诊断CAP的ROC曲线下面积为0.921。结论:sTREM-1、PCT均可作为CAP早期诊断有价值的参考标志物,sTREM-1比PCT更有参考价值,联合检测血清sTREM-1、PCT水平对CAP的早期诊断价值高于单一指标。     

采取过滤网上的灰尘检测小鼠肝炎病毒的新方法的研究--基因检出法的应用

采用PCR法对不同样品进行检测 ,其目的是寻求在小鼠肝炎病毒 (MHV)感染早期 ,可以尽快检测出MHV的一种最佳检测材料。将被感染小鼠的新鲜粪便、干燥粪便、笼具过滤网上的尘埃以及病毒液作为基因检测样品 ,进行检测并比较检出的灵敏度。将灵敏度量化 ,以稀释成不同浓度的cDNA用巢式PCR法能够检出的稀释界限的倍数表示。其结果 :第一 ,从过滤网中的尘埃所得到的cDNA是新鲜粪便的 10 0倍 ;第二 ,从粪便检出的灵敏度不以粪便的干燥而发生变化。第三 ,如果将病毒液放在室温下 ,会随室温干燥 ,检出的灵敏度会大幅度的降低。从以上结果看 ,在过滤网上的尘埃中有大量的MHV存在 ,尘埃中的一部分病毒 ,即使放在室温也能够以稳定状态存在。作者认为 ,将饲育装置的排气过滤器中粘着的尘埃收集 ,作为检测的样品 ,结合巢式PCR法进行测定 ,对于频繁地检测单个饲育笼具或单元式饲育室内的MHV比较简便易行 ,是一种较好的早期监测感染鼠肝炎病毒的方法。     

电气石对绿豆培养细胞生长的影响

目的：研究电气石对植物细胞生长的影响。方法：绿豆（Vigna radata Wilczek）胚乳细胞悬浮培养中添加电气石,测定电气石对细胞数目和生物量增长的作用及其浓度效应。结果：电气石能够促进绿豆悬浮细胞生长。在30mL的悬浮液中分别加入3、6、9和12g电气石,3g电气石处理对细胞生长的促进作用不显著;12g电气石处理表现出过量反应。6g和9g电气石处理对细胞生长的促进作用较理想,处理lOd后细胞数目分别比对照增加33％和38％;6g电气石处理12d后细胞的生物量为对照的1．8倍。电气石处理对细胞大小无显著影响。结论：电气石通过促进细胞增殖而显著促进绿豆细胞生长和生物量的增加。     

种蛋开窗技术及其对鸡胚发育影响的研究

种蛋开窗对禽胚实施操作的技术在转基因禽类、利用多能细胞保存禽类种质资源以及禽胚实验模型等领域的研究具有重要价值。以家鸡新产蛋(含有禽胚胎干细胞)为材料,研究出了种蛋开窗切块自动复位技术,并在此基础上以接近禽胚实施操作为目的,进行了不同封口方法、不同开窗位置和添加液体排除因开窗形成的空气泡等对种蛋孵化率影响的实验。结果表明:种蛋赤道面开窗不同封口方式对孵化率影响的差异不显著,最高孵化率可达到65%;赤道面开窗,通过添加液体排除空气泡的影响不会提高孵化率,空气泡的大小与孵化率没有明显相关性;种蛋气室端开窗(针刺透内壳膜操作胚胎)方式,比赤道面开窗方式的孵化率明显提高,两种方法能见胚率均在90%以上;采用以上技术对种蛋开窗、找胚和封口,制作效率在每人每小时30个以上。本文系统地研究和报道了种蛋开窗操作禽胚简单而实用的技术,有助于解决目前种蛋开窗技术复杂且孵化率低的困境。     

罗氏沼虾野田村病毒中国株RT-LAMP-LFD快速检测方法的研究北大核心CSCD

罗氏沼虾白尾病(White tail disease,WTD)是流行于罗氏沼虾苗种阶段的重要疾病,该病病原被确定为罗氏沼虾野田村病毒(Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV),为了建立罗氏沼虾野田村病毒中国分离株(MrNV-chin)的便捷、灵敏、特异的分子诊断方法,本研究根据罗氏沼虾野田村病毒RNA2基因保守序列的6个区域设计了4条特异性引物和1条检测探针,将环介导等温扩增技术与侧向流层析试纸(Lateral flow dipstick,LFD)相结合,建立了MrNV的RT-LAMP-LFD检测方法。结果表明,该方法的灵敏度是常规琼脂糖凝胶电泳的10倍;从核酸提取到检测结果判定仅需45min;反应特异性强,对其他虾类病毒WSSV、IHHNV、IMNV、TSV和YHV扩增结果均为阴性;操作简单,不需要复杂的仪器,在61℃水浴反应即可;利用LFD试纸显示结果,肉眼可直接观察判定。作为一种快速灵敏实用的分子诊断技术,该方法有利于罗氏沼虾白尾病的诊断与预防。     

自然环境下雷山髭蟾卵群发育观察

2015年10月至2016年4月期间,在雷公山保护区内的雷公山工区对雷山髭蟾(Vibrissaphora leishanensis)在野外自然环境下卵群发育进行了观察。共发现产卵场14个,卵群54团。雷山髭蟾卵群从受精卵发育到鳃盖褶期的平均时间为(127.71±1.38)d(107~157 d,n=54),产卵场的气温、水温和水深对胚胎发育有一定影响。