白介素11拮抗剂对实验性小鼠肺纤维化的作用

目的: 观察拮抗白介素11(IL-11)对博来霉素(BLM)诱导的实验性小鼠肺纤维化的作用。方法: 将120只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、IL-11拮抗剂组、BLM组和BLM+IL-11拮抗剂组(每组各30只)。BLM组和BLM+ IL-11拮抗剂组小鼠一次性气管注射BLM(1.5 mg/kg)诱导肺纤维化。于造模当日开始,IL-11拮抗剂组和BLM+IL-11拮抗剂组小鼠每间隔3 d尾静脉注射IL-11拮抗剂IL-11 Rα FC(2.5 mg/kg)。观察各组小鼠生存状态。于造模后第21日取肺组织进行HE染色、Masson染色以及Ashcroft评分评价肺纤维化程度。通过碱水解法测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量;采用Real-time PCR和Western blot检测肺组织中Collagen I、Collagen III和α-SMA 的基因和蛋白表达;采用酶联免疫吸附法测定肺组织中TGF-β1含量。结果: 与正常对照组相比,BLM可降低小鼠存活率(P＜0.05),破坏肺组织结构,导致大量胶原沉积,显著升高HYP含量、肺组织中Collagen I、Collagen III和α-SMA的基因和蛋白表达(P＜0.05),以及TGF-β1含量(P＜0.05)。而IL-11 Rα Fc处理可改善肺纤维小鼠的生存率,减轻肺组织病理学改变以及胶原沉积,减少肺组织中HYP含量(P＜0.05),下调肺组织中Collagen I、Collagen III和α-SMA的基因和蛋白表达(P＜0.05),以及TGF-β1含量(P＜0.05)。结论: IL-11拮抗剂可减轻BLM诱导的小鼠肺纤维化,为临床治疗肺纤维化提供了新思路。     

吸入乙酰半胱氨酸对博莱霉素导致的大鼠肺纤维化的影响

目的:研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)雾化吸入对于博莱霉素(BLM)导致的大鼠肺纤维化的影响作用。方法:取清洁SD大鼠100只,平均分为10小组,1小组为对照组,其余每3小组为一组,分别为模型组,防治组,治疗组,通过在大鼠气管中注入BLM的方法来制造大鼠肺纤维化模型,防治组在造模前的7天以及造模后的7天内,治疗组在造模后的7天内,分别给予NAC雾化吸入治疗。在成功造模后的第7天、14天、28天,每组处死1小组大鼠,取出病理组织,通过免疫组化方法来观察肺组织纤维化的程度。研究NAC对大鼠肺纤维化的影响。结果:与模型组对比,防治组和治疗组在纤维化程度上明显较轻(P0.05)。结论:吸入NAC对于博莱霉素导致的大鼠肺纤维化有明显的抑制作用,而且防治组疗效明显好于治疗组。既提前7天用药,效果更明显,大鼠获益更多。     

血红素氧合酶-1与肺纤维化

血红素氧合酶-1（Hene Oxygenase-1）是一种氧化应激反应蛋白,广泛存在全身各组织器官。HO-1及催化产物组成了重要的内源性保护系统,具有调控炎症、抗氧化损伤及抗细胞凋亡等作用,对于组织器官具有保护作用。肺纤维化发病机制复杂,氧化应激是肺纤维化的致病机制之一。HO-1是一种重要的抗氧化剂,其通过多种途径参与致病,在肺纤维化致病过程中发挥重要作用。     

腹腔注射百草枯构建小鼠肺纤维化模型

目的:探讨百草枯一次性腹腔注射致小鼠肺纤维化的病理改变及半数致死剂量(LD50),进而制备肺纤维化病理改变稳定的百草枯中毒小鼠肺纤维化模型。方法:60只正常雌性C57BL/6J小鼠被随机分为6组,10只/组,分别为正常对照组及百草枯给药30、40、50、60和80 mg/kg组,所有小鼠于造模后28 d处死,取其左肺用于病理观察(HE染色),并计算LD50及各组肺纤维化Ashcroft评级。结果:至观察期28 d,小鼠一次性腹腔注射百草枯溶液的LD50为55.1923 mg/kg;各染毒组均出现不同程度的肺纤维化改变,且注射剂量越高,肺纤维化病变越严重,但早期死亡率亦越高。结论:一次性腹腔注射百草枯可制备小鼠肺纤维化模型,40和50 mg/kg为较合适的造模剂量。     

