大鼠催乳素基因真核细胞可表达性质粒的构建及应用研究

７３５ｂｐ的ＰＲＬｃＤＮＡ片段从质粒ＰＲＬ－ＳＰ６５＃１中回收后,用粘性末端连接法将其重组到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３上,筛选出正向连接重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ和反向连接重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＡＳ。将重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬｓ和空载体ｐｃＤＮＡ３分别转入ＮＩＨ３Ｔ３细胞系,用Ｇ４１８筛选出阳性细胞后与未转染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞在加Ｅ２和不加Ｅ２的情况下,用原位杂交的方法,分别用ＰＲＬｃＤＮＡ探针和原癌基因ｃ－Ｈ－ｒａｓｃＤＮＡ探针进行检测,未转染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞在加Ｅ２和不加Ｅ２时都几乎无催乳素基因的表达,同样,转入空载体的ＮＩＨ３Ｔ３细胞也无ＰＲＬ的表达,而转入重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ的ＮＩＨ３Ｔ３细胞则有大量的ＰＲＬ基因的表达,与对照组相比有显著差异（Ｐ＜０．０１）。正常和转入空载体的ＮＩＨ３Ｔ３细胞有一定程度的原癌基因ｃ－Ｈ－ｒａｓ的表达,当分别加入Ｅ２和转入重组体ｐｃＤＮＡ３－ＰＲＬＳ后,ＮＩＨ３Ｔ３细胞中的ｃ－Ｈ－ｒａｓ基因表达水平都显著升高（Ｐ＜０．０５）。     

囊性纤维化基因产物的新功能

囊性纤维化(CF)基因克隆两年来,对其蛋白质产物的功能不断有新的发现。过去许多研究证明,CF蛋白具有氯离子(Cl~-)通道作用。在CF患者中,CF蛋白发生异常,导致Cl~-分泌失调,不能正常通过细胞膜,水分排出较正常减少,因而形成一些典型体征如咸味皮肤和呼吸道内粘稠浓痰,后者又为致死性感染菌假单胞属细菌提供了滋生场所。最近,Qais Al-Awqati证明,CF蛋白作为跨膜传导调节因子(transmembrane conductance regulator,CFTR)在     

17－β－雌二醇诱发SD大鼠催乳素瘤形成过程中催乳素基因的表达

给ＳＤ大鼠皮下埋植内含１７－β－雌二醇硅橡胶管３０、６０、１２０天后，发现大鼠垂体重量随给药时间延长呈持续性增加；用放射免疫法测定血浆催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）含量，亦明显依次升高；用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交方法检测垂体细胞中ＰＲＬ基因，发现ＰＲＬｍＲＮＡ含量也依次有显著增加，但其增加却远低于血浆ＰＲＬ含量的增加，提示１７－β－雌二醇除了促进ＰＲＬ基因的转录外，还可能增加ＰＲＬｍＲＮＡ的翻译效率。     

Induction of Rat Prolactinoma by β－Estradiol and Its Relation to Expression of c－myc Oncogene

ＩｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆＲａｔＰｒｏｌａｃｔｉｎｏｍａｂｙβ－ＥｓｔｒａｄｉｏｌａｎｄＩｔｓＲｅｌａｔｉｏｎｔｏＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃ－ｍｙｃＯｎｃｏｇｅｎｅ￥ＸＵＲｏｎｇ－ｋｕｎ（许荣琨）；ＧＵＯＣｈｕａｎ－ｈａｉ（郭传海）；ＨＵＡＮＧＭａｎ－ｙ...     

胰多肽对大鼠垂体前叶β-内啡肽和催乳素释放的影响

本工作分在体和离体两部分实验。(1)给清醒自由活动的大鼠第三脑室内微量注射0.5和2.0μg的胰多肽(PP),观察到PP显著抑制前叶垂体β-内啡肽(β-EP)和催乳素(PRL)的静息分泌,抑制效应随PP的剂量增加而增大。此外,0.5μgPP能部分抑制限制性应激引起的PRL的释放;2.0μgPP只部分抑制此应激引起的β-EP的释放,并显著抑制应激时PRL的释放。(2)离体实验于体外培养的前叶垂体细胞中,分别加入0.05,0.625.1.00μgPP,一起孵育1h,看到0.625和1.00μg的PP显著抑制PTL的释放,抑制效应依PP的剂量增加而增大;上述三种剂量的PP对前叶垂体细胞β-EP的分泌均无影响。这些结果提示,PP可能通过某种下丘脑机制抑制前叶垂体β-EP和PRL的释放,也可直接作用于前叶垂体细胞抑制PRL的释放。