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GFP为报告基因在病原检测中具有检测方便快速、灵敏度较高、无细胞损害作用等优点,因此正日益广泛的应用于病原检测中。本文简述了GFP的特性,表达载体的构建及其在病原检测中的应用及研究进展。 相似文献
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董关木 《Virologica Sinica》1994,(3)
用多聚酶链反应(PCR)为检测手段,证明了成熟的人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)可携带前病毒DNA;用细胞病毒裂解液处理病毒样品或在病毒样品中只加磷酸盐缓冲液(PBS)代替细胞裂解液,结果发现只有病毒裂解液处理样品后才能检测到特异DNA.完整的病毒颗粒对DNA酶不敏感,而只有在病毒裂解以后才能对DNA酶敏感。当靶细胞膜上的CD_4受体被特异的单克隆抗体覆盖后不能吸附病毒时,DNA也不能被检测到,而且DNA的数员和病毒滴度的高低相一致。这些证据都提示这种和病毒相关的DNA存在于完整的有感染性的成熟病毒颗粒内部。 相似文献
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Vero细胞狂犬疫苗研究和生产进展 总被引:1,自引:0,他引:1
董关木 《微生物学免疫学进展》1994,22(1):51-56
自WHO推荐Vero细胞用于疫苗生产后,国内外相继进行以Vero细胞为基质的人用狂犬疫苗的研究和应用,Vero细胞以繁殖快,质量可高效控制,不污染外源因子,对不同毒株有广泛的适应性,且可在细胞反应器中进行工业化生产,病毒滴度高、成本低、疫苗质量好,有较大的发展前景。 相似文献
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为研究肾综合征出血热病毒疫苗侯选株R22核蛋白的结构与特性,应用逆转录PCR扩增了R22编码区基因,并将扩增产物克隆于pET-3a表达质粒,测得R22株S片段编码区序列为1 290个核苷酸.比较分析表明与Seoul型同源性高达96.2%,而与Hantaan型同源性仅为71.0%,与用血清学分型的结果一致.将克隆的pET-R22NP 转化到BL21后,IPTG诱导得到较高效的表达,产物纯化后进行Western blot分析,结果表达的NP仅与NP蛋白特异的单克隆抗体A35和3D9反应,而与G2蛋白特异的3D8不反应.表达的产物为汉坦病毒的诊断提供了特异性抗原. 相似文献
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为研究肾综合征出血热病毒疫苗侯选株R22核蛋白的结构与特性,应用逆转录PCR扩增了R22编码区基因,并将扩增产物克隆于pET-3a表达质粒,测得R22株S片段编码区序列为1290个核苷酸。比较分析表明与Seoul型同源性高达96.2%,而与Hantaan型同源性仅为71.0%,与用血清学分型的结果一致。将克隆的pET-R22NP转化到BL21后,IPTG诱导得到较高效的表达,产物纯化后进行Westernblot分析,结果表达的NP仅与NP蛋白特异的单克隆抗体A35和3D9反应,而与G2蛋白特异的3D8不反应。表达的产物为汉坦病毒的诊断提供了特异性抗原。 相似文献
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流行性出血热灭活疫苗人体试验的反应观察 总被引:5,自引:0,他引:5
由流行性出血热(EHF)病毒浙_(10)株感染沙鼠肾细胞,经0.05%β-丙内酯灭活研制成的EHF灭活疫苗,于4℃放置7个月后,对10名志愿者免疫三针(0天、7天、28天各注射1ml)。结果免疫者的局部和全身均无任何副反应。首针免疫后第28天,血清用反向被动血凝抑制试验(RPHIA)、ELISA和间接免疫荧光试验(IFA)检测EHF抗体,分别有9人、9人和8人阳转,第42天,血清用三种方法检测抗体均全部阳转。空斑减少中和试验(PRNT)于第28天有4人阳转,第42天有9人阳转。上述结果表明,此疫苗对人体有较好的的安全性和免疫原性。 相似文献
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为了解肾综合征出血热乳鼠脑II型纯化疫苗侯选病毒株R22的分子生物学特征,应用PCR方法克隆了R22株的全S基因,并测序分析比较,结果R22株的S片段的全基因序列共1774个核苷酸,编码429个氨基酸,与汉坦病毒I型76-118株核苷酸和氨基酸同源率分为73.7%,83.3%,而与同型的SR-11株则高达95.6%,97.9%,核苷酸序列比较发现R22在1701-1709有一个ACCTCCTA7个碱基的插入,1756-1760处有一5个碱基的缺失,应用DNASTAR软件,绘出了R22株病毒S基因编码的蛋白质的二级结构。 相似文献
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用多聚酶链反应(PCR)为检测手段,证明了成熟的人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)可携带前病毒DNA。用细胞病毒裂解液处理病毒样品或在病毒样品中只加磷酸盐缓冲液(PBS)代替细胞裂解液,结果发现只有病毒裂解液处理样品后才能检测到特异DNA。完整的病毒颗粒对DNA酶不敏感,而只有在病毒裂解以后才能对DNA酶敏感。当靶细胞膜上的CD4受体被特异的单克隆抗体覆盖后不能吸附病毒时,DNA也不能被检测到,而且 相似文献
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