乙酰胆碱酯酶的定点突变法设计及其在生物传感器领域的应用

有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)的天然生物活性。近年来,AChE作为生物识别元素的生物传感器在杀虫剂残留量检测领域受到了广泛的关注。简要分析了AChE结构与功能关系,综述了近年来通过定点突变法设计AChE以增加对各种杀虫剂的检测灵敏度及其在生物传感器领域的应用现状,指出多种灵敏的AChE突变体同时被应用于多样品及多分析物的平行检测体系是该领域进一步的发展方向。     

《PLoS综合》：科学家开发出检测流感病毒新技术

日本理化研究所日前宣布,其科研小组开发出一种检测流感病毒的新技术,灵敏度相对大幅提高,可在发病后的很早阶段确认感染。有助于及时防止流感蔓延。     

抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备

[目的]小麦赤霉病菌产生的毒素不仅在病害发展过程中具有加重赤霉病的作用,而且污染谷物导致严重的食用安全性问题.由于赤霉病的普遍发生,有必要建立快速、灵敏、有效的毒素检测方法,本试验旨在制备可用于检测被脱氧雪腐镰刀菌烯醇污染的粮谷类特异性单克隆抗体.[方法]本实验首先将脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的衍生物3-半琥珀酰-脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-HS-DON-OVA)与卵清蛋白(OVA)采用碳化二亚胺法进行偶联得到人工抗原,以此人工抗原免疫BALB/C小鼠,取该鼠脾细胞与SP2/O鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌DON抗体的单克隆细胞株(382),并制备单克隆抗体腹水.[结果]经检测382的抗体类型及亚类均为IgG1,其轻链为κ链.腹水通过间接酶联免疫吸附测定效价在1×10-7以上.该单克隆抗体与脱氧雪腐镰刀菌烯醇特异性结合反应的50%抑制质量浓度为29 μg/L,除与3-acetyldeoxynivalenol(3-Ac-DON)的交叉反应率为78.38%,与其他脱氧雪腐镰刀菌烯醇结构类似物无交叉反应.[结论]本实验所制备的单克隆抗体有较高的灵敏度和特异性,具有较好的应用价值.     

实时定量RT-PCR检测鱼类传染性造血器官坏死病毒方法的建立与应用

建立了Taqman 实时定量RT-PCR方法检测传染性造血器官坏死病毒(IHNV).选取IHNV病毒的N蛋白基因保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针.以梯度稀释的含有IHNV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量RT-PCR反应以确定检测灵敏度.病毒浓度在5×106 -5个拷贝,共7个数量级的范围内,定量RT-PCR反应有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为5个拷贝.根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线.该方法具有特异性,对鲤春血症病毒(SVCV)、病毒性出血性败血症(VHSV)、传染性胰脏坏死病毒(IPNV)、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、EPC细胞系、牙鲆的核酸都没有扩增反应.在50批待检样品中,有3批鱼类感染IHNV,利用标准曲线进行了定量分析.实时定量RT-PCR检测IHNV方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在鱼病的快速检测上具有重要意义.     

用于磁共振成像装置的超高灵敏度超导线圈研制成功

当今磁共振（MRI）检查已成为医学影像学的重要诊断手段,但由于设备的价格昂贵,所以普及程度不高。美国、日本等先进国家的普及率已达到每百万人30台以上,而我国仅为每百万人1台的水平。用于人体的磁共振装置依其磁场强度划分,可分为高磁场与低磁场两大类型。前者一般为1．5T～3．0T,而后者一般为0．3T。由于我国的国情,一般区县级医院的配置级别都在低场水平。该级别的MRI装置虽然资金投入较少,但其功能及应用范围也较局限。如何提高低场磁共振装置的性能,扩展其功能已成为业界人士研究的热点课题。     