博来霉素致肺纤维化大鼠形态学变化的实验研究

目的　观察博来霉素 (Bleomycin ,BLM)致大鼠肺纤维化模型的形态学及胶原含量的变化 ,探讨其发生机制。方法　健康SD大鼠 ,BLM 5mg (kg·bw)复制大鼠肺纤维化模型 ,于 1、3、7、14、2 8d ,观察肺纤维化形成的病理变化和肺匀浆羟脯氨酸 (HYP)的含量变化。结果　光镜所见 :给予BLM后 1- 7d肺部病变以肺泡炎为主 ,14d以后则进入慢性纤维化阶段。电镜所见 :模型组 3- 7dⅠ型细胞受损 ;Ⅱ型细胞增生 ,其内板层小体明显增多 ,线粒体嵴消失甚至出现空泡样变 ;14 - 2 8dⅡ型细胞数目减少 ,纤维组织增生。模型组肺组织匀浆HYP含量于 7d开始明显增加 ,2 8d达高峰。结论　博来霉素诱发大鼠肺纤维化早期以肺泡炎为主 ,7d开始出现肺纤维化 ,2 8d肺纤维化为主要病变     

腺苷对博莱霉素所致肺纤维化以及脾与骨髓等基质细胞坏死的影响

目的：应用双哌达莫（DPM）、腺苷（ADO）与ADO拮抗剂茶碱（TH）治疗博莱霉素（BLE）肺纤维化小鼠,观察肺、脾等病理变化,探讨肺纤维化发病机理,方法：实验第1天100只小鼠经气管注入BLE8．5mg.kg^-1,随机分BLE,DPM,ADO和TH四组,第2天起分别给予NS（100μl.d^-1)、DPM、ADO和TH,剂量为50mg.kg^-1.d^-1,共7天,第4－30天内处死动物,组织化学法观察肺内纤维变化与脾、胸腺、骨髓病理学改变。结果：BLE组和TH组第4－6生脾。胸腺须质与骨髓中许多基质细胞坏死导致组织严重疏松,BLE组第20天后脾与胸腺逐渐萎缩,肺与脾内网状纤维大量增加。DPM组与ADO组第4－6天脾、骨髓增死基质细胞较少。第30天肺未发生纤维化,淋巴器官未萎缩。结论：BLE能致脾、,骨髓等基质细胞大量坏死与严重组织疏松,内、外源性ADO能轻度减少基质细胞坏死,促进淋巴组织与造血组织增生,抑制BLE诱导的肺纤维化与淋巴器官萎缩。     

实验性肺纤维化形成过程中肺组织血管生成的动态变化

目的观察大鼠肺纤维化形成过程中肺组织血管生成的动态变化及其与肺纤维化形成的关系.方法免疫组织化学方法结合透射电镜观察博莱霉素组和对照组肺组织血管生成的变化,同时测定羟脯氨酸含量评估肺纤维化程度.结果博莱霉素组大鼠早期有血管计数一过性的明显升高,到第八天达到高峰,血管新生的区域与肺纤维化区域相吻合;随着胶原纤维的沉积,血管逐渐减少最后近于消失.电镜显示肺损伤后早期毛细血管内皮细胞表现出细胞核增大,常染色质增多,细胞器丰富等增生旺盛表现.结论肺纤维化早期血管生成显著,血管生成在肺纤维化发生发展中可能起重要作用.     

特发性肺纤维化患者血清血管生成素-2、潜在转化生长因子结合蛋白2、趋化因子配体14水平与预后的关系研究

摘要 目的：研究特发性肺纤维化（IPF）患者血清血管生成素-2（Ang-2）、潜在转化生长因子结合蛋白2（LTBP2）、趋化因子配体14（CXCL14）水平与预后的关系。方法：选取2019年3月～2020年3月河北医科大学第二医院东院区呼吸内科收治的100例IPF患者作为研究对象。将其按照随访结局分成预后不良组59例及预后良好组41例。比较两组Ang-2、LTBP2、CXCL14水平、肺功能指标、实验室指标以及一般资料,Pearson相关分析血清Ang-2、LTBP2、CXCL14水平与肺功能指标的相关性,多因素Logistic回归分析IPF患者预后的影响因素,受试者工作特征（ROC）曲线分析Ang-2、LTBP2、CXCL14对IPF患者预后的预测价值。结果：预后不良组血清Ang-2、LTBP2、CXCL14水平均高于预后良好组（P＜0.05）。预后不良组第1s用力呼气容积（FVC₁）、一氧化碳弥散量占预计值百分比（DLCO%）、动脉血氧分压（PaO₂）/氧体积分数（FiO₂）均低于预后良好组,而吸烟史、肺动脉高压人数占比高于预后不良组（P＜0.05）。Pearson相关性分析显示：IPF患者Ang-2、LTBP2、CXCL14水平均和FVC₁、DLCO%呈负相关（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示：FVC₁、DLCO%、PaO₂/FiO₂、吸烟史、肺动脉高压以及血清Ang-2、LTBP2、CXCL14水平是IPF患者预后不良的影响因素（P＜0.05）。ROC曲线分析结果显示：血清Ang-2、LTBP2、CXCL14三项联合检测预测IPF患者预后的曲线下面积高于上述三项指标单独检测。结论：IPF患者血清Ang-2、LTBP2、CXCL14水平与其预后密切相关,可作为评估其预后的辅助性指标。     

