脐带间充质干细胞对卵巢早衰家兔的治疗效果及机制研究

摘要 目的：分析脐带间充质干细胞对卵巢早衰家兔的治疗效果及机制研究。方法：经腹腔连续注射 2 d 环磷酰胺50 mg/（kg?d）建立卵巢早衰家兔模型。将建模成功的10只家兔随机分成模型组和治疗组,每组5只。建模一周后,治疗组家兔每天经耳缘静脉注射5×10⁶/mL脐带间充质干细胞混悬液2 mL,连续注射3 d。模型组家兔经耳缘静脉注射等量无菌生理盐水。于治疗后 0 d、7 d、14 d和28 d,取家兔静脉血检查血清激素表达水平。于治疗后28 d,检测家兔卵巢中生长卵泡数、封闭卵泡数、黄体数、富半胱氨酸蛋白61（CYR61）和结缔组织生长因子（CTGF）mRNA及蛋白质相对表达量。结果：治疗前,模型组和治疗组家兔血清雌二醇（E₂）、促卵泡生成素（FSH）、FSH/黄体生成素（LH）、抑制素B（INHB）和抗苗勒管激素（AMH）、均无显著差异（P＞0.05）。与模型组相比,治疗后治疗组家兔血清E₂和INHB水平显著上升（P＜0.05）,FSH水平显著下降（P＜0.05）,FSH/LH均无显著差异（P＞0.05）。随着治疗时间延长,治疗组家兔血清E₂和FSH水平周期性波动。治疗28 d后,与模型组相比,治疗组家兔血清AMH水平显著升高（P＜0.05）;卵巢组织中CYR61和CTGF mRNA及蛋白质相对表达量均显著升高（P＜0.05）;生长卵泡数显著升高（P＜0.05）;封闭卵泡数和黄体数均显著降低（P＜0.05）。结论：静脉注射脐带间充质干细胞可通过上调CYR61和CTGF的表达,促进卵泡生成,恢复卵巢功能,达到治疗卵巢早衰的临床效应。     

恒河猴(Macaca mulatta)生殖周期内性类固醇激素分泌规律的研究

本文用放射免疫测定法对7只雌性恒河猴(Macaca mulatta)的20个月经周期进行了雌二醇,孕酮和睾酮的动态测定分析,其中15个月经周期的中期都有睾酮和雌二酮峰(其峰值分别为1010.7±0.65ng/ml. 正常黄体期的血清孕酮水平不低于1ng/ml. 20个月经周期的平均天数为28.6±5.4天, 滤泡期和黄体期分别为11.9±2.6和19.2±6.3天. 月经周期可用公式Y=18.92±0.03×X²(Y:月经周期,X: 黄体期. R=0.9444)表示.实验结果表明, 测定周期内三种性类固醇激素可以准确确定排卵.睾酮在生殖受气内的分泌调节机制还待进一步研究.     

化疗对乳腺癌患者激素水平及月经状态的影响

目的:讨论乳腺癌患者术后辅助化疗对患者激素水平及月经状况的影响。方法:收集我院2014年1月-2015年8月初诊绝经前乳腺癌患者78例,绝经后乳腺癌患者50例,检测化疗前及化疗结束后的雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平,随访绝经前乳腺癌患者化疗期间及化疗后月经变化情况。结果:绝经前乳腺癌患者化疗后E2水平明显下降,FSH、LH水平明显升高,差异具有统计学意义(P0.05),绝经后乳腺癌患者化疗后E2水平无明显变化(P0.05),FSH、LH水平均下降,差异具有统计学意义(P0.05)。绝经前乳腺癌患者三个不同年龄段化疗后E2水平降低,而FSH、LH水平升高,差异具有统计学意义(P0.05),但三个不同年龄段患者化疗前后性激素水平组间比较均无统计学差异(P0.05)。绝经前乳腺癌患者三个不同年龄段化疗后闭经率比较差异具有统计学意义(P0.05)。绝经前乳腺癌患者化疗后闭经患者E2水平明显低于未闭经患者,FSH、LH水平明显高于未闭经患者,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:化疗可影响乳腺癌患者E2、FSH、LH水平,导致患者闭经,闭经情况与患者年龄有关。     

