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31.
以质粒pMDTLT为模板,用PCR的方法扩增出LTB基因,然后将其插入到pETVP1质粒中VP1基因的上游,构建了含有融合基因LTBVP1的表达质粒pETLTBVP1.转化宿主菌BL21(DE3)LysS后进行诱导表达,诱导菌经SDS-PAGE显示重组蛋白以包涵体的形式表达,分子量约为39 kD;Western blotting分析表明,重组蛋白能与FMDV阳性血清及兔抗霍乱毒素(CT)血清反应,说明融合蛋白保持了LTB和VP1各自的免疫学活性.小鼠免疫实验表明:该融合蛋白通过腹腔接种小鼠能诱导产生较强的免疫应答反应,免疫鼠产生的血清抗体水平高于试验中商品口蹄疫疫苗免疫组. 相似文献
32.
33.
海南霉素在加热条件下能与茴香醛浓硫酸浓液反应产生深蓝色物质,在一定浓度范围内海南霉素效价与颜色深浅程度呈线性关系。所以比色法可以测定发酵液中海南霉素效价。此法快速,简便,重现性好。 相似文献
34.
35.
广谱重组苏云金杆菌的生产工艺研究 总被引:2,自引:0,他引:2
对既杀鞘翅目昆虫又杀鳞翅目昆虫的广谱重组Bt菌株LCJ 0 8,LCJ 12进行了摇瓶发酵和中试发酵。通过 2 .4吨罐发酵试验 ,优化了发酵培养基和发酵条件 ,发酵效价达到 140 0 - 170 0IU/μL(棉铃虫 )和 2 0 0 0CU/μL(柳兰叶甲 )。以直接喷雾干燥和加填充料后喷雾干燥方法生产的粉剂 ,效价分别达到 2 50 0 0 - 34 0 0 0IU/mg和 82 0 0IU/mg。以低倍浓缩工艺生产的悬乳剂 ,毒力效价 2 50 0IU/μL以上。 相似文献
36.
张佩吴恩应陈玉琴郭采平 《现代生物医学进展》2011,11(17):3377-3381
特异性抗体效价是生物制品活性(浓度)的重要标志,通常采用生物学方法来测定,并以抗体与其相应抗原反应产生的、可观察到的标准免疫反应来表示。抗原抗体间除发生特异性反应外,还会产生交叉反应,从而使特异性抗体效价的检测出现偏差,这在实际应用中亟需避免。特异性抗体效价检测技术是疾病诊断、特异性免疫球蛋白制备和疫苗评价等领域的关键技术,在生物制品质量控制及医学临床实践中意义重大。本文对抗体效价检测的常规技术及其研究进展进行简要综述,并对这些技术的特异性、灵敏性、检测周期及应用情况等方面进行比较分析,以期对特异性抗体效价检测技术有一个系统全面的认知,有利于研究人员在实际应用中选择合适的技术,共同推动抗体检测技术的发展。 相似文献
37.
38.
目的几丁质酶是昆虫重要的防御物质,本研究采用DNA-蛋白质联合免疫策略制备荒漠昆虫小胸鳖甲几丁质酶(MpCHI786)的抗血清,用于检测小胸鳖甲在外界不良条件下几丁质酶的变化。方法从小胸鳖甲成虫中提取总RNA,反转录后RT-PCR扩增Mpchi786 cDNA,构建原核表达载体pET30a-Mpchi786,在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导表达获得融合蛋白His-MpCHI786。对融合蛋白切胶纯化后与弗氏佐剂混合作为抗原。另外,构建真核表达质粒pcDNA3.0-Mpchi786,对小鼠尾静脉高压注射,8 h后RT-PCR检测其在肝脏的瞬时表达。以pcDNA3.0-Mpchi786肌肉注射免疫小鼠3次后,再用His-MpCHI786融合蛋白加强免疫2次,DNA免疫和免疫结束后收集免疫小鼠的血清,ELISA和Western blot法检测抗血清效价和特异性。结果 RT-PCR结果显示尾静脉高压注射8 h后,pcDNA3.0-Mpchi786质粒在小鼠肝脏有特异性表达。Western blot检测表明,用His-MpCHI786融合蛋白作为抗原,pcDNA3.0-Mpchi786DNA质粒免疫3次的抗血清和His-MpCHI786融合蛋白加强免疫2次后的抗血清都显示了特异性反应条带。ELISA检测结果显示抗血清效价高达1∶204 800以上。结论利用DNA-蛋白质联合免疫法能够获得效价高、特异性的小胸鳖甲几丁质酶MpCHI786的抗血清。 相似文献
39.
茹克亚·阿不来买迪尼亚提·买买提热碧娅·买买提古兰拜尔古力皮亚·艾海提 《现代生物医学进展》2012,12(26):5137-5139
目的:分析新生儿ABO溶血病的临床相关危险因素,提高对新生儿ABO溶血病的防治水平。方法:选择ABO血型不合的孕妇433例,根据以上产妇产前IgG抗A(B)效价、产妇妊娠次数和产妇年龄分别分组,分析各组产妇间发生新生儿溶血病(HDN)的差异及临床相关性。结果:产妇产前IgG抗A(B)效价、产妇妊娠次数和产妇年龄均与HDN发生率呈正相关性(P<0.05);IgG抗A(B)效价>256时,HDN发生率将显著提高(P<0.01);产妇妊娠次数和年龄增加后,HDN发生率将显著增加(P<0.01)。结论:夫妻血型不合的产妇进行产前保健时,应进行IgG抗A(B)效价检查,当IgG抗A(B)效价>64或IgG抗A(B)效价进行性增加时,应及早做好HDN的干预措施;通过减少意外妊娠及高龄产妇数量,可减少HDN的发生。 相似文献
40.
从酸奶中筛选到一株乳链菌肽产生菌A1-06,研究了各种条件因素对其合成能力的影响。通过发酵培养基的优化,在以质量分数2.0%的蔗糖为唯一碳源、0.25%的酵母膏为唯一氮源条件下,A1-06合成乳链菌肽的产率为0.3 g.L-1,效价为1.018×106U.L-1,比在基础培养基中合成的活性提高17%。Mn2+对A1-06的合成能力有抑制作用,而吐温-80则有促进作用。对乳链菌肽及其Zn2+和Fe2+的螯合物的抑菌效果进行了比较,结果表明,乳链菌肽螯合Fe(Ⅱ)对G-菌有抑制作用,6 h的抑菌率为50.3%,而乳链菌肽、乳链菌肽螯合Zn(Ⅱ)对G-菌无明显的抑制作用。 相似文献