几种植物类伐昔洛韦水解酶基因的生物信息学分析

以拟南芥和蓖麻为重点,利用生物信息学对不同植物的类伐昔洛韦水解酶(valacyclovir hydrolase-like,VACVase-Like)蛋白的理化性质、保守结构域、信号肽、跨膜结构域、导肽、亲疏水性、二级结构及三级结构等进行预测和分析,并构建了该家族系统发生树。结果表明,除了可可树属于稳定蛋白外,其余均属于不稳定蛋白。该基因家族均含有明显的信号肽、导肽、跨膜结构和亲疏水结构,且结构组成上相似,属于分泌蛋白,但是对亚细胞定位分析发现,在不同植物中存在和发挥功能部位均不相同。分析结果可为植物VACVase-like的研究提供有价值的信息,为进一步研究其在植物体内的功能和作用机理提供依据。     

环介导等温扩增技术对解脲脲原体的临床检测

目的建立并优化环介导等温扩增(LAMP)技术对解脲脲原体(U.urealyticum)的检测,并应用于临床样本分析。方法针对U.urealyticum的urease基因设计LAMP引物;研究LAMP的最适温度、最佳检测时间及灵敏度和特异度;与传统PCR检测进行方法学比对。结果 LAMP技术检测U.urealyticum的最适温度和最佳时间分别是61℃和60 min,并且具有良好灵敏度和特异度,较普通PCR检测的灵敏度高出1 000倍。临床样本检测中,PCR和LAMP技术达到的灵敏度分别为25.00%和87.50%。两种方法的特异度均为100.00%。结论 LAMP与PCR相比在基层检测和大规模筛查方面有显著的优势和巨大的利用价值。     

跨病灶压力梯度检测在下肢动脉硬化闭塞症腔内治疗的应用价值

摘要 目的：探讨跨病灶压力梯度（TLPG）检测在下肢动脉硬化闭塞症腔内治疗中的应用价值。方法：选取2018年1月~2019年6月于长沙市第一医院住院并进行腔内治疗的73例下肢动脉硬化闭塞症患者,造影证实管腔病灶,并通过管腔真径测量记录其狭窄程度。予导丝通过病灶后,进行病灶前-后的管腔压力的测定并记录干预前压力梯度值。根据患者临床表现、术前病灶影像学检查及压力梯度值,决定是否进行球囊扩张和/或支架植入干预治疗。完成所有干预后再次进行病灶近-远端测压,并记录干预后压力梯度值,分析干预前TLPG与Fontaine分期、踝肱指数（ABI）、疼痛评分的相关性,分析TLPG与管腔狭窄程度的相关性,并分析干预前后压力梯度值差值与ABI指数差值、疼痛评分差值的相关性。结果：Spearman相关分析结果显示,干预前TLPG与Fontaine分期、ABI指数、疼痛评分呈正相关（P<0.05）,TLPG与管腔狭窄程度未见明显相关性（P>0.05）,干预前后压力梯度值差值与ABI指数差值呈正相关（P<0.05）,与疼痛评分差值未见明显相关性（P>0.05）。结论：在腔内治疗过程中进行TLPG测定,可能成为指导下肢动脉硬化病变评估的客观精确指标,可能有助于临界性病变的干预指征把握,可能有助于客观评估干预的即时效果,从而为下肢动脉硬化闭塞症的规范腔内治疗,提供一定的指导和帮助。     

乳酸菌Enterococcuse faecalis TN-9低温蛋白酶的提纯及性质

对产自乳酸菌Enterococcuze fecalis TN-9的蛋白酶,进行了硫酸铵沉淀,DEAE—Sephadex A-25以及DEAE Cellulofine A-500离子交换层析的3步纯化和特性研究。纯化酶Native PAGE显示1条蛋白带。SDSPAGE和凝胶层析分子量分别为30ku及69ku。纯化酶最适作用温度为30℃,最适作用PH为7．5～8．0,在pH6．0～9．5和45℃以下条件下稳定,在0℃下显示了6．1％的相对活性,60℃以上热处理完全失去酶活。该酶被EDTA-2Na,Hg^2＋、Cu^2＋、Ni^2＋、Ag^2＋、Co^2＋及Pepstatin A不完全抑制。Zn^2＋对蛋白酶具有明显的激活作用。纯化酶作用于偶氮酪蛋白的Km和Vmax分别为0．098％和72mg／（h·mg）。该酶为N末端VGSEVTLKNS的明胶酶（Gelatinase）的一种,性质属于低温蛋白酶。     

魔芋高效液相指纹图谱的建立方法研究

利用高效液相色谱建立了以魔芋叶片中水溶性氨基酸为标识的指纹图谱分析方法。分析结果表明:同一品种不同部位的魔芋叶片具有相似的指纹图谱;同一品种、不同育龄的叶片及不同品种相应部位叶片的指纹图谱不同。为此,采用该指纹图谱库分析方法,可以鉴别不同品种、育龄的魔芋资源,为魔芋的新品种选育提供依据。     

中华蜜蜂精巢和卵巢差异表达基因分析

[目的]在蜂群中,雄蜂与蜂王都有着发育完全的性腺,但两者达到性成熟的时间却是不同步的.本研究旨在探究中华蜜蜂Apis cerana cerana雄蜂与蜂王生殖腺的基因表达差异.[方法]利用Illumina测序技术对中华蜜蜂雄蜂精巢与蜂王卵巢转录组差异表达基因(differentially expressed genes...     