原癌基因FOS蛋白、雌二醇及其受体在中国林蛙不同时期精巢中的表达

用免疫细胞化学方法检测了原癌基因FOS蛋白、17β-雌二醇(E2)和雌激素受体(ER)在中国林蛙生精周期中不同时期精巢内的表达定位。结果显示:在中国林蛙生精周期的Ⅰ—Ⅴ期,E2和ER在精原细胞、精母细胞、精子细胞、精子、支持细胞和间质细胞内均有表达。在不同时期的精巢中,E2和ER在生精细胞的定位具有一致性:在Ⅱ—Ⅲ期,精子细胞的E2和ER阳性表达最强;在Ⅲ期,精子中E2和ER阳性反应强度显著高于Ⅳ—Ⅴ期(P<0.01)。在生精周期的Ⅰ—Ⅴ期,支持细胞中,E2和ER表达强度经历由强减弱再增强的变化过程。在生精周期的Ⅲ期,间质细胞中E2和ER阳性反应强度高于其他各期。除精子外的生精细胞,支持细胞和间质细胞内均有FOS阳性反应,其表达强度呈现阶段性变化。     

大鼠卵巢不同功能阶段时c-fos表达的动态变化

目的和方法：本文用免疫组织化学方法检测了成年大鼠卵巢于不同的功能阶段和未成年大鼠外源性激素诱导的卵巢于不同的功能阶段c-fos表达的变化以及与血清E2和P含量的相关关系。结果：在成年大鼠动情前期、动情期卵巢的间质腺和基质中及动情间期和妊娠期卵巢的黄体细胞和基质中有c-fos表达,c-fos蛋白阳性信号的表达范围和表达强度在动情前期卵巢较大,动情间期和动情期卵巢较低,妊娠期卵巢最大,这种变化与血清E2和P含量的变化呈明显的正相关关系。未成年大鼠,用DES使卵泡发育至窦前期时,在卵巢中未检测到有c-fos蛋白的表达,用PMSG使贸泡发育至排卵前期时在卵巢的间质腺和基质中有c-fos表达,用PMSG和hCG后4天形成的早期黄体化卵巢c-fos在黄体细胞和基质中的表达明显升高,而于用hCG后9天形成的晚期黄体化卵巢c-fos表达明显下降,这种变化也与血清E2和P含量的变化呈明显的正相关关系。结论：c-fos与卵泡发育、排卵、黄体形成和退化等功能密切相关。     

植物性雌激素genistein对豚鼠乳头肌的电生理效应

应用细胞内微电极技术,观察了genistein(GST)对豚鼠乳头肌的电生理效应。结果显示：（1）GST（10-100μmol/L)浓度依赖地缩短正常乳头肌动作电位时程;（2）对部分去极化乳头肌,GST（50μmol/L)除缩短动作电位时程外,还使动作电位幅值和超射值降低,零相最大上升速度减慢;（3）预先应用一氧化氮合酶抑制剂L-NNA（5mmol/L)。不影响GST（50μmol/L)的电生理效应;（4）单独应用17β-雌二醇（E2,5μmol/L)或GST（10μmol/L)时,动作电位各参数无明显变化。而预先应用同剂量的GST再加入E2,则动作电位时程缩短,结果提示,GST可能通过非NO途径抑制Ca^2 内流,从而影响豚鼠乳头肌电生理效应,并与E2有加强或协同效应。     

