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用PCR介导的基因重组法敲除酵母RAD16基因, 用羟胺处理酵母RAD16基因表达质粒, 获得RAD16基因突变库,并将其转化RAD16基因敲除的酵母细胞. 用平皿复制法获得温度敏感突变株 rad16-ts2,经互补试验证实,该突变表型为RAD16基因突变所致.将人cDNA表达文库转化rad16-ts2后筛选温度敏感拯救(rescue)表型, 回收拯救表型酵母细胞中的质粒. 测序结果表明,所获得的人cDNA克隆为HLTF/Zbu1/SMACA3基因.比较分析显示,人类该基因编码蛋白质氨基酸序列与酵母Rad16的同一性为32%,相似性则达50%.人HLTF/Zbu1/MACA3基因在HeLa细胞中过表达,可显著抑制过氧化氢损伤和UV照射诱导的细胞凋亡. 相似文献
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目的为了研究透明颤菌在微生物发酵工业生产中的应用,对东北寒带地区透明颤菌的理化特性进行研究。方法透明颤菌的分离采用培养基(PYA)富集培养与形态观察的方法,采用分光光度计、光扫描与CO差示光谱确定透明颤菌的生理生化性质。结果研究分离的透明颤菌在蛋白胨0.4%,酵母0.6%,NaAc 0.02%,pH7.8,34℃,150 r/min时可获得较大生长速率,NaAc浓度为1%,pH7.5-8.0时菌体生长最快。透明颤菌在稳定期血红素含量约为每克湿菌中11 nmol,样品在5000 r/min离心后出现血红蛋白的吸收峰。结论分离培养出寒带地区生长的透明颤菌,并确定了其理化性质,为在发酵工业生产中应用透明颤菌奠定了参考依据。 相似文献
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一株联苯降解菌的特性及鉴定* 总被引:2,自引:0,他引:2
从华北油田污染土壤中筛选出一株能够以联苯为唯一碳源和能源生长的菌株。该菌生长的最适联苯浓度为0.2%~0.4%,在联苯浓度为0.1%的培养基中培养36h后降解率达99.8%。该菌还可以降解苯甲酸钠、邻苯二酚、间苯二酚、对苯二酚和多氯联苯Aroclorl221、Aroclorl242等芳香族化合物。通过16S rDNA基因序列分析鉴定该菌为嗜吡啶红球菌(Rhodococcus pyridinovorans)。 相似文献
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嗜吡啶红球菌R04的联苯降解途径的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
通过GC-MS测定出嗜吡啶红球菌R04菌降解联苯的中间代谢物2,3-二氢二羟基联苯、2,3-二羟基联苯和苯甲酸,并测定了该菌的2,3-二羟基联苯双加氧酶、2-羟基-6-酮基-6-苯基-2,3-己二烯酸(HOPDA)水解酶和苯甲酸双加氧酶活性。最终确定了R04菌降解联苯的途径为2,3-二羟基联苯双加氧酶途径。 相似文献
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目的建立用Vero细胞检测柯萨奇病毒A组16型(CA16)滴度的方法,并对其适用性进行初步验证。方法通过对细胞种类的选择、细胞接种浓度和细胞病变判定时间的优化,建立测定CA16滴度的半数细胞感染剂量法(CCID50法),并对其进行初步验证。结果通过对病毒感染后细胞病变情况的观察,确定了以Vero细胞作为CA16病毒滴度检定用细胞。Vero细胞的最佳接种浓度和结果判定时间分别为5×104~1×105细胞/mL(即96孔板内每孔加入的最终细胞量为5×103~1×104细胞)和7 d。由4组人员对6批CA16病毒液进行重复检测,实验结果表明不同实验人员测定结果的变异系数(CV)在1.739%~4.974%之间,说明该方法测定结果重复性好,准确度高。结论该法简便、稳定,可以灵敏、准确地检测CA16病毒的滴度,可用于相关疫苗生产过程中的质量控制。 相似文献
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目的:比较三种方案治疗小儿重症肺炎的临床效果及安全性。方法:选取我院于2012年1月~2016年1月收治的120例重症肺炎患儿,按照不同的治疗方法随机分为观察组1(多巴胺联合多巴酚丁胺)42例,观察组2(多巴胺联合酚妥拉明)40例及对照组38例。比较三组患者临床疗效及炎症因子水平的变化。结果:观察组1的总有效率为90.48%,观察组2的总有效率为87.5%,均显著高于对照组的总有效率(63.16%)。观察组(1、2)的肺啰音消失时间、咳嗽症状消失时间、呼吸困难改善时间、退热时间以及住院天数均显著短于对照组(p0.05)。治疗后,三组患者的血清白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)、C反应蛋白(CRP)以及肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平与治疗前相比均显著降低,差异均具有统计学意义(p0.05),且观察组患者以上指标的水平均显著低于对照组(p0.05)。结论:多巴胺联合多巴酚丁胺和多巴胺联合酚妥拉明治疗小儿重症肺炎的疗效和安全性相当,二者均明显优于常规治疗。 相似文献
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用亚硝基胍(1 mg/mL)与超声波(200 W, 50 kHz)复合诱变的方法, 对产胆固醇氧化酶短杆菌Brevibacterium sp. DGCDC-82进行诱变处理, 得到一株桔红色突变株其产胆固醇氧化酶能力提高140%, 酶活达到1.24 U/mL, 又用同样的方法对桔红色突变株进行回复突变处理, 得到一株白色回复突变株和一株淡粉色回复突变株, 两株回复突变株产胆固醇氧化酶的能力又明显下降, 酶活分别为0.17 U/mL和0.69 U/mL。说明短杆菌Brevibacterium sp.产胆固醇氧化酶能力与其产红色素成正相关偶联关系, 这种相关性模型的建立可以作为以后诱变或定向进化研究的筛子。 相似文献
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疾病的导向显像研究是近年来生物技术及医疗领域研究的一个热点。它既包括了对导向物质的导向研究,又包括了有关放射性标记与检测的显像研究。文章主要对几种导向作用机制和显像方法进行了论述,并介绍了导向显像研究的发展前景。 相似文献
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以龙脑菊、菊花脑、野菊等15个菊花近缘种属植物幼苗为材料,对其进行不同梯度遮荫处理(全光照,遮光率60%,遮光率78%,遮光率95%),从形态和生理等方面的22个指标进行测定,以各项指标的耐阴系数作为衡量耐阴性的指标,利用主成分分析、回归分析和聚类分析法对其耐阴性进行综合评价。结果表明:遮光率78%时的植物茎粗(X2)、叶片厚度(X10)、叶绿素含量(X16),遮光率60%时的植物叶绿素含量(X15),以及遮光率95%时的植物叶面积(X13)、相对含水量(X14)和胞间二氧化碳浓度(X21)8个指标可作为菊花近缘种属植物耐阴性评价指标,建立菊花近缘种属植物耐阴性评价的数学模型:Y=82.876-0.153X2+0.094X10+0.741X13+0.084X14+0.054X15-0.087X16-0.472X2,(R2=0.998),预测精度大于0.97。13份材料的耐阴性极强,矶菊的耐阴性较差,即多数菊花近缘种属植物具有较好的耐阴能力。 相似文献