青岛地区变应性鼻炎患者合并哮喘的流行病学调查研究

目的:调查青岛地区变应性鼻炎患者合并哮喘的患病率及相关因素。方法:设计"青岛地区变应性鼻炎问卷调查表"。采用多阶段抽样及整群抽样的方法,调查青岛地区常住(5年及5年以上)居民,年龄在5-70岁,均无高血压、糖尿病、风湿性疾病及精神障碍性疾病的居民。共调查人数为2052人:调查分三个阶段:问卷调查阶段、根据问卷结果筛选AR可疑对象、对AR可疑对象进行专科检查及变应原皮肤点刺试验以确诊。对结果进行统计学处理。结果:发放问卷总数为2400份,有效问卷为2052份,有效率为85.5%,青岛地区5-70岁居民AR患者248例,其中20例合并支气管哮喘,AR患者合并哮喘的患病率为8.06%,其中男7.14%,女9.26%,男女AR患者合并哮喘的患病率差异无统计学意义(X2=0.36 P>0.05)。结论:青岛地区变应性鼻炎患者合并哮喘的患病率为8.06%,初步了解青岛地区人群中变应性鼻炎合并哮喘的现状,为临床医生对其综合治疗并制定合理有效的治疗方案提供理论基础。     

清脑复神液治疗COPD失眠的临床观察

目的:观察中成药清脑复神液(四川中方制药)对COPD失眠的疗效及对呼吸中枢的安全性;方法:将88例病人随机分为2组:治疗组48人给予口服清脑复神液20ml,每日两次治疗,对照组每晚口服VitB1片10mg,共7d.阿森斯失眠量表(AIS)判定疗效,同时查血气分析测定PaO2、PaCO2.结果:治疗组治疗后AIS评分与治疗前比较明显降低(P＜0.01),两组治疗后AIS评分存在显著差异(P＜0.01);对照组治疗前后AIS评分无明显差异(P＞0.05),两组病人治疗后PaO2、PaCO2无明显差异(P＞0.05).结论:清脑复神液能改善COPD失眠患者的睡眠质量,且对COPD患者无明显呼吸抑制作用.     

抗肠炎沙门氏菌单链抗体制备及其特异性分析

目的:利用基因工程技术制备抗肠炎沙门氏菌的单链抗体.方法:从抗肠炎沙门氏菌单克隆抗体的杂交瘤细胞中纯化RNA,反转录后扩增出抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片段,采用重叠延伸的方法,用柔性多肽Linker接头(Gly4 Ser)3按VL-Linker-VH方式将VH基因和VL基因拼接成单链抗体基因片段后,连接到pGEX-4T-1载体上,进行重组转化.挑取阳性克隆,经IPTG诱导后,通过GST柱进行亲和层析,最后利用ELISA检测抗体的活性.结果:成功构建了表达抗肠炎沙门氏菌单链抗体的基因工程菌株,经SDS-PAGE和ELISA检测结果表明,诱导表达的单链抗体scFv分子量约为60 kDa,其能特异与肠炎沙门氏菌结合,但与副甲伤寒沙门氏菌、鸭沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌有轻度交叉反应.结论:成功构建了抗肠炎沙门氏菌单链抗体的表达菌株,表达的单链抗体scFv可作为沙门氏菌的检测的候选抗体分子.     

干旱叠加海平面上升、氮负荷增加对河口潮汐沼泽生态系统净CO2交换的影响

河口潮汐沼泽湿地是全球重要的蓝碳生态系统之一。海平面上升和氮负荷增加是入海河流河口湿地面临的两个主要环境问题。近年来,干旱事件频发,干旱及其与海平面上升、氮负荷增加的叠加将如何影响河口潮汐沼泽湿地生态系统净CO₂交换,目前还未见报道。2020年夏秋,福建沿海经历了数月严重的气象干旱,这为揭示干旱对河口潮汐沼泽湿地生态系统净CO₂交换量(NEE)和生态系统呼吸(ER)的影响提供了一个契机。分别于2019年8—10月(正常天气)和2020年8—10月(干旱天气),在闽江河口微咸水短叶茳芏沼泽湿地运用光合作用测定仪+箱法测定不同处理(对照、模拟海平面上升、模拟氮负荷增加、模拟海平面上升+模拟氮负荷增加)短叶茳芏湿地生态系统NEE和ER,以期揭示气象干旱与海平面上升、氮负荷增加的叠加对河口沼泽湿地生态系统净CO₂交换的影响。与正常天气相比,干旱天气下各处理(包含对照)的NEE均显著降低(P<0.05);对照、海平面上升以及氮负荷增加处理样地的ER显著减少(P<0.05),海平面上升+氮负荷增加处理ER显著增加(P&l...