结核感染T细胞斑点试验对肺外结核诊断价值探讨

目的评价结核感染T细胞斑点试验（T—SPOT．TB）在肺外结核中的诊断价值。方法采用T—SPOT．TB试剂盒对疑诊或待排结核患者外周血中特异性T淋巴细胞进行检测。结果结核感染T细胞斑点试验的对结核病的敏感度、特异度分别为76．7％、84．3％。肺外结核组与肺结核组阳性率分别为92．0％和78．2％,差异有统计学意义（P〈0．05）。该数据显著高于结核菌素试验的31．4％和结核分枝杆菌培养的19．3％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论结核感染T细胞斑点试验是诊断肺外结核的快速敏感方法,值得在临床中推广使用。     

关于一次性输液器具细菌内毒素检查法的质量控制

用细菌内毒素检查法代替家兔热源检查法是我国近年发展起来的新的检验方法,该法具有操作简便、省时、重现性好,灵敏度高等优点,很快被推广。它不仅适用于药厂、药检等大规模生产单位及质检部门,也适用于医院制剂室、供应室及消毒监测部门,既节省人力、物力,又有良好的科学性。但是,细菌内毒素检查法属于生化检验,影响因素较多。例如,所用试剂灵敏度的准确性、实验室条件的标准化、实验操作的规范化等,都将影响实验结果的准确性。     

基于超高速摄影显微成像和超声散射的纳米包膜造影微泡包膜厚度估计

纳米包膜微泡和携带药物的生物微系统在超声成像和药物传递与释放等方面具有重要的应用价值。通过使用时间分辨率最小可达10ns的新型超高速显微成像装置,得到微泡在医用频率超声场中的半径振动曲线,对参数做灵敏度分析后,与理论预测结果做最小均方误差对比,经反向参数估计,获得包膜厚度估计值。结果表明,该技术在不破坏样品的务件下,能得到较为准确的包膜参数。     

应用巢式RT-PCR检测血样中丙型肝炎病毒RNA

采用巢式RT-PCR(NT-PCR)检测HCVELISA阳性和阴性的全血标本,并与逆转录PCR(RT-PCR)的检测结果相比较。结果表明,采用巢式RT-PCR检测160例HCVELISA阳性标本HCVRNA的检出率为96.3±1.44,60例HCVELISA阴性标本HCVRNA的检出率为8.3±3.30;采用RT-PCR检测的检出率分别为58.8±5.08和1.7±6.70。结果提示,巢式RT-PCR是一种简便有效的提高RNA检测灵敏度的方法,适于临床血样中丙型肝炎病毒的RNA检测。     

不同检验方法在尿路感染诊断中的临床价值

目的探讨尿干化学分析法与尿沉渣分析法在诊断患者尿路感染中的临床价值。方法收集2017年9月至2018年7月于重庆市黔江中心医院就诊的疑似尿路感染患者尿液标本400份,分别利用尿干化学分析及尿沉渣分析法检测标本,比较不同检测分析法的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。结果尿干化学分析法检测阳性率为42.25%(169/400),尿沉渣分析法检测阳性率为32.75%(131/400),尿沉渣分析法检测阳性率明显低于尿干化学分析法(X~2=7.7010,P=0.0070),差异有统计学意义。尿干化学分析法检测白细胞计数阳性率为25.25%(101/400)、亚硝酸盐阳性率为17.00%(68/400);尿沉渣分析法检测白细胞计数阳性率为24.25%(97/400),细菌计数阳性率为8.50%。尿沉渣分析法检测白细胞计数阳性率与尿干化学分析法比较,差异无统计学意义(X~2=0.1070,P=0.8060)。尿干化学分析法灵敏度为72.95%,特异度为90.67%,阳性预测值为89.35%,阴性预测值为75.76%;尿沉渣分析法灵敏度为57.97%,特异度为94.30%,阳性预测值为91.60%,阴性预测值为67.66%。尿干化学分析法检测的灵敏度及阴性预测值明显高于尿沉渣分析法(X~2=10.2660,P=0.0020;X~2=3.9930,P=0.0480),差异具有统计学意义。结论尿干化学分析法及尿沉渣分析法均有一定的临床诊断价值。可针对两种检测方法的联合应用进一步研究,以期提高尿路感染诊断的灵敏度及特异度。