血管紧张素Ⅱ在小鼠卵泡闭锁中的作用

应用幼年小鼠经孕马血清促性腺激素（pregnant mares serum gonadotropin,PMSG)处理的动物模型,研究了卵泡从发育到闭锁动态变化过程中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的作用。结果表明：（1）24日龄小鼠给予PMSG（10IU/只）后6d时,卵巢中出现大量闭锁卵泡,颗粒细胞DNA琼脂糖电泳显示了梯形条带;（2）随卵泡闭锁发生,卵巢AngⅡ含量增加;（3）AngⅡ显著拮抗FSH刺激颗粒细胞雌二醇生成的作用。我们认为,AngⅡ参与了对小鼠卵泡闭锁的调节。     

经会阴盆底超声联合血清雌二醇对女性压力性尿失禁的诊断价值研究

摘要 目的：研究经会阴盆底超声联合血清雌二醇对女性压力性尿失禁（SUI）的诊断价值。方法：选取川北医学院附属医院2018年1月～2022年12月收治的女性SUI患者81例,记作观察组。另选取同期体检正常女性80例作为对照组。比较两组盆底超声参数以及血清雌二醇水平。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析上述各项指标单独和联合检测的诊断效能。结果：观察组静息状态下近段尿道和人体纵轴间夹角（UIA）、最大Valsalva动作下近段尿道和膀胱后壁的夹角（PUVA）以及尿道旋转角（URA）相较于对照组较高（均P＜0.05）。观察组血清雌二醇水平相较于对照组明显更低（P＜0.05）。经ROC曲线分析发现：各项盆底超声参数联合血清雌二醇诊断女性SUI的效能优于各项指标单独诊断。结论：经会阴盆底超声可诊断女性SUI,在联合血清雌二醇时诊断女性SUI的价值更高。     

酪氨酸对大鼠子宫胞浆雌,孕激素受体的影响

采用放射受体分析法,测定了动情周期不同阶段及去卵巢大鼠子宫胞浆雌二醇和孕酮受体含量,并观察了子宫腔内注射酪、丝、苏三种氨基酸对子宫胞浆雌。醇、孕酮受体含量的影响。结果表明：（１）Ｌ－酪氨酸对动情前期、动情期、间情期大鼠子宫胞浆雌二醇和孕酮受体都具有明显的降低作用。（２）Ｌ－酪氨酸也降低去卵巢大鼠子宫胞浆雌二醇和孕酮含量,即这一作用不是通过影响卵巢激素分泌实现的。（３）Ｌ－苏氨酸仅可降低动情期和间情期大鼠子宫胞浆孕酮受体含量,而对相应周期雌二醇受体没有明显作用。（４）Ｌ－丝氨酸和Ｌ－苏氨酸对去卵巢大鼠子宫胞浆雌二醇和孕酮受体均无影响。     

大鼠催乳素基因真核细胞可表达性质粒的构建及应用研究

７３５ｂｐ的ＰＲＬｃＤＮＡ片段从质粒ＰＲＬ－ＳＰ６５＃１中回收后,用粘性末端连接法将其重组到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３上,筛选出正向连接重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ和反向连接重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＡＳ。将重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬｓ和空载体ｐｃＤＮＡ３分别转入ＮＩＨ３Ｔ３细胞系,用Ｇ４１８筛选出阳性细胞后与未转染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞在加Ｅ２和不加Ｅ２的情况下,用原位杂交的方法,分别用ＰＲＬｃＤＮＡ探针和原癌基因ｃ－Ｈ－ｒａｓｃＤＮＡ探针进行检测,未转染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞在加Ｅ２和不加Ｅ２时都几乎无催乳素基因的表达,同样,转入空载体的ＮＩＨ３Ｔ３细胞也无ＰＲＬ的表达,而转入重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ的ＮＩＨ３Ｔ３细胞则有大量的ＰＲＬ基因的表达,与对照组相比有显著差异（Ｐ＜０．０１）。正常和转入空载体的ＮＩＨ３Ｔ３细胞有一定程度的原癌基因ｃ－Ｈ－ｒａｓ的表达,当分别加入Ｅ２和转入重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ后,ＮＩＨ３Ｔ３细胞中的ｃ－Ｈ－ｒａｓ基因表达水平都显著升高（Ｐ＜０．０５）。