麦门冬汤加减方对特发性肺纤维化小鼠PI3K/AKT/mTOR通路的调控

摘要 目的：探讨麦门冬汤加减方对特发性肺纤维化小鼠转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、胶原I(Collagen type I, COL1A)表达的影响以及对PI3K/AKT/mTOR通路的调控作用。方法：将120只SPF级ICR小鼠随机分入空白组、模型组、吡菲尼酮组和麦门冬汤加减方组,用博来霉素(5 mg/kg)建立特发性肺纤维化模型,24 h后分别给予相应的药物治疗。吡菲尼酮组和麦门冬汤加减方组小鼠分别灌胃吡菲尼酮和中药麦门冬汤加减方,空白组和模型组小鼠灌胃生理盐水,各组均连续给药3周(21d)后取材。观察指标：各组小鼠的肺系数;肺组织病理变化;肺组织TGF-β1、α-SMA、COL1A的表达量(免疫组化);肺组织中α-SMA、COL1A、p-PI3K、p-AKT、mTOR的蛋白表达量(Western blot);肺组织中TGF-β1、α-SMA、COL1A的mRNA表达量(qPCR)。结果：模型组小鼠的肺系数显著增加,麦门冬汤加减方组肺系数显著降低;模型组小鼠肺组织中有较多炎性细胞浸润,胶原沉积明显,肺泡结构破坏严重,麦门冬汤加减方组小鼠肺组织病理改变较模型组明显减轻,胶原沉积大量减少,肺泡结构逐渐修复;麦门冬汤加减方组较模型组α-SMA、COL1A、TGF-β1的蛋白表达量显著降低(P＜0.01);麦门冬汤加减方组较模型组α-SMA、COL1A、p-PI3K、p-AKT、mTOR的蛋白表达量显著下调(P＜0.01);麦门冬汤加减方组较模型组α-SMA、COL1A、TGF-β1的mRNA表达量显著降低(P＜0.01)。结论：麦门冬汤加减方能有效改善博来霉素诱导的特发性肺纤维化,降低α-SMA、COL1A、TGF-β1的表达,可能是通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路,抑制上皮间充质转化,减少细胞外基质沉积而发挥作用。     

氨基胍治疗大鼠肺纤维化的效果及相关机制研究

为探讨氨基胍对肺纤维化大鼠肺的影响及机制,本研究选取健康清洁级SD大鼠45只作为研究对象。雌雄各半,随机分为对照组、模型组和观察组,每组15只。模型组和观察组大鼠采用博莱霉素建立肺纤维化模型,其中模型组每天腹腔注射1 mL/kg生理盐水,观察组每天腹腔注射20 mg/kg氨基胍,对照组每天腹腔注射1 mL/kg生理盐水。14 d后,采用明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)和MMP-13活性,HE染色观察肺组织,天狼猩红染色观察肺间质胶原以及免疫组化染色观察结缔组织生长因子(CTGF)表达。通过实验发现,观察组活性MMP-9含量总积分密度值(IDV)为4.200±1.304,明显低于模型组(p<0.05),与对照组比较差异无统计学意义(p>0.05);观察组和模型组活性MMP-13含量IDV比较差异无统计学意义(p>0.05),均明显高于对照组(p<0.05);观察组CTGF表达积分光密度值(IOD)为13.281±2.015,明显低于模型组(p<0.05),但仍高于对照组(p<0.05);HE染色观察,相比较模型组,观察组肺纤维化表现有所减轻;观察组间质胶原面积比例为(0.430±0.120)%,明显低于模型组(p<0.05),与对照组比较差异无统计学意义(p>0.05)。本研究表明氨基胍能有效治疗大鼠肺纤维化,其机制可能与抑制MMP-9活性和CTGF表